| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-28页 |
| 1 β-葡萄糖苷酶与茶叶香气 | 第13-14页 |
| 2 茶树分子生物学研究进展 | 第14-15页 |
| 3 β-葡萄糖苷酶研究现状 | 第15-22页 |
| 4 原位杂交研究现状 | 第22-26页 |
| 5 本研究内容及目的意义 | 第26-28页 |
| 第二章 茶树β-葡萄糖苷酶cDNA克隆 | 第28-52页 |
| 1 材料与方法 | 第28-36页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·克隆载体流程图 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-36页 |
| ·仪器和试剂的预处理 | 第28-29页 |
| ·茶树总RNA的提取与鉴定 | 第29-30页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因片段克隆 | 第30页 |
| ·RT-PCR反应 | 第30-34页 |
| ·3′／5′RACE扩增 | 第34-35页 |
| ·序列分析 | 第35-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-50页 |
| ·茶树总RNA的分析 | 第36页 |
| ·逆转录cDNA第一链的鉴定 | 第36-37页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因特异片段的RT-PCR扩增分析 | 第37-38页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因特异片段克隆的酶切鉴定 | 第38页 |
| ·3′ RACE扩增分析 | 第38-39页 |
| ·5′ RACE扩增分析 | 第39-40页 |
| ·β-葡萄糖苷酶cDNA序列的分析 | 第40-50页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因预测蛋白的特征分析 | 第40-45页 |
| ·植物β-葡萄糖苷酶核苷酸序列比较 | 第45-46页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的氨基酸序列多重比较 | 第46-47页 |
| ·茶树与其它植物－葡萄糖苷酶的氨基酸序列多重比较 | 第47页 |
| ·β-葡萄糖苷酶系统进化树分析 | 第47-50页 |
| 3 讨论 | 第50-51页 |
| 4 小结 | 第51-52页 |
| 第三章 茶树β-葡萄糖苷酶cDNA原核表达 | 第52-66页 |
| 1 材料与方法 | 第52-57页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-57页 |
| ·β-葡萄糖苷酶cDNA片段的分离和克隆 | 第52-54页 |
| ·表达蛋白 | 第54-55页 |
| ·目的蛋白分析 | 第55-56页 |
| ·不同诱导时间、不同培养温度、不同IPTG浓度处理 | 第56页 |
| ·SDS-PAGE聚丙烯凝胶电泳 | 第56页 |
| ·表达蛋白的活性测定 | 第56-57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-63页 |
| ·Mβ-Glc编码区cDNA片段扩增 | 第57页 |
| ·重组表达质粒的酶切鉴定 | 第57-58页 |
| ·在pET-32a表达系统中的表达 | 第58-62页 |
| ·不同诱导时间的表达情况 | 第60页 |
| ·不同培养温度的表达情况 | 第60-61页 |
| ·不同IPTG浓度表达情况 | 第61-62页 |
| ·表达蛋白的存在形式 | 第62页 |
| ·表达蛋白活性测定 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 4 小结 | 第65-66页 |
| 第四章 茶树β-葡萄糖苷酶mRNA表达的研究 | 第66-84页 |
| 1 材料与方法 | 第66-72页 |
| ·材料 | 第66页 |
| ·主要仪器 | 第66页 |
| ·主要试剂 | 第66页 |
| ·转录载体pGEM－4ZF（＋）/-Glc构建（图24） | 第66页 |
| ·方法 | 第66-72页 |
| ·原位杂交技术路线 | 第66页 |
| ·构建pGEM-7ZF(+)重组质粒载体 | 第66-69页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因RNA探针制备 | 第69-70页 |
| ·石蜡切片 | 第70-71页 |
| ·杂交 | 第71-72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-81页 |
| ·重组质粒构建与与酶切 | 第72-73页 |
| ·茶树β-葡萄糖苷酶的mRNA表达 | 第73-81页 |
| ·营养器官的β-Glc-mRNA | 第73-74页 |
| ·不同品种的β-Glc-mRNA | 第74-76页 |
| ·春、夏、秋梢叶子β-Glc-mRNA | 第76-77页 |
| ·不同加工技术的影响 | 第77-78页 |
| ·茶树营养组织细胞中的β-Glc-mRNA | 第78-81页 |
| 3 讨论 | 第81-83页 |
| 4 小结 | 第83-84页 |
| 第五章 茶树β-葡萄糖苷酶基因的定位原位扩增研究 | 第84-91页 |
| 1 材料与方法 | 第84-85页 |
| ·材料 | 第84页 |
| ·主要仪器 | 第84页 |
| ·主要试剂 | 第84页 |
| ·方法 | 第84-85页 |
| ·原位PCR技术路线 | 第84-85页 |
| ·组织制备 | 第85页 |
| ·组织细胞渗透处理 | 第85页 |
| ·LISA | 第85页 |
| ·检测 | 第85页 |
| ·设立对照 | 第85页 |
| 2 结果与分析 | 第85-89页 |
| ·槠叶齐品种原位PCR定位 | 第85-88页 |
| ·福鼎大白茶品种原位PCR定位 | 第88-89页 |
| 3 讨论 | 第89-90页 |
| 4 小结 | 第90-91页 |
| 总结 | 第91-93页 |
| 研究展望 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-104页 |
| 附录 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 攻读博士期间发表的文章、参加研究课题 | 第106页 |
