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软枣猕猴桃原生质体培养及基因转化研究

中文摘要第1-9页
英文缩写说明第9-10页
1 文献综述第10-21页
 1.1 研究进展第12-21页
  1.1.1 组织培养第12-13页
  1.1.2 原生质体培养研究进展第13-15页
  1.1.3 分离原生质体的材料和方法第15-17页
  1.1.4 原生质体的培养第17-18页
  1.1.5 遗传转化第18-21页
2 引言第21-22页
3 试验材料与方法第22-31页
 3.1 试验材料及条件第22页
  3.1.1 试验材料第22页
  3.1.2 试验时间及地点第22页
  3.1.3 组培室条件第22页
 3.2 试验方法第22-24页
  3.2.1 软枣猕猴桃组织培养体系的建立第22页
  3.2.2 悬浮细胞的培养第22-24页
   3.2.2.1 悬浮系的建立第22-23页
   3.2.2.2 细胞生长的计量第23-24页
 3.3 原生质体培养第24-27页
  3.3.1 酶液的组成第24页
  3.3.2 原生质体培养基第24页
  3.3.3 原生质体的游离第24-27页
   3.3.3.1 材料的酶解第24页
   3.3.3.2 原生质体的收集与纯化养第24-25页
   3.3.3.3 原生质体存活率、密度及产量的测定第25-27页
   3.3.3.4 原生质体的培养第27页
 3.4 软枣猕猴桃的基因转化第27-31页
  3.4.1 细菌培养基与试剂第27-28页
  3.4.2 遗传转化步骤第28-31页
   3.4.2.1 Ecoli J M109感受态细胞的制备(CaCl_2法)第28-29页
   3.4.2.2 GUS基因的转化与质粒的提取第29-30页
   3.4.2.3 原生质体的转化第30页
   3.4.2.4 GUS基因的组织化学检测第30-31页
4 结果与分析第31-39页
 4.1 组织培养系统第31-32页
 4.2 悬浮培养第32-34页
  4.2.1 悬浮培养细胞体积的变化第33页
  4.2.2 悬浮培养细胞鲜重的变化第33-34页
  4.2.3 悬浮培养细胞干重的变化第34页
 4.3 原生质体培养第34-39页
  4.3.1 酶解时间对原生质体分离的影响第34-35页
  4.3.2 不同酶液组成及不同软枣猕猴桃材料对分离原生质体产量和活力的影响第35页
  4.3.3 不同培养基和不同浓度的PVP对原生质体培养的影响第35-37页
  4.3.4 不同培养基对原生质体存活率的影响第37页
  4.3.5 相同培养基对原生质体培养的影响第37-38页
  4.3.6 培养方法对软枣猕猴桃原生质体培养效果的影响第38-39页
 4.4 GUS基因在软枣猕猴桃原生质体中的表达第39页
5 结论与讨论第39-44页
 5.1 软枣猕猴桃组织培养中的外植体第40页
 5.2 原生质体的分离材料第40-41页
 5.3 原生质体培养条件第41页
 5.4 培养方法对软枣猕猴桃原生质体培养效果的影响第41-42页
 5.5 PVP对原生质体培养的影响第42页
 5.6 影响PEG转化效果的因素第42-43页
 5.7 GUS的组织化学检测第43-44页
图版说明第44-50页
参考文献第50-55页
英文摘要第55-56页

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