中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-22页 |
符号说明 | 第22-23页 |
序言 | 第23-26页 |
技术路线图 | 第26-27页 |
研究内容 | 第27页 |
第一章 氧化铁磁性纳米转运体系的构建 | 第27-44页 |
1.1 材料与方法 | 第27-32页 |
1.1.1 菌株和质粒载体 | 第27页 |
1.1.2 组织与细胞 | 第27页 |
1.1.3 试剂 | 第27页 |
1.1.4 实验方法 | 第27-32页 |
1.1.4.1 氧化铁纳米颗粒的制作 | 第27-28页 |
1.1.4.2 氧化铁纳米颗粒的修饰 | 第28页 |
1.1.4.3 氧化铁纳米颗粒浓度检测 | 第28页 |
1.1.4.4 质粒DNA的提取 | 第28-29页 |
1.1.4.5 氧化铁纳米颗粒DNA结合试验 | 第29-30页 |
1.1.4.6 氧化铁纳米颗粒DNA保护试验 | 第30-31页 |
1.1.4.7 电镜检测 | 第31页 |
1.1.4.8 Zeta电位检测 | 第31-32页 |
1.1.4.9 细胞毒性试验(MTT) | 第32页 |
1.2 结果 | 第32-44页 |
1.2.1 氧化铁纳米颗粒(IONP)的制作 | 第32-33页 |
1.2.2 氧化铁纳米颗粒的生物化学特性 | 第33-37页 |
1.2.3 氧化铁纳米颗粒-多聚赖氨酸(IONP-PLL)基因转运体系的建立 | 第37-42页 |
1.2.4 IONP-PLL纳米转运体系的细胞毒性实验 | 第42-44页 |
第二章 IONP-PLL的体外基因转运效率评价 | 第44-55页 |
2.1 材料与方法 | 第44-47页 |
2.1.1 菌株和质粒载体 | 第44页 |
2.1.2 组织与细胞 | 第44页 |
2.1.3 试剂 | 第44-45页 |
2.1.4 实验方法 | 第45-47页 |
2.1.4.1 体外细胞吞噬铁染色试验 | 第45页 |
2.1.4.2 体外报道基因转染试验 | 第45-46页 |
2.1.4.3 体外单链寡核苷酸的体外转运 | 第46-47页 |
2.2 结果 | 第47-55页 |
2.2.1 IONP-PLL体外细胞吞噬实验 | 第47-49页 |
2.2.2 IONP-PLL介导的质粒DNA的体外转运实验 | 第49-53页 |
2.2.3 IONP-PLL介导的单链寡核苷酸的体外转运 | 第53-55页 |
第三章 IONP-PLL的体内基因转运效率评价及其穿越血脑屏障的特性 | 第55-68页 |
3.1 材料与方法 | 第55-58页 |
3.1.1 菌株和质粒载体 | 第55页 |
3.1.2 动物 | 第55页 |
3.1.3 试剂 | 第55页 |
3.1.4 实验方法 | 第55-58页 |
3.1.4.1 小鼠尾静脉注射 | 第55-56页 |
3.1.4.2 体内细胞吞噬铁染色试验 | 第56页 |
3.1.4.3 组织电镜 | 第56页 |
3.1.4.4 荧光显微镜分析 | 第56页 |
3.1.4.5 流式细胞分析 | 第56-57页 |
3.1.4.6 胶质细胞染色 | 第57-58页 |
3.2 结果 | 第58-68页 |
3.2.1 IONP-PLL体内细胞吞噬实验 | 第58-61页 |
3.2.2 IONP-PLL介导的质粒DNA的体外转运实验 | 第61-65页 |
3.2.3 IONP-PLL穿过血脑屏障的特性 | 第65-68页 |
第四章 外加磁场对于IONP-PLL的靶向作用及其在恶性脑胶质瘤动物模型中的应用 | 第68-75页 |
4.1 材料与方法 | 第68-71页 |
4.1.1 菌株和质粒载体 | 第68页 |
4.1.2 组织与细胞 | 第68页 |
4.1.3 动物 | 第68页 |
4.1.4 试剂 | 第68-69页 |
4.1.5 实验方法 | 第69-71页 |
4.1.5.1 脑胶质瘤动物模型的建立 | 第69页 |
4.1.5.2 胶质瘤组织HE染色 | 第69页 |
4.1.5.3 外加磁场对于体外基因转运的影响 | 第69-70页 |
4.1.5.4 外加磁场对于在体内对于IONP-PLL的导向作用 | 第70-71页 |
4.2 结果 | 第71-75页 |
4.2.1 脑胶质瘤动物模型的建立 | 第71-72页 |
4.2.2 磁导向靶向系统 | 第72-75页 |
讨论 | 第75-91页 |
1. 目前常用的基因载体 | 第75-78页 |
2. 纳米颗粒的性质 | 第78-79页 |
3. 纳米基因转运体的研制 | 第79-83页 |
(1) 纳米基因转运体的优势 | 第79-81页 |
(2) 纳米微粒的表面修饰 | 第81-83页 |
4. 氧化铁纳米颗粒的应用 | 第83-86页 |
5. 影响氧化铁纳米转运体系体内外转染效率的因素 | 第86-89页 |
6. 血脑屏障和恶性脑胶质瘤的基因治疗 | 第89-91页 |
尚需继续深入研究的课题 | 第91-93页 |
结论 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-104页 |
综述 | 第104-112页 |
致谢 | 第112-114页 |
个人简历 | 第114-117页 |
附录 | 第117页 |