酰基载体蛋白FR9F-ACP4的表达、纯化、表征与结晶条件探讨
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-17页 |
| ·聚酮化合物 | 第9页 |
| ·聚酮合酶及其催化过程 | 第9-12页 |
| ·Ⅰ型聚酮合酶的催化过程 | 第9-10页 |
| ·Ⅱ型聚酮合酶的催化过程 | 第10-11页 |
| ·Ⅲ型聚酮合酶的催化过程 | 第11-12页 |
| ·FR901464简介 | 第12-14页 |
| ·FR901464及结构类似物 | 第12-13页 |
| ·FR901464最新研究进展 | 第13-14页 |
| ·FR9F-ACP4 | 第14-16页 |
| ·特殊的Trans-AT | 第14-15页 |
| ·酰基载体蛋白 | 第15-16页 |
| ·研究目的和意义 | 第16-17页 |
| 第二章 FR9F-ACP4基因的克隆 | 第17-23页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第17页 |
| ·质粒和菌株 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-19页 |
| ·目的基因的扩增 | 第17-18页 |
| ·双酶切与连接 | 第18-19页 |
| ·重组子的转化及鉴定 | 第19页 |
| ·实验结果 | 第19-22页 |
| ·基因片段扩增 | 第19-20页 |
| ·载体的双酶切 | 第20-21页 |
| ·重组子鉴定结果 | 第21-22页 |
| ·讨论 | 第22-23页 |
| ·载体和菌株的选择 | 第22-23页 |
| 第三章 蛋白表达与纯化 | 第23-41页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·主要实验仪器 | 第23页 |
| ·主要生化试剂 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-29页 |
| ·培养基的配制 | 第23页 |
| ·常用试剂的配制 | 第23-24页 |
| ·蛋白表达条件的优化 | 第24-25页 |
| ·大量表达 | 第25页 |
| ·纯化途径 | 第25-28页 |
| ·蛋白浓缩 | 第28页 |
| ·Braford法测定蛋白质浓度 | 第28-29页 |
| ·实验结果 | 第29-39页 |
| ·蛋白表达筛选条件 | 第29-33页 |
| ·蛋白大量纯化 | 第33-38页 |
| ·蛋白稳定性测试 | 第38-39页 |
| ·分析与讨论 | 第39-41页 |
| ·蛋白表达条件的优化 | 第39页 |
| ·蛋白纯化路线的选择 | 第39-40页 |
| ·凝胶柱的双峰图 | 第40-41页 |
| 第四章 蛋白表征与结晶 | 第41-52页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-45页 |
| ·动态光散射技术 | 第41-42页 |
| ·蛋白一维氢谱采集 | 第42-43页 |
| ·蛋白圆二色谱 | 第43-44页 |
| ·蛋白质结晶 | 第44-45页 |
| ·实验结果 | 第45-51页 |
| ·质谱分析 | 第45-46页 |
| ·动态光散射分析 | 第46-47页 |
| ·核磁一维氢谱分析 | 第47-48页 |
| ·圆二色谱分析 | 第48-50页 |
| ·蛋白晶体生长 | 第50-51页 |
| ·分析与讨论 | 第51-52页 |
| ·晶体的生长 | 第51-52页 |
| 第五章 结论 | 第52-54页 |
| ·结论 | 第52-53页 |
| ·研究展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 附录 | 第61-66页 |
| 在学期间的研究成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
