文献综述 | 第1-20页 |
1 猪细小病毒病原特性 | 第11-12页 |
2 猪细小病毒基因学研究进展 | 第12-14页 |
3 猪细小病毒病疫苗研究进展 | 第14-20页 |
试验研究 | 第20-92页 |
第一章 猪细小病毒的分离鉴定及其结构蛋白VP2基因的克隆和生物信息学分析 | 第20-47页 |
1 材料与方法 | 第20-27页 |
·细胞和实验动物 | 第21页 |
·质粒和菌株 | 第21页 |
·酶和其它试剂 | 第21页 |
·标准血清及诊断试剂 | 第21页 |
·仪器设备 | 第21页 |
·猪细小病毒的分离鉴定 | 第21-23页 |
·猪细小病毒VP2基因的克隆及序列测定 | 第23-26页 |
·PPV-SC1 VP2基因的生物信息学分析 | 第26-27页 |
2 试验结果 | 第27-41页 |
·病毒的分离鉴定 | 第27-29页 |
·PPV-SC1 VP2基因的克隆 | 第29-32页 |
·PPV-SC1 VP2基因的生物信息学分析 | 第32-41页 |
3 分析与讨论 | 第41-45页 |
·关于猪细小病毒的分离鉴定 | 第41-42页 |
·关于PPV VP2基因的PCR扩增 | 第42-43页 |
·关于克隆阳性质粒的鉴定 | 第43页 |
·关于DNA序列的生物信息学分析方法思路及PPV VP2部分生物信息学分析 | 第43-45页 |
4 结论 | 第45-47页 |
第二章 含PPV VP2和绿色荧光蛋白双基因的PRV基因缺失表达载体质粒(pP1-2.EGFP.VP2)的构建 | 第47-67页 |
1 材料与方法 | 第47-55页 |
·质粒和菌株 | 第47页 |
·酶和其它试剂 | 第47-48页 |
·仪器设备 | 第48页 |
·含绿色荧光蛋白基因的伪狂犬病毒基因缺失转移载体质粒(pPⅠ-2.EGFP)的构建 | 第48-52页 |
·表达用PPV VP2引物合成 | 第52页 |
·表达用PPV VP2基因PCR扩增及其克隆和测序 | 第52页 |
·含PPV VP2基因的PRV基因缺失表达载体质粒(pPⅠ-2.EGFP.VP2)的构建 | 第52-54页 |
·pPⅠ-2.EGFP.VP2的转移特性及PPV VP2基因的表达检测 | 第54-55页 |
2 试验结果 | 第55-63页 |
·含绿色荧光蛋白基因的伪狂犬病毒基因缺失转移载体质粒(pPⅠ-2.EGFP)的构建 | 第55-59页 |
·表达用PPV VP2基因PCR扩增及其克隆和测序 | 第59-60页 |
·含PPV VP2基因的PRV基因缺失表达载体质粒(pPⅠ-2.EGFP.VP2)的构建 | 第60-62页 |
·pPⅠ-2.EGFP.VP2的转移特性及PPV VP2基因的表达检测 | 第62-63页 |
3 分析与讨论 | 第63-66页 |
·关于转移载体 | 第63-65页 |
·关于表达载体 | 第65页 |
·关于筛选标记 | 第65-66页 |
·关于pPⅠ-2.EGFP.VP2转染后的荧光检测和PPV VP2基因的表达检测 | 第66页 |
4 结论 | 第66-67页 |
第三章 伪狂犬病毒重组猪细小病毒VP2基因活载体疫苗株SA215(B)的构建及部分生物学特性研究 | 第67-92页 |
1 材料与方法 | 第67-78页 |
·毒株和细胞 | 第67-68页 |
·标准血清 | 第68页 |
·酶和其它试剂 | 第68页 |
·动物 | 第68页 |
·仪器设备 | 第68页 |
·伪狂犬病毒重组猪细小病毒VP2基因活载体疫苗株的构建 | 第68-75页 |
·猪细小病毒病-伪狂犬病重组病毒株的部分生物学特性研究 | 第75-78页 |
2 试验结果 | 第78-86页 |
·伪狂犬病毒重组猪细小病毒VP2基因活载体疫苗株的构建 | 第78页 |
·绿色荧光检测及其病变观察 | 第78页 |
·Dot-blots杂交检测鉴定重组病毒结果 | 第78-79页 |
·SA215(B)病毒DNA的BamHⅠ酶切及Southern转印杂交检测 | 第79页 |
·兔抗猪细小病毒IgG制备 | 第79-80页 |
·SA215(B)表达PPV VP2基因的SDS-PAGE电泳及Western印迹分析结果 | 第80-81页 |
·猪细小病毒病-伪狂犬病重组病毒株SA215(B)的部分生物学特性研究结果 | 第81-86页 |
3 讨论与分析 | 第86-90页 |
·关于外源基因导入哺乳动物细胞的方法和重组病毒的构建 | 第86-87页 |
·关于真核转染宿主细胞的选择 | 第87页 |
·猪细小病毒的浓缩及提纯 | 第87-88页 |
·关于蛋白质表达检测 | 第88页 |
·关于猪细小病毒VP2基因在PRV SA215株中的表达 | 第88-89页 |
·关于重组病毒SA215(B)株的部分生物学特性 | 第89-90页 |
4 结论 | 第90-92页 |
参考文献 | 第92-104页 |
致谢 | 第104-105页 |
附录 | 第105-126页 |
专业论文发表情况 | 第126页 |