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细胞因子对垂体人生长激素基因表达的调节及其机理的研究

英文缩写第1-7页
中文摘要第7-10页
英文摘要第10-14页
前言第14-17页
实验材料第17-24页
 一、细菌和质粒第17-20页
 二、克隆质粒所需的酶类及其他试剂第20-21页
 三、PCR扩增引物和Pit-1反义寡核苷酸第21页
 四、细胞系第21-22页
 五、细胞因子、细胞培养及检测试剂第22页
 六、细胞信号转导系统的激动剂和抑制剂第22-23页
 七、主要仪器第23-24页
技术路线和实验方法第24-37页
 一、技术路线第24-25页
 二、构建484-Luc2质粒第25-29页
 三、构建含有不同长度hGH基因调控序列的荧光素酶报告基因质粒第29-31页
 四、质粒的大量制备第31-32页
 五、建立稳定转染的GH3和MtT/S细胞系第32-33页
 六、瞬时转染实验第33页
 七、荧光素酶活性的测定第33页
 八、β—半乳糖苷酶活性的检测第33页
 九、大鼠GH(rGH)浓度的测定第33页
 十、细胞因子对大鼠垂体细胞GH分泌和合成的影响第33-34页
 十一、细胞因子对垂体细胞中hGH基因启动子活性的影响第34页
 十二、细胞因子影响hGH基因启动子活性可能涉及的细胞内信号转导途径第34页
 十三、细胞因子调节hGH基因表达与Pit-1蛋白的关系第34-35页
 十四、不同长度hGH基因启动子的相对转录活性及对细胞因子的反应性第35-36页
 十五、数据处理和统计分析第36-37页
实验结果第37-102页
 一、484-Luc2质粒的克隆与鉴定第37页
 二、含不同长度hGH基因启动子序列质粒的构建和鉴定第37-38页
 三、细胞因子对垂体细胞GH分泌和合成的影响第38-41页
 四、细胞因子对垂体细胞中hGH基因启动子活性的影响第41-45页
 五、细胞因子调节垂体细胞hGH基因启动子活性的胞内信号转导途径第45-50页
 六、细胞因子调节垂体hGH基因启动子活性与Pit-1蛋白的关系第50-55页
 七、不同长度hGH基因启动子的相对转录活性及对细胞因子的反应性第55-60页
 八、本实验所构建质粒测序图第60-68页
 九、本实验结果数据表第68-102页
讨论第102-111页
 一、稳定转染细胞系的建立第102-103页
 二、垂体细胞中,hGH基因启动子的基础活性及其调节机制第103-104页
 三、IFN-γ等细胞因子对hGH基因表达的调控及其可能的机理第104-108页
 四、TGF-β等细胞因子对hGH基因表达的调控及其可能的机理第108-109页
 五、在细胞因子的调节反应中,GH3和MtT/S细胞特点的比较第109-110页
 六、细胞因子调节垂体GH基因表达的生理及病理意义第110-111页
小结第111-113页
结论第113-114页
参考文献第114-126页
论文综述第126-152页
 一、细胞因子对垂体生长激素分泌的调节及其机制第126-140页
 二、MAPK信号转导通路及其对炎症反应中的调控第140-152页
博士在读期间发表的文章第152-153页
致谢第153页

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