英文缩写 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
英文摘要 | 第10-14页 |
前言 | 第14-17页 |
实验材料 | 第17-24页 |
一、细菌和质粒 | 第17-20页 |
二、克隆质粒所需的酶类及其他试剂 | 第20-21页 |
三、PCR扩增引物和Pit-1反义寡核苷酸 | 第21页 |
四、细胞系 | 第21-22页 |
五、细胞因子、细胞培养及检测试剂 | 第22页 |
六、细胞信号转导系统的激动剂和抑制剂 | 第22-23页 |
七、主要仪器 | 第23-24页 |
技术路线和实验方法 | 第24-37页 |
一、技术路线 | 第24-25页 |
二、构建484-Luc2质粒 | 第25-29页 |
三、构建含有不同长度hGH基因调控序列的荧光素酶报告基因质粒 | 第29-31页 |
四、质粒的大量制备 | 第31-32页 |
五、建立稳定转染的GH3和MtT/S细胞系 | 第32-33页 |
六、瞬时转染实验 | 第33页 |
七、荧光素酶活性的测定 | 第33页 |
八、β—半乳糖苷酶活性的检测 | 第33页 |
九、大鼠GH(rGH)浓度的测定 | 第33页 |
十、细胞因子对大鼠垂体细胞GH分泌和合成的影响 | 第33-34页 |
十一、细胞因子对垂体细胞中hGH基因启动子活性的影响 | 第34页 |
十二、细胞因子影响hGH基因启动子活性可能涉及的细胞内信号转导途径 | 第34页 |
十三、细胞因子调节hGH基因表达与Pit-1蛋白的关系 | 第34-35页 |
十四、不同长度hGH基因启动子的相对转录活性及对细胞因子的反应性 | 第35-36页 |
十五、数据处理和统计分析 | 第36-37页 |
实验结果 | 第37-102页 |
一、484-Luc2质粒的克隆与鉴定 | 第37页 |
二、含不同长度hGH基因启动子序列质粒的构建和鉴定 | 第37-38页 |
三、细胞因子对垂体细胞GH分泌和合成的影响 | 第38-41页 |
四、细胞因子对垂体细胞中hGH基因启动子活性的影响 | 第41-45页 |
五、细胞因子调节垂体细胞hGH基因启动子活性的胞内信号转导途径 | 第45-50页 |
六、细胞因子调节垂体hGH基因启动子活性与Pit-1蛋白的关系 | 第50-55页 |
七、不同长度hGH基因启动子的相对转录活性及对细胞因子的反应性 | 第55-60页 |
八、本实验所构建质粒测序图 | 第60-68页 |
九、本实验结果数据表 | 第68-102页 |
讨论 | 第102-111页 |
一、稳定转染细胞系的建立 | 第102-103页 |
二、垂体细胞中,hGH基因启动子的基础活性及其调节机制 | 第103-104页 |
三、IFN-γ等细胞因子对hGH基因表达的调控及其可能的机理 | 第104-108页 |
四、TGF-β等细胞因子对hGH基因表达的调控及其可能的机理 | 第108-109页 |
五、在细胞因子的调节反应中,GH3和MtT/S细胞特点的比较 | 第109-110页 |
六、细胞因子调节垂体GH基因表达的生理及病理意义 | 第110-111页 |
小结 | 第111-113页 |
结论 | 第113-114页 |
参考文献 | 第114-126页 |
论文综述 | 第126-152页 |
一、细胞因子对垂体生长激素分泌的调节及其机制 | 第126-140页 |
二、MAPK信号转导通路及其对炎症反应中的调控 | 第140-152页 |
博士在读期间发表的文章 | 第152-153页 |
致谢 | 第153页 |