符号说明 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
第一部份 人正常皮肤和创伤愈合修复期皮肤差异表达基因的克隆 | 第13-44页 |
材料与方法 | 第15-33页 |
一、 实验材料 | 第15-18页 |
二、 实验方法 | 第18-33页 |
结果 | 第33-35页 |
一、 人皮肤组织总RNA,mRNA的分离结果: | 第33页 |
二、 双链cDNA的合成及酶切结果: | 第33页 |
三、 ds cDNA接头的连接效率分析: | 第33-34页 |
四、 消减杂交效率分析 | 第34页 |
五、 两轮PCR对消减杂交产物的特异性扩增结果: | 第34页 |
六、 差异表达基因消减cDNA文库的构建结果: | 第34-35页 |
七、 阳性菌落的分离培养结果: | 第35页 |
讨论 | 第35-42页 |
参考文献 | 第42-44页 |
第二部分 人正常皮肤和创伤愈合修复期皮肤差异表达基因的筛选、测序及同源性分析 | 第44-62页 |
材料与方法 | 第47-51页 |
一、 实验材料 | 第47-49页 |
二、 实验方法 | 第49-51页 |
结果 | 第51-55页 |
一、 PCR扩增阳性插入片段 | 第51-52页 |
二、 差异表达片段的杂交筛选 | 第52页 |
三、 差异表达片段的序列解析和数据库相似性检索 | 第52页 |
四、 人皮肤创伤愈合期皮肤组织与正常人皮肤组织中差异表达的已知基因 | 第52-54页 |
五、 新发现的人皮肤组织EST片段 | 第54-55页 |
讨论 | 第55-60页 |
一、 蛋白质合成代谢增加 | 第56页 |
二、 细胞骨架基因相关的表达 | 第56页 |
三、 细胞外基质相关基因的表达 | 第56-57页 |
四、 信号传导相关基因的表达 | 第57页 |
五、 新发现的人皮肤组织EST片段分析 | 第57页 |
六、 角蛋白6e、β-2-微球蛋白在人皮肤组织创伤修复期的表达 | 第57-60页 |
参考文献 | 第60-62页 |
第三部分 人正常皮肤和创伤愈合修复期皮肤组织差异表达基因的比较研究 | 第62-76页 |
材料与方法 | 第64-67页 |
结果 | 第67-68页 |
一、 差异表达基因的Northern杂交验证结果 | 第67-68页 |
二、 角蛋白6a、6e和Connexin26在皮肤伤口愈合中的作用 | 第68页 |
讨论 | 第68-72页 |
一、 角蛋白6a、角蛋白6e的生物学行为及其在皮肤修复中的作用 | 第69-70页 |
二、 Connexin26的生物学行为及其在皮肤修复中的作用 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-76页 |
综述一: 角蛋白与创伤愈合 | 第76-87页 |
一、 角蛋白的分类、表达和调节 | 第76-78页 |
二、 角蛋白多肽的结构和功能 | 第78-79页 |
三、 角蛋白在创伤愈合中的作用 | 第79-83页 |
四、 结束语 | 第83页 |
参考文献 | 第83-87页 |
综述二: 差异表达基因的克隆策略 | 第87-106页 |
一、 差异显示PCR(differential display RT-PCR,DDRT-PCR)方法 | 第87-89页 |
二、 差异消减展示(differential subtraction display,DSD) | 第89-90页 |
三、 代表性差异分析法(representational difference analysis,RDA) | 第90-92页 |
四、 抑制消减杂交(suppression subtraction hybridization,SSH)方法 | 第92-95页 |
五、 基因表达系统分析(serial analysis of gene expression,SAGE) | 第95-96页 |
六、 DNA微阵列杂交系统(DNA micro arrays) | 第96-100页 |
七、 结束语 | 第100页 |
参考文献 | 第100-106页 |
综述三: 成纤维细胞在成人、胎儿皮肤伤口愈合中差异的研究进展 | 第106-114页 |
一、 FB在皮肤伤口愈合的生物学基础 | 第106-107页 |
二、 FB在胚胎、成年伤口愈合的差异 | 第107页 |
三、 周围环境对胎、成伤口愈合的影响 | 第107-108页 |
四、 生长因子在胎、成伤口愈合中的作用 | 第108-109页 |
五、 细胞外基质和胶原的异同 | 第109-110页 |
六、 基因差异和生物学应用前景 | 第110-111页 |
参考文献 | 第111-114页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第114页 |
攻读博士学位期间获奖情况 | 第114页 |