| 本论文所采用的英文缩写与中文意义 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-22页 |
| 第一章 芸薹属植物遗传转化研究进展 | 第10-17页 |
| 一、 再生系统的建立 | 第10-11页 |
| 二、 遗传转化的方法 | 第11-17页 |
| 1． 农杆菌介导的基因转化 | 第11-14页 |
| 1．1 转化机理 | 第11-12页 |
| 1．2 影响转化效率的若干因素 | 第12页 |
| 1．2．1 菌株的影响 | 第12-13页 |
| 1．2．2 外植体类型的影响 | 第13页 |
| 1．2．3 抗菌素的影响 | 第13页 |
| 1．2．4 硝酸银的影响 | 第13-14页 |
| 1．3 发根农杆菌介导的转化 | 第14页 |
| 2． 直接转化法 | 第14-15页 |
| 2．1 PEG法 | 第14页 |
| 2．2 电击法 | 第14页 |
| 2．3 显微注射法 | 第14-15页 |
| 3． 筛选标记 | 第15页 |
| 4． 目的基因的研究 | 第15页 |
| 5． 问题与展望 | 第15-17页 |
| 第二章 植物抗寒基因工程研究进展 | 第17-22页 |
| 1． 抗冻蛋白（AFPs）基因 | 第17-18页 |
| 2． 植物的冷诱导（COR）基因 | 第18-19页 |
| 3． 冷诱导基因的转录水平调控因子CBF1 | 第19页 |
| 4． 脂肪酸去饱和代谢的关键酶基因 | 第19-20页 |
| 5． 超氧化物歧化酶（SOD）基因 | 第20页 |
| 6． 糖类基因 | 第20-22页 |
| 第二部分 研究报告 | 第22-54页 |
| 第一章 农杆菌介导的不结球白菜转化体系的建立 | 第22-41页 |
| 前言 | 第22页 |
| 一、 材料与方法 | 第22-29页 |
| 1． 材料 | 第22-25页 |
| 1．1 菌株与质粒 | 第22-23页 |
| 1．2 工具酶与化学试剂 | 第23页 |
| 1．3 植物材料 | 第23页 |
| 1．4 培养基 | 第23-24页 |
| 1．5 溶液 | 第24-25页 |
| 2． 方法 | 第25-29页 |
| 2．1 转化载体的准备 | 第25-27页 |
| 2．2 外植体分化再生系统的建立 | 第27页 |
| 2．3 选择压的确定 | 第27页 |
| 2．4 生根与移栽 | 第27-28页 |
| 2．5 植物的遗传转化 | 第28页 |
| 2．6 转化结果的鉴定 | 第28-29页 |
| 二、 结果与分析 | 第29-38页 |
| 1． 不同品种间不定芽再生条件的差异 | 第30页 |
| 2． 苗龄对外植体分化的影响 | 第30-31页 |
| 3． 培养基及外源激素对子叶不定芽诱导的影响 | 第31-34页 |
| 4． 卡那霉素对子叶不定芽诱导的影响及选择压的确定 | 第34-35页 |
| 5． 硝酸银对子叶形成不定芽的影响 | 第35-36页 |
| 6． 转Gus基因植株的获得及检测 | 第36-37页 |
| 7． 植株的PCR检测 | 第37-38页 |
| 8． 植株的Southern杂交检测 | 第38页 |
| 三、 讨论 | 第38-40页 |
| 1． NH_4~+对不结球白菜离体分化的影响 | 第38-39页 |
| 2． 不同品种间在不定芽诱导条件上的差异 | 第39页 |
| 3． 硝酸银对不结球白菜离体分化的诱导作用 | 第39-40页 |
| 4． 转化体选择的时期与嵌合体问题 | 第40页 |
| 四、 小结 | 第40-41页 |
| 第二章 根癌农杆菌介导的不结球白菜抗冻基因的转化 | 第41-54页 |
| 前言 | 第41页 |
| 一、 材料与方法 | 第41-45页 |
| 1． 材料 | 第41-42页 |
| 1．1 菌株与质粒 | 第41页 |
| 1．2 工具酶与试剂 | 第41页 |
| 1．3 植物材料 | 第41页 |
| 1．4 培养基 | 第41-42页 |
| 1．5 溶液 | 第42页 |
| 2． 方法 | 第42-45页 |
| 2．1 含目的基因的植物转化载体的准备 | 第42-43页 |
| 2．2 植物的遗传转化 | 第43-44页 |
| 2．2．1 烟草的遗传转化 | 第43页 |
| 2．2．2 不结球白菜的遗传转化 | 第43-44页 |
| 2．3 转化结果的鉴定 | 第44-45页 |
| 2．3．1． GUS组织化学染色 | 第44页 |
| 2．3．2． PCR扩增检测 | 第44页 |
| 2．3．3． Southern杂交检测 | 第44页 |
| 2．3．4． 烟草的低温处理 | 第44-45页 |
| 二、 结果与分析 | 第45-52页 |
| 1． THPI基因合成的设计 | 第45页 |
| 2． 用连续PCR法合成昆虫THPI基因及基因克隆 | 第45-46页 |
| 3． 合成昆虫抗冻肽基因植物表达载体构建 | 第46-48页 |
| 4． 烟草抗性苗的获得 | 第48-49页 |
| 5． 烟草抗性苗的Gus组织化学法染色 | 第49页 |
| 6． 烟草抗性苗的PCR检测 | 第49页 |
| 7． 烟草抗性苗的Southern杂交检测 | 第49-51页 |
| 8． 烟草转基因植株的低温处理 | 第51页 |
| 9． 不结球白菜的抗性苗的获得 | 第51-52页 |
| 三、 讨论 | 第52-53页 |
| 四、 小结 | 第53-54页 |
| 图版与说明 | 第54-60页 |
| 英文摘要 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70页 |