中文摘要 | 第1-9页 |
英文缩写说明 | 第9-10页 |
1 文献综述 | 第10-21页 |
1.1 研究进展 | 第12-21页 |
1.1.1 组织培养 | 第12-13页 |
1.1.2 原生质体培养研究进展 | 第13-15页 |
1.1.3 分离原生质体的材料和方法 | 第15-17页 |
1.1.4 原生质体的培养 | 第17-18页 |
1.1.5 遗传转化 | 第18-21页 |
2 引言 | 第21-22页 |
3 试验材料与方法 | 第22-31页 |
3.1 试验材料及条件 | 第22页 |
3.1.1 试验材料 | 第22页 |
3.1.2 试验时间及地点 | 第22页 |
3.1.3 组培室条件 | 第22页 |
3.2 试验方法 | 第22-24页 |
3.2.1 软枣猕猴桃组织培养体系的建立 | 第22页 |
3.2.2 悬浮细胞的培养 | 第22-24页 |
3.2.2.1 悬浮系的建立 | 第22-23页 |
3.2.2.2 细胞生长的计量 | 第23-24页 |
3.3 原生质体培养 | 第24-27页 |
3.3.1 酶液的组成 | 第24页 |
3.3.2 原生质体培养基 | 第24页 |
3.3.3 原生质体的游离 | 第24-27页 |
3.3.3.1 材料的酶解 | 第24页 |
3.3.3.2 原生质体的收集与纯化养 | 第24-25页 |
3.3.3.3 原生质体存活率、密度及产量的测定 | 第25-27页 |
3.3.3.4 原生质体的培养 | 第27页 |
3.4 软枣猕猴桃的基因转化 | 第27-31页 |
3.4.1 细菌培养基与试剂 | 第27-28页 |
3.4.2 遗传转化步骤 | 第28-31页 |
3.4.2.1 Ecoli J M109感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第28-29页 |
3.4.2.2 GUS基因的转化与质粒的提取 | 第29-30页 |
3.4.2.3 原生质体的转化 | 第30页 |
3.4.2.4 GUS基因的组织化学检测 | 第30-31页 |
4 结果与分析 | 第31-39页 |
4.1 组织培养系统 | 第31-32页 |
4.2 悬浮培养 | 第32-34页 |
4.2.1 悬浮培养细胞体积的变化 | 第33页 |
4.2.2 悬浮培养细胞鲜重的变化 | 第33-34页 |
4.2.3 悬浮培养细胞干重的变化 | 第34页 |
4.3 原生质体培养 | 第34-39页 |
4.3.1 酶解时间对原生质体分离的影响 | 第34-35页 |
4.3.2 不同酶液组成及不同软枣猕猴桃材料对分离原生质体产量和活力的影响 | 第35页 |
4.3.3 不同培养基和不同浓度的PVP对原生质体培养的影响 | 第35-37页 |
4.3.4 不同培养基对原生质体存活率的影响 | 第37页 |
4.3.5 相同培养基对原生质体培养的影响 | 第37-38页 |
4.3.6 培养方法对软枣猕猴桃原生质体培养效果的影响 | 第38-39页 |
4.4 GUS基因在软枣猕猴桃原生质体中的表达 | 第39页 |
5 结论与讨论 | 第39-44页 |
5.1 软枣猕猴桃组织培养中的外植体 | 第40页 |
5.2 原生质体的分离材料 | 第40-41页 |
5.3 原生质体培养条件 | 第41页 |
5.4 培养方法对软枣猕猴桃原生质体培养效果的影响 | 第41-42页 |
5.5 PVP对原生质体培养的影响 | 第42页 |
5.6 影响PEG转化效果的因素 | 第42-43页 |
5.7 GUS的组织化学检测 | 第43-44页 |
图版说明 | 第44-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
英文摘要 | 第55-56页 |