| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 上篇 文献综述 | 第11-29页 |
| 第一章 苹果病毒病 | 第11-17页 |
| 1 苹果病毒病的危害及特点 | 第11-12页 |
| ·苹果病毒病的危害 | 第11-12页 |
| ·对树势的影响 | 第11页 |
| ·对产量的影响 | 第11-12页 |
| ·对果实品质的影响 | 第12页 |
| ·苹果病毒病的特点 | 第12页 |
| 2 苹果病毒的种类 | 第12-15页 |
| ·苹果非潜隐性病毒 | 第13页 |
| ·苹果潜隐性病毒 | 第13-15页 |
| ·苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus) | 第13页 |
| ·苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus) | 第13-15页 |
| ·苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus) | 第15页 |
| 3 我国苹果病毒病防治现状 | 第15-17页 |
| ·我国苹果病毒危害现状 | 第15-16页 |
| ·我国苹果病毒病研究及防治现状 | 第16-17页 |
| 第二章 苹果脱毒技术 | 第17-22页 |
| 1 植物主要脱毒技术原理及利用 | 第17-19页 |
| ·热处理法 | 第17页 |
| ·茎尖培养 | 第17-18页 |
| ·热处理+茎尖培养法 | 第18页 |
| ·微体嫁接 | 第18页 |
| ·花药培养 | 第18-19页 |
| ·抗病毒剂的应用 | 第19页 |
| ·超低温+茎尖培养 | 第19页 |
| 2 苹果脱毒技术研究进展 | 第19-22页 |
| ·热处理脱毒技术 | 第19-20页 |
| ·茎尖培养 | 第20页 |
| ·热处理+茎尖培养 | 第20-21页 |
| ·微体嫁接 | 第21页 |
| ·杀毒剂的应用 | 第21-22页 |
| 第三章 苹果潜隐性病毒的检测 | 第22-29页 |
| 1 指示植物生物学检测法 | 第22-23页 |
| 2 电子显微镜技术 | 第23-24页 |
| 3 血清学方法 | 第24-25页 |
| 4 分子杂交技术 | 第25页 |
| 5 聚合酶联式反应(POLYMERASE CHAIN REACTION) | 第25-29页 |
| 下篇 研究报告 | 第29-57页 |
| 第四章 苹果潜隐性病毒的检测 | 第29-44页 |
| 1 材料及试剂 | 第29-30页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29-30页 |
| 2 方法 | 第30-34页 |
| ·Dot-ELISA法检测苹果褪绿叶斑病毒 | 第30页 |
| ·苹果总RNA的提取 | 第30-32页 |
| ·试剂盒法 | 第30页 |
| ·SDS-苯酚法 | 第30-31页 |
| ·优化SDS-苯酚法 | 第31页 |
| ·SDS-酸酚法 | 第31-32页 |
| ·RNA提取质量的检测 | 第32页 |
| ·RT-PCR检测苹果潜隐性病毒 | 第32-34页 |
| ·引物设计 | 第32-33页 |
| ·cDNA合成 | 第33页 |
| ·PCR扩增 | 第33-34页 |
| ·反应产物的电泳检测 | 第34页 |
| ·RT-PCR检测的灵敏度 | 第34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-41页 |
| ·Dot-ELISA法检测苹果褪绿叶斑病毒 | 第34-35页 |
| ·RNA提取方法的比较 | 第35-37页 |
| ·RNA完整性的比较 | 第35-37页 |
| ·RNA纯度与浓度的检测 | 第37页 |
| ·Mg~(2+)浓度对褪绿叶斑病毒PCR扩增的影响 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR检测苹果褪绿叶斑病毒 | 第38-39页 |
| ·RT-PCR检测苹果茎沟病毒与苹果茎痘病毒 | 第39页 |
| ·RT-PCR检测苹果潜隐性病毒的灵敏度 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| ·RNA提取方法 | 第41-42页 |
| ·RT-PCR检测苹果潜隐性病毒 | 第42-44页 |
| 第五章 苹果潜隐性病毒的脱除 | 第44-57页 |
| 1 材料 | 第44页 |
| 2 方法 | 第44-47页 |
| ·苹果试管苗的获得与继代 | 第44页 |
| ·试管苗热处理+茎尖培养法脱除病毒 | 第44-45页 |
| ·预培养时间对热处理成活率的影响 | 第44-45页 |
| ·恒温热处理与变温热处理对成活率和分化率的影响 | 第45页 |
| ·分化培养基激素浓度及配比对茎尖分化率的影响 | 第45页 |
| ·试管苗热处理+板蓝根+茎尖培养法脱除病毒 | 第45页 |
| ·超低温处理+茎尖培养法脱除病毒 | 第45-46页 |
| ·预培养: | 第45页 |
| ·玻璃化保护剂处理 | 第45-46页 |
| ·材料化冻冲洗 | 第46页 |
| ·恢复培养 | 第46页 |
| ·三种脱毒方法获得的苹果植株病毒检测 | 第46-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-55页 |
| ·讨管苗的获得 | 第47页 |
| ·试管苗的继代 | 第47-49页 |
| ·热处理前培养时间对热处理成活率的影响 | 第49页 |
| ·热处理方式对试管苗成活率，茎尖成活率影响 | 第49-51页 |
| ·激素浓度配比对茎尖分化率的影响 | 第51-52页 |
| ·热处理+茎尖培养+板蓝根脱毒法的成活率 | 第52页 |
| ·玻璃化保护剂成分对苹果茎尖再生率的影响 | 第52-53页 |
| ·PVS处理时间对再生率的影响 | 第53页 |
| ·PVS处理方式对再生率的影响 | 第53-54页 |
| ·三种脱毒方法脱毒效果 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 图版 | 第58-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
