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依尼奥小单孢菌原生质体融合育种及其分子生物学研究

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-9页
缩写第9-10页
第一章 绪论:西索米星及其产生菌第10-23页
   ·氨基糖苷类抗生素发展概况第10-13页
   ·小单孢菌产生的生物活性产物第13-16页
   ·小单孢菌分子生物学研究进展第16-19页
   ·西索米星产生菌的菌种改良研究第19-22页
   ·选题依据第22-23页
第二章 依尼奥小单孢菌原生质体融合育种研究第23-41页
 第一节 单亲灭活种内原生质体融合第23-28页
     ·材料第23-24页
     ·方法第24-25页
     ·伊尼奥小单孢菌灭活温度研究第25页
     ·原生质体融合第25-26页
     ·特征菌株的分离筛选第26页
     ·抗生素生产能力测定第26-27页
     ·小结第27-28页
 第二节 变异菌S96培养特性研究第28-35页
     ·材料第28-29页
     ·方法第29页
     ·T125与S96斜面形态特征比较第29页
     ·T125与S96浸没培养菌丝形态特征比较第29-31页
     ·S96菌株利用碳源的特性第31页
     ·T125与S96固态培养特性第31-33页
     ·常规保存方法对变异菌S96菌株的影响第33页
     ·S96回复培养的研究第33-34页
     ·小结第34-35页
 第三节 变异株S96深层培养的优化研究第35-41页
     ·材料第35-36页
     ·方法第36页
     ·培养基选择和优化第36-38页
     ·溶氧变化第38-39页
     ·变异株S96代谢曲线特性第39-40页
     ·S96中试放大结果第40页
     ·小结第40-41页
第三章 依尼奥小单孢菌分子生物学研究第41-96页
 第一节 抗性基因DNA序列钓取第41-54页
     ·材料第41-44页
     ·方法第44-48页
     ·小单孢菌质粒提取研究第48-49页
     ·西索米星抗性基因克隆研究第49-54页
 第二节 系列DNA片段克隆和亚克隆研究第54-60页
     ·LY102片段DNA的克隆和亚克隆第54-56页
     ·LY4片段DNA的克隆和亚克隆第56-58页
     ·LY5、LY19和LY20片段DNA的克隆和亚克隆第58-60页
 第三节 克隆DNA序列测定与基因分析第60-64页
     ·pLY102 DNA序列分析第60页
     ·pLY4 DNA序列分析第60-61页
     ·pLY5 DNA序列分析第61-62页
     ·pLY19 DNA序列分析第62-64页
 第四节 系列DNA片段序列比对分析第64-70页
     ·LY102序列DNA片段比对分析第64-67页
     ·LY4序列DNA片段比对分析第67-68页
     ·LY5序列DNA片段比对分析第68页
     ·LY19序列DNA片段比对分析第68-70页
 第五节 亚克隆片段抗性检测试验第70-73页
     ·转化子抗性检测第70页
     ·pLY102转化子抗性能力分析第70-71页
     ·pLY102转化子对西索米星类及其它抗生素的抗性测试第71-72页
     ·讨论第72-73页
 第六节 LY102的DNA序列和氨基酸序列比对分析第73-81页
     ·LY102亚克隆片段的DNA序列及其推测的氨基酸序列第73-74页
     ·LY102亚克隆片段与庆大霉素生物合成基因的比较第74-76页
     ·LY102与抗性基因sgm和grms的比对第76-78页
     ·LY102与抗性基冈sgm和grms的预测氨基酸之间的比对第78-81页
 第七节 LY102DNA片段的亚克隆及其功能分析第81-92页
     ·LY102片段功能分析策略第81-83页
     ·质粒pLY1021的克隆第83-85页
     ·质粒pLY1023的克隆第85-86页
     ·质粒pLY1022的克隆第86-89页
     ·LY102基因调控研究第89-92页
 第八节 功能LY102片段来源及其抗性的验证第92-96页
     ·pLY102克隆子转化不同宿主实验第92页
     ·亚克隆基因片段sisR来源的验证第92-94页
     ·引物P2扩增产物酶切分析第94-96页
结论第96-98页
参考文献第98-104页
致谢第104-105页
发表文章第105-106页
附录第106-108页

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