| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-14页 |
| 第1章 引言 | 第14-30页 |
| ·对虾白斑综合征病毒(WSSV)的研究进展 | 第14-21页 |
| ·WSSV的概况 | 第14-16页 |
| ·WSSV的蛋白质组的研究 | 第16-19页 |
| ·WSSV的致病机理探讨 | 第19-20页 |
| ·基于VP28蛋白的WSSV的防治研究 | 第20-21页 |
| ·对虾的免疫系统 | 第21-25页 |
| ·细胞免疫 | 第21-22页 |
| ·体液免疫 | 第22-24页 |
| ·获得性免疫 | 第24-25页 |
| ·枯草芽孢杆菌表达系统的研究 | 第25-27页 |
| ·枯草芽孢杆菌表达系统的特点 | 第25-26页 |
| ·枯草芽孢杆菌外源蛋白的分泌 | 第26-27页 |
| ·提高枯草芽孢杆菌蛋白分泌能力的策略 | 第27页 |
| ·实验的选题意义及技术路线图 | 第27-30页 |
| ·选题意义 | 第27-28页 |
| ·技术路线图 | 第28-30页 |
| 第2章 重组菌株B.subtilis-VP28的构建 | 第30-39页 |
| ·实验材料和仪器 | 第30-32页 |
| ·宿主菌和载体 | 第30-31页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第31页 |
| ·主要试剂的配制 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-37页 |
| ·WSSV基因组的提取 | 第32-33页 |
| ·PCR扩增VP28基因 | 第33页 |
| ·重组表达载体PW980-VP28的构建 | 第33-34页 |
| ·重组质粒鉴定和测序 | 第34-35页 |
| ·化学法B.subtilis 1A751感受态制备及转化 | 第35页 |
| ·B.subtilis 1A751表达菌株的构建 | 第35页 |
| ·重组菌株上清SDS-PAGE检测 | 第35-37页 |
| ·实验结果与分析 | 第37-38页 |
| ·VP28基因的克隆 | 第37页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第37页 |
| ·重组菌株上清SDS-PAGE检测 | 第37-38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 第3章 重组菌株B.subtilis-VP28芽孢体和营养体的耐受性评估 | 第39-48页 |
| ·实验材料和仪器 | 第39-40页 |
| ·主要试剂和材料 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39-40页 |
| ·主要试剂的配制 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-42页 |
| ·营养体的制备 | 第40页 |
| ·芽孢的培养和纯化 | 第40-41页 |
| ·模拟胃液环境的耐受性 | 第41页 |
| ·模拟肠液环境的耐受性 | 第41页 |
| ·耐温评估 | 第41-42页 |
| ·实验结果与分析 | 第42-45页 |
| ·重组菌株B.subtilis-VP28耐受胃环境评估 | 第42页 |
| ·重组菌株B.subtilis-VP28耐受肠道环境评估 | 第42-44页 |
| ·重组菌株B.subtilis-VP28对温度的耐受力 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-48页 |
| 第4章 重组茵B.subtilis.VP28对对虾免疫基因和细胞吞噬活性的影响 | 第48-65页 |
| ·实验材料和仪器 | 第48-50页 |
| ·主要试剂和材料 | 第48-49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·主要试剂的配制 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-55页 |
| ·菌液的制备 | 第50页 |
| ·实验虾料的制备 | 第50页 |
| ·对虾血细胞的收集 | 第50-51页 |
| ·血细胞吞噬WSSV活性的检测 | 第51-52页 |
| ·实时荧光PCR检测免疫相关基因 | 第52-55页 |
| ·实验结果与分析 | 第55-64页 |
| ·WSSV的荧光标记 | 第55-56页 |
| ·血细胞吞噬WSSV活性的检测 | 第56-57页 |
| ·免疫基因proPO、PE和LGBP的表达水平变化 | 第57-64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| 第5章 重组菌株B.subtilis-VP28在对虾肠道内的存活和体内的定位分布 | 第65-75页 |
| ·实验材料和仪器 | 第65-66页 |
| ·主要试剂和材料 | 第65页 |
| ·主要仪器 | 第65-66页 |
| ·主要试剂的配制 | 第66页 |
| ·实验方法 | 第66-69页 |
| ·芽孢体的培养和纯化 | 第66-67页 |
| ·实验虾料的制备 | 第67页 |
| ·重组菌株B.subtilis-VP28在对虾肠道内的定植存活 | 第67页 |
| ·重组菌株B.subtilis-VP28免疫对虾后在体内的定位分布 | 第67-69页 |
| ·实验结果与分析 | 第69-73页 |
| ·重组菌株B.subtilis-VP28芽孢在虾肠道内的定植存活 | 第69页 |
| ·重组菌株B subtilis-VP28芽孢在虾体内的定位分布 | 第69-73页 |
| ·小结 | 第73-75页 |
| 第6章 总结、创新和展望 | 第75-77页 |
| ·总结 | 第75-76页 |
| ·创新点 | 第76页 |
| ·展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-86页 |
| 硕士期间论文撰写情况 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
