第一章 研究综述 | 第1-50页 |
1 小麦叶锈病抗性基因研究进展 | 第11-35页 |
·小麦叶锈抗性基因的定名、染色体定位及特性 | 第11-18页 |
·抗病基因的表达 | 第18-22页 |
·寄主与病原物的互作 | 第18-19页 |
·遗传背景的影响 | 第19页 |
·抗病基因的抑制因子 | 第19-20页 |
·基因互补和基因互作 | 第20页 |
·温度的影响 | 第20-22页 |
·小麦品种及种质抗叶锈性基因的分析 | 第22-31页 |
·小麦品种及种质抗叶锈性基因的分析方法 | 第22-28页 |
·基因假设 | 第22-23页 |
·遗传分析 | 第23-24页 |
·抗病基因的染色体定位 | 第24页 |
·遗传标记 | 第24-28页 |
·小麦抗叶锈基因的应用 | 第28-31页 |
·春小麦中含有的抗叶锈基因 | 第28-30页 |
·冬小麦中常见的抗叶锈基因 | 第30-31页 |
·对小麦叶锈病的部分抗性 | 第31-33页 |
·Lr34 | 第32页 |
·Lr46 | 第32-33页 |
·小麦叶锈菌的成株抗性 | 第33页 |
·存在问题 | 第33-34页 |
·缺乏对小麦抗叶锈基因更深入的研究 | 第33-34页 |
·抗病基因利用不充分 | 第34页 |
·持久抗病性基因严重缺乏 | 第34页 |
·展望 | 第34-35页 |
2 DNA分子标记技术及其在小麦抗叶锈基因和小麦锈病菌研究中的应用 | 第35-47页 |
·DNA分子标记方法 | 第35-41页 |
·基于杂交技术的DNA分子标记 | 第35-36页 |
·限制性片断长度多态性标记 | 第36页 |
·染色体原位杂交 | 第36页 |
·基于PCR的DNA分子标记 | 第36-40页 |
·随机引物PCR | 第37页 |
·RAPD标记 | 第37页 |
·ISSR标记 | 第37页 |
·基于特异引物PCR的标记 | 第37-40页 |
·SPAR标记 | 第38页 |
·STS标记 | 第38页 |
·SSRP标记 | 第38页 |
·SCAR标记 | 第38-39页 |
·RGAs标记 | 第39页 |
·CATS标记 | 第39页 |
·小卫星标记 | 第39页 |
·SRAP标记 | 第39-40页 |
·基于PCR与限制性酶切技术结合的标记 | 第40页 |
·AFLP标记 | 第40页 |
·CAPS标记 | 第40页 |
·SSCP | 第40-41页 |
·SNP标记 | 第41页 |
·分子标记技术在小麦抗叶锈基因研究中的应用 | 第41-45页 |
·小麦抗叶锈基因分子标记 | 第41-42页 |
·抗病基因起源的研究 | 第42页 |
·绘制抗病基因连锁图 | 第42页 |
·抗病目的基因的定位 | 第42-44页 |
·质量抗病性状基因的定位 | 第42-43页 |
·数量抗病性状基因的定位 | 第43-44页 |
·抗病基因的分离与克隆 | 第44页 |
·分子标记辅助选择(MAS) | 第44-45页 |
·小麦抗叶锈病的分子机制研究 | 第45页 |
·在小麦叶锈锈菌研究中的应用 | 第45-46页 |
·小麦叶锈菌的系统分类 | 第45页 |
·叶锈菌的群体遗传 | 第45-46页 |
·毒性基因迁移及菌源传播 | 第46页 |
·病原菌的毒性变异机制 | 第46页 |
·分子标记技术及其在小麦叶锈病研究中存在的问题 | 第46-47页 |
·分子标记技术在小麦叶锈病研究中的应用前景 | 第47页 |
3 研究目的与意义 | 第47-50页 |
第二章 小麦基因组AFLP体系的建立 | 第50-82页 |
1 材料与方法 | 第50-58页 |
·所需主要仪器及试剂 | 第50页 |
·器材 | 第50页 |
·试剂 | 第50页 |
·材料与方法 | 第50-58页 |
·试验材料 | 第50页 |
·方法 | 第50-58页 |
·小麦DNA的提取 | 第50-51页 |
·测定DNA的浓度 | 第51页 |
·AFLP试验程序 | 第51-58页 |
2 结果与分析 | 第58-75页 |
·影响小麦基因组DNA AFLP扩增的因素 | 第58-68页 |
·小麦基因组DNA的质量 | 第58-59页 |
·限制性内切酶的用量及酶切时间 | 第59-60页 |
·接头的连接 | 第60页 |
·预扩增 | 第60-61页 |
·选择扩增 | 第61-68页 |
·模板浓度对扩增的影响 | 第61-62页 |
·扩增体系中Taq酶、dNTP及引物量的影响 | 第62-67页 |
·不同限制性内切酶对扩增的影响 | 第67页 |
·去离子的甲酰胺对扩增效果的影响 | 第67-68页 |
·不同PCR仪对扩增结果的影响 | 第68页 |
·小麦基因组的AFLP最佳反应体系及反应程序 | 第68-70页 |
·酶切体系 | 第68页 |
·接头的连接 | 第68-69页 |
·预扩 | 第69页 |
·选扩 | 第69-70页 |
·电泳及银染 | 第70-75页 |
·制板 | 第70-72页 |
·电泳 | 第72-74页 |
·银染 | 第74-75页 |
3 讨论与结论 | 第75-82页 |
·AFLP操作中的关键技术 | 第75-77页 |
·小麦基因组AFLP优化体系的特点 | 第77-82页 |
·优化后的体系耗资低 | 第77-78页 |
·扩增结果稳定 | 第78-82页 |
第三章 小麦抗叶锈近等基因系AFLP分析 | 第82-98页 |
1 材料与方法 | 第82-85页 |
·小麦材料 | 第82页 |
·模板DNA的制备 | 第82页 |
·AFLP引物及操作 | 第82-84页 |
·电泳、成像 | 第84-85页 |
·统计与分析 | 第85页 |
2 结果与分析 | 第85-93页 |
·AFLP标记特性 | 第85页 |
·小麦近等基因系和AFLP指纹图谱的建立 | 第85-92页 |
·聚类分析结果 | 第92-93页 |
3 结论与讨论 | 第93-98页 |
·小麦抗叶锈近等基因系之间存在明显的个体差异 | 第93-94页 |
·关于AFLP技术在构建指纹图谱的优越性 | 第94-95页 |
·限制性内切酶对遗传多态性的影响 | 第95页 |
·影响DNA指纹图谱的真实性的因素 | 第95-96页 |
·小麦近等基因系DNA指纹图谱多态性条带高的原因分析 | 第96-98页 |
第四章 小麦抗叶锈基因Lr37、Lr44的分子标记 | 第98-115页 |
1 试验材料与方法 | 第99-102页 |
·所需主要仪器及试剂 | 第99-100页 |
·仪器 | 第99页 |
·试剂 | 第99-100页 |
·材料与方法 | 第100-102页 |
·试验材料 | 第100页 |
·AFLP规程 | 第100页 |
·ThLr44、ThLr37×T F_2代抗叶锈性鉴定 | 第100-102页 |
·Lr44、Lr37的AFLP分子标记 | 第102页 |
·连锁分析 | 第102页 |
2 结果与分析 | 第102-111页 |
·小麦抗叶锈基因Lr44、Lr37的F_2代群体遗传抗病性鉴定 | 第102-104页 |
·小麦抗叶锈近等基因系ThLr44与Thatcher杂交的F_2代群体抗病性鉴定 | 第102页 |
·小麦抗叶锈近等基因系ThLr37与Thatcher杂交F_2群体抗病性鉴定 | 第102-104页 |
·与小麦叶锈病抗性基因Lr44连锁的AFLP分子标记 | 第104-108页 |
·引物筛选 | 第104-106页 |
·Lr44特异性引物的筛选 | 第106-108页 |
·与小麦叶锈病抗性基因Lr37连锁的AFLP分子标记 | 第108-111页 |
3 讨论 | 第111-113页 |
·关于与Lr44、Lr37紧密连锁的AFLP标记 | 第111-112页 |
·分子标记的辅助选择 | 第112-113页 |
·下一步工作 | 第113页 |
4 结论 | 第113-115页 |
·AFLP技术是获得与目的基因紧密连锁标记的一种有效的标记技术 | 第113-114页 |
·近等基因系与抗感群体结合是获得与目的基因紧密连锁分子标记的有效措施 | 第114-115页 |
第五章 我国124个小麦品种(系)抗叶锈基因推导与分子辅助鉴定 | 第115-150页 |
1 材料与方法 | 第115-122页 |
·试验材料 | 第115-116页 |
·试验方法 | 第116-122页 |
·苗期抗病性鉴定 | 第116页 |
·成株期抗病性的鉴定 | 第116页 |
·侵染型的记载方法 | 第116页 |
·抗病基因的推导方法 | 第116-120页 |
·DNA的提取及用于分子辅助选择的引物准备 | 第120页 |
·小麦STS、SCAR分析 | 第120-121页 |
·STS、SCAR扩增产物的电泳检测 | 第121-122页 |
2 结果与分析 | 第122-143页 |
·124个小麦品种(系)所含抗病基因的推导 | 第122-136页 |
·124个小麦品种(系)所含抗小麦叶锈病基因的苗期推导 | 第122-130页 |
·供试124个小麦品种(系)所含成株抗小麦叶锈病基因的推导 | 第130-136页 |
·供试小麦品种及育种材料抗叶锈基因的分子辅助鉴定 | 第136-143页 |
·Lr1在124个小麦品种(系)中的分布 | 第136-138页 |
·Lr9在124个小麦品种(系)中的分布 | 第138页 |
·Lr19在124个小麦品种(系)中的分布 | 第138-139页 |
·Lr24在124个小麦品种(系)中的分布 | 第139-140页 |
·Lr35在124个小麦品种(系)中的分布 | 第140-141页 |
·Lr38在22个号小麦品种(系)中的分布 | 第141-143页 |
3 讨论与结论 | 第143-150页 |
·我国124小麦品种(系)中含有一些重要的抗叶锈病基因 | 第143-144页 |
·PCR-STS及PCR-SCAR标记的有效性 | 第144页 |
·基因推导方法的评价 | 第144-145页 |
·成株抗叶锈基因的鉴定 | 第145-146页 |
·基因推导与分子标记两种方法鉴定结果不一致性分析 | 第146-147页 |
·分子辅助选择的优越性与存在的问题 | 第147-150页 |
·分子辅助选择的优越性 | 第147-148页 |
·分子辅助选择存在的问题 | 第148-150页 |
第六章 全文讨论、结论 | 第150-158页 |
1 讨论 | 第150-154页 |
·标记的类型与分子辅助选择 | 第150-152页 |
·抗病基因的克隆 | 第152页 |
·抗病育种 | 第152-154页 |
2 结论 | 第154-156页 |
·建立了一套适宜于小麦基因组的AFLP技术体系 | 第154-155页 |
·AFLP技术不仅是理想的指纹图谱构建工具,还是有效的标记技术 | 第155页 |
·建立了用于抗叶锈鉴定和毒性监测的小麦抗叶锈近等基因系和单基因系的DNA指纹图谱 | 第155页 |
·运用AFLP技术成功地标记了Lr37、Lr44 | 第155-156页 |
·我国拥有比较丰富的小麦抗叶锈菌资源,首次用分子标记证明我国拥有Lr35、Lr38基因,并在应用上具有前位性 | 第156页 |
3 展望与计划 | 第156-158页 |
参考文献 | 第158-172页 |
附件1 | 第172-174页 |
附件2 | 第174-176页 |
附件3 | 第176-180页 |
附件4 | 第180-183页 |
附件5 | 第183-184页 |
附件6 | 第184-185页 |
ABSTRACT | 第185-187页 |
致谢 | 第187-188页 |