| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 1 综述 | 第7-20页 |
| 1．1 寒害的伤害机制与植物抗寒机制 | 第7-12页 |
| 1．1．1 冷害的概念及分子机理 | 第7-8页 |
| 1．1．2 植物抗冷机制 | 第8-9页 |
| 1．1．3 冻害的概念及分子机理 | 第9-10页 |
| 1．1．4 植物抗冻机理 | 第10页 |
| 1．1．5 寒冷驯化的生理生化变化 | 第10-11页 |
| 1．1．6 冷驯化期间寒冷应答基因表达的变化 | 第11-12页 |
| 1．2 植物抗寒基因工程途径 | 第12-13页 |
| 1．2．1 抗冻蛋白抗寒基因工程途径 | 第12页 |
| 1．2．2 超氧化物歧化酶（SOD）基因途径 | 第12-13页 |
| 1．2．3 糖类基因途径 | 第13页 |
| 1．2．4 脂代谢关键酶基因途径 | 第13页 |
| 1．3 脂代谢关键酶基因途径的抗寒基因工程 | 第13-14页 |
| 1．3．1 脂肪酸脱饱和酶基因 | 第13-14页 |
| 1．3．2 酰基转移酶基因 | 第14页 |
| 1．3．3 胆碱磷酸转移酶基因（cpt） | 第14页 |
| 1．4 胆碱磷酸转移酶基因 | 第14-18页 |
| 1．4．1 胆碱磷酸转移酶 | 第14-16页 |
| 1．4．1．1 胆碱磷酸转移酶在磷脂合成代谢中的作用 | 第14-15页 |
| 1．4．1．2 胆碱磷酸转移酶活性调节 | 第15-16页 |
| 1．4．2 胆碱磷酸转移酶基因 | 第16-18页 |
| 1．4．2．1 酿酒酵母CPT基因 | 第16-17页 |
| 1．4．2．2 欧洲油菜CPT基因 | 第17-18页 |
| 1．5 大豆的抗寒及转基因研究 | 第18-20页 |
| 1．5．1 大豆抗寒研究 | 第18-19页 |
| 1．5．2 大豆的基因转化 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-27页 |
| 2．1 材料 | 第20页 |
| 2．1．1 受体植物 | 第20页 |
| 2．1．2 质粒和菌种 | 第20页 |
| 2．2 主要试剂和仪器 | 第20-21页 |
| 2．3 实验方法 | 第21-27页 |
| 2．3．1 质粒大量提取 | 第21-22页 |
| 2．3．2 花粉管通道法转化大豆 | 第22页 |
| 2．3．3 转化植株的筛选 | 第22页 |
| 2．3．3．1 卡那霉素抗性筛选 | 第22页 |
| 2．3．3．2 低温筛选 | 第22页 |
| 2．3．4 转基因植株的检测 | 第22-27页 |
| 2．3．4．1 PCR检测 | 第22-23页 |
| 2．3．4．2 Southern杂交检测 | 第23-27页 |
| 3 实验结果 | 第27-30页 |
| 3．1 花粉管道通法转化大豆 | 第27-28页 |
| 3．1．1 PRDH401质粒及浓度和纯度的检测 | 第27页 |
| 3．1．2 花粉管道道法转化大豆 | 第27-28页 |
| 3．2 转化植株的筛选和鉴定 | 第28-30页 |
| 3．2．1 转化植株的抗生素筛选 | 第28-29页 |
| 3．2．2 转化植株的抗寒筛选 | 第29页 |
| 3．2．3 转化植株的PCR检测 | 第29页 |
| 3．2．4 转化植株的Southern杂交检测 | 第29-30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 4．1 选择含双35S启动子的植物表达载体 | 第30页 |
| 4．2 转CPT基因增加大豆抗寒性的可行性 | 第30-31页 |
| 4．3 转CPT基因大豆的鉴定方法 | 第31-32页 |
| 4．3．1 抗寒筛选是鉴定CPT是否导入的有效方法 | 第31页 |
| 4．3．2 PCR检测 | 第31-32页 |
| 5 结论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-36页 |
| 图版说明 | 第36-37页 |
| 图版 | 第37-40页 |
| 致谢 | 第40页 |