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Lr37、Lr44AFLP分子标记及124个小麦品种(系)抗叶锈基因鉴定

第一章 研究综述第1-50页
 1 小麦叶锈病抗性基因研究进展第11-35页
   ·小麦叶锈抗性基因的定名、染色体定位及特性第11-18页
   ·抗病基因的表达第18-22页
     ·寄主与病原物的互作第18-19页
     ·遗传背景的影响第19页
     ·抗病基因的抑制因子第19-20页
     ·基因互补和基因互作第20页
     ·温度的影响第20-22页
   ·小麦品种及种质抗叶锈性基因的分析第22-31页
     ·小麦品种及种质抗叶锈性基因的分析方法第22-28页
       ·基因假设第22-23页
       ·遗传分析第23-24页
       ·抗病基因的染色体定位第24页
       ·遗传标记第24-28页
     ·小麦抗叶锈基因的应用第28-31页
       ·春小麦中含有的抗叶锈基因第28-30页
       ·冬小麦中常见的抗叶锈基因第30-31页
   ·对小麦叶锈病的部分抗性第31-33页
     ·Lr34第32页
     ·Lr46第32-33页
   ·小麦叶锈菌的成株抗性第33页
   ·存在问题第33-34页
     ·缺乏对小麦抗叶锈基因更深入的研究第33-34页
     ·抗病基因利用不充分第34页
     ·持久抗病性基因严重缺乏第34页
   ·展望第34-35页
 2 DNA分子标记技术及其在小麦抗叶锈基因和小麦锈病菌研究中的应用第35-47页
   ·DNA分子标记方法第35-41页
     ·基于杂交技术的DNA分子标记第35-36页
       ·限制性片断长度多态性标记第36页
       ·染色体原位杂交第36页
     ·基于PCR的DNA分子标记第36-40页
       ·随机引物PCR第37页
         ·RAPD标记第37页
         ·ISSR标记第37页
       ·基于特异引物PCR的标记第37-40页
         ·SPAR标记第38页
         ·STS标记第38页
         ·SSRP标记第38页
         ·SCAR标记第38-39页
         ·RGAs标记第39页
         ·CATS标记第39页
         ·小卫星标记第39页
         ·SRAP标记第39-40页
     ·基于PCR与限制性酶切技术结合的标记第40页
       ·AFLP标记第40页
       ·CAPS标记第40页
     ·SSCP第40-41页
     ·SNP标记第41页
   ·分子标记技术在小麦抗叶锈基因研究中的应用第41-45页
     ·小麦抗叶锈基因分子标记第41-42页
     ·抗病基因起源的研究第42页
     ·绘制抗病基因连锁图第42页
     ·抗病目的基因的定位第42-44页
       ·质量抗病性状基因的定位第42-43页
       ·数量抗病性状基因的定位第43-44页
     ·抗病基因的分离与克隆第44页
     ·分子标记辅助选择(MAS)第44-45页
     ·小麦抗叶锈病的分子机制研究第45页
   ·在小麦叶锈锈菌研究中的应用第45-46页
     ·小麦叶锈菌的系统分类第45页
     ·叶锈菌的群体遗传第45-46页
     ·毒性基因迁移及菌源传播第46页
     ·病原菌的毒性变异机制第46页
   ·分子标记技术及其在小麦叶锈病研究中存在的问题第46-47页
   ·分子标记技术在小麦叶锈病研究中的应用前景第47页
 3 研究目的与意义第47-50页
第二章 小麦基因组AFLP体系的建立第50-82页
 1 材料与方法第50-58页
   ·所需主要仪器及试剂第50页
     ·器材第50页
     ·试剂第50页
   ·材料与方法第50-58页
     ·试验材料第50页
     ·方法第50-58页
       ·小麦DNA的提取第50-51页
       ·测定DNA的浓度第51页
       ·AFLP试验程序第51-58页
 2 结果与分析第58-75页
   ·影响小麦基因组DNA AFLP扩增的因素第58-68页
     ·小麦基因组DNA的质量第58-59页
     ·限制性内切酶的用量及酶切时间第59-60页
     ·接头的连接第60页
     ·预扩增第60-61页
     ·选择扩增第61-68页
       ·模板浓度对扩增的影响第61-62页
       ·扩增体系中Taq酶、dNTP及引物量的影响第62-67页
       ·不同限制性内切酶对扩增的影响第67页
       ·去离子的甲酰胺对扩增效果的影响第67-68页
       ·不同PCR仪对扩增结果的影响第68页
   ·小麦基因组的AFLP最佳反应体系及反应程序第68-70页
     ·酶切体系第68页
     ·接头的连接第68-69页
     ·预扩第69页
     ·选扩第69-70页
   ·电泳及银染第70-75页
     ·制板第70-72页
     ·电泳第72-74页
     ·银染第74-75页
 3 讨论与结论第75-82页
   ·AFLP操作中的关键技术第75-77页
   ·小麦基因组AFLP优化体系的特点第77-82页
     ·优化后的体系耗资低第77-78页
     ·扩增结果稳定第78-82页
第三章 小麦抗叶锈近等基因系AFLP分析第82-98页
 1 材料与方法第82-85页
   ·小麦材料第82页
   ·模板DNA的制备第82页
   ·AFLP引物及操作第82-84页
   ·电泳、成像第84-85页
   ·统计与分析第85页
 2 结果与分析第85-93页
   ·AFLP标记特性第85页
   ·小麦近等基因系和AFLP指纹图谱的建立第85-92页
   ·聚类分析结果第92-93页
 3 结论与讨论第93-98页
   ·小麦抗叶锈近等基因系之间存在明显的个体差异第93-94页
   ·关于AFLP技术在构建指纹图谱的优越性第94-95页
   ·限制性内切酶对遗传多态性的影响第95页
   ·影响DNA指纹图谱的真实性的因素第95-96页
   ·小麦近等基因系DNA指纹图谱多态性条带高的原因分析第96-98页
第四章 小麦抗叶锈基因Lr37、Lr44的分子标记第98-115页
 1 试验材料与方法第99-102页
   ·所需主要仪器及试剂第99-100页
     ·仪器第99页
     ·试剂第99-100页
   ·材料与方法第100-102页
     ·试验材料第100页
     ·AFLP规程第100页
     ·ThLr44、ThLr37×T F_2代抗叶锈性鉴定第100-102页
     ·Lr44、Lr37的AFLP分子标记第102页
     ·连锁分析第102页
 2 结果与分析第102-111页
   ·小麦抗叶锈基因Lr44、Lr37的F_2代群体遗传抗病性鉴定第102-104页
     ·小麦抗叶锈近等基因系ThLr44与Thatcher杂交的F_2代群体抗病性鉴定第102页
     ·小麦抗叶锈近等基因系ThLr37与Thatcher杂交F_2群体抗病性鉴定第102-104页
   ·与小麦叶锈病抗性基因Lr44连锁的AFLP分子标记第104-108页
     ·引物筛选第104-106页
     ·Lr44特异性引物的筛选第106-108页
   ·与小麦叶锈病抗性基因Lr37连锁的AFLP分子标记第108-111页
 3 讨论第111-113页
   ·关于与Lr44、Lr37紧密连锁的AFLP标记第111-112页
   ·分子标记的辅助选择第112-113页
   ·下一步工作第113页
 4 结论第113-115页
   ·AFLP技术是获得与目的基因紧密连锁标记的一种有效的标记技术第113-114页
   ·近等基因系与抗感群体结合是获得与目的基因紧密连锁分子标记的有效措施第114-115页
第五章 我国124个小麦品种(系)抗叶锈基因推导与分子辅助鉴定第115-150页
 1 材料与方法第115-122页
   ·试验材料第115-116页
   ·试验方法第116-122页
     ·苗期抗病性鉴定第116页
     ·成株期抗病性的鉴定第116页
     ·侵染型的记载方法第116页
     ·抗病基因的推导方法第116-120页
     ·DNA的提取及用于分子辅助选择的引物准备第120页
     ·小麦STS、SCAR分析第120-121页
     ·STS、SCAR扩增产物的电泳检测第121-122页
 2 结果与分析第122-143页
   ·124个小麦品种(系)所含抗病基因的推导第122-136页
     ·124个小麦品种(系)所含抗小麦叶锈病基因的苗期推导第122-130页
     ·供试124个小麦品种(系)所含成株抗小麦叶锈病基因的推导第130-136页
   ·供试小麦品种及育种材料抗叶锈基因的分子辅助鉴定第136-143页
     ·Lr1在124个小麦品种(系)中的分布第136-138页
     ·Lr9在124个小麦品种(系)中的分布第138页
     ·Lr19在124个小麦品种(系)中的分布第138-139页
     ·Lr24在124个小麦品种(系)中的分布第139-140页
     ·Lr35在124个小麦品种(系)中的分布第140-141页
     ·Lr38在22个号小麦品种(系)中的分布第141-143页
 3 讨论与结论第143-150页
   ·我国124小麦品种(系)中含有一些重要的抗叶锈病基因第143-144页
   ·PCR-STS及PCR-SCAR标记的有效性第144页
   ·基因推导方法的评价第144-145页
   ·成株抗叶锈基因的鉴定第145-146页
   ·基因推导与分子标记两种方法鉴定结果不一致性分析第146-147页
   ·分子辅助选择的优越性与存在的问题第147-150页
     ·分子辅助选择的优越性第147-148页
     ·分子辅助选择存在的问题第148-150页
第六章 全文讨论、结论第150-158页
 1 讨论第150-154页
   ·标记的类型与分子辅助选择第150-152页
   ·抗病基因的克隆第152页
   ·抗病育种第152-154页
 2 结论第154-156页
   ·建立了一套适宜于小麦基因组的AFLP技术体系第154-155页
   ·AFLP技术不仅是理想的指纹图谱构建工具,还是有效的标记技术第155页
   ·建立了用于抗叶锈鉴定和毒性监测的小麦抗叶锈近等基因系和单基因系的DNA指纹图谱第155页
   ·运用AFLP技术成功地标记了Lr37、Lr44第155-156页
   ·我国拥有比较丰富的小麦抗叶锈菌资源,首次用分子标记证明我国拥有Lr35、Lr38基因,并在应用上具有前位性第156页
 3 展望与计划第156-158页
参考文献第158-172页
附件1第172-174页
附件2第174-176页
附件3第176-180页
附件4第180-183页
附件5第183-184页
附件6第184-185页
ABSTRACT第185-187页
致谢第187-188页

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