| 摘要 | 第1-8页 |
| Summary | 第8-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-25页 |
| 引言 | 第10页 |
| 1 乳腺的组织学构造 | 第10-12页 |
| ·乳腺上皮细胞 | 第11页 |
| ·乳腺肌上皮细胞 | 第11-12页 |
| 2 反刍动物乳腺的发育过程 | 第12-13页 |
| ·胚胎期乳腺的发育与形态发生 | 第12页 |
| ·新生到初情期乳腺的发育与形态发生 | 第12页 |
| ·异速增长期乳腺的发育与形态发生 | 第12-13页 |
| ·性成熟后乳腺的发育与形态发生 | 第13页 |
| 3 乳腺上皮细胞体外培养的研究进展 | 第13-19页 |
| ·体外培养乳腺上皮细胞的类型 | 第13-14页 |
| ·乳腺上皮细胞培养方法的研究 | 第14-15页 |
| ·乳腺上皮细胞系的建立 | 第15-17页 |
| ·细胞外基质和激素对乳腺上皮细胞生长的影响 | 第17-18页 |
| ·乳腺上皮干细胞 | 第18-19页 |
| 4 总结与展望 | 第19-20页 |
| 参考文献 | 第20-25页 |
| 第二部分 实验报告：牦牛乳腺上皮细胞系的建立和生物学特性研究 | 第25-61页 |
| 实验一 牦牛乳腺上皮细胞的分离纯化和细胞系的建立 | 第25-37页 |
| 引言 | 第25页 |
| 1 试验材料 | 第25-27页 |
| ·组织样品来源 | 第25-26页 |
| ·仪器设备 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·主要试剂的配制 | 第26-27页 |
| 2 试验方法 | 第27-29页 |
| ·乳腺样品的采集 | 第27页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞的原代培养 | 第27-28页 |
| ·改进的组织块培养法 | 第27页 |
| ·改进的胶原酶消化培养法 | 第27-28页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞的分离与纯化 | 第28页 |
| ·细胞形态观察 | 第28页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞的传代培养 | 第28页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞的冻存和复苏 | 第28-29页 |
| ·细胞冻存程序[13] | 第28-29页 |
| ·细胞复苏程序 | 第29页 |
| ·细胞活力测定 | 第29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-34页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞的原代培养 | 第29-31页 |
| ·组织块法 | 第29-30页 |
| ·胶原酶消化法 | 第30-31页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞的分离与纯化 | 第31页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞的形态学观察 | 第31-33页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞 | 第31-32页 |
| ·牦牛乳腺肌上皮细胞 | 第32-33页 |
| ·冻存复苏前后细胞的活力检测 | 第33-34页 |
| ·牦牛乳腺分泌上皮细胞 | 第33-34页 |
| ·牦牛乳腺肌上皮细胞 | 第34页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞的传代培养和细胞系的建立 | 第34页 |
| 4 讨论 | 第34-37页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞的原代培养 | 第34-35页 |
| ·牦牛乳腺肌上皮细胞的分离纯化 | 第35-36页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞的形态特征 | 第36-37页 |
| 实验二 牦牛乳腺上皮细胞系-YMEC的鉴定和生物学特性研究 | 第37-51页 |
| 1 试验材料 | 第37-38页 |
| ·样品来源 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37页 |
| ·主要试剂的配制 | 第37-38页 |
| ·核型分析所用试剂 | 第37-38页 |
| ·诱导培养液的配制 | 第38页 |
| ·污染检测所用试剂 | 第38页 |
| 2 试验方法 | 第38-42页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞的免疫组织化学鉴定 | 第38-39页 |
| ·细胞生长曲线的绘制 | 第39页 |
| ·细胞群体倍增时间的测定 | 第39页 |
| ·超微结构鉴定 | 第39-40页 |
| ·乳腺上皮细胞的核型分析 | 第40页 |
| ·染色体标本制作方法 | 第40页 |
| ·核型结果分析方法 | 第40页 |
| ·激素对牦牛乳腺上皮细胞β-酪蛋白 mRNA 表达的影响 | 第40-41页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞的三维胶立体培养 | 第41-42页 |
| ·三维胶的制备 | 第41页 |
| ·培养方法 | 第41-42页 |
| ·微生物污染检测 | 第42页 |
| ·细菌真菌检测 | 第42页 |
| ·病毒检测 | 第42页 |
| ·支原体检测 | 第42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-48页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞的免疫细胞化学鉴定 | 第42-43页 |
| ·生长曲线的绘制与群体倍增时间 | 第43-44页 |
| ·牦牛乳腺分泌上皮细胞的超微结构 | 第44-45页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞的核型分析结果 | 第45页 |
| ·RT-PCR 法检测牦牛乳腺分泌上皮细胞β-酪蛋白 mRNA 的表达 | 第45-46页 |
| ·牦牛乳腺分泌上皮细胞的三维立体培养 | 第46-47页 |
| ·微生物污染检测结果 | 第47-48页 |
| ·细菌和真菌检测 | 第47页 |
| ·病毒检测 | 第47页 |
| ·支原体检测 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞的免疫组织化学染色结果 | 第48页 |
| ·牦牛乳腺分泌上皮细胞的超微结构观察 | 第48页 |
| ·激素和细胞外基质对 YMEC 细胞分泌功能的影响 | 第48-51页 |
| 实验三 牦牛乳腺肌上皮细胞系-YMM的鉴定和生物学特性研究 | 第51-57页 |
| 1 试验材料 | 第51页 |
| 2 试验方法 | 第51-52页 |
| ·牦牛乳腺肌上皮细胞的免疫组织化学鉴定 | 第51页 |
| ·细胞生长曲线的绘制和群体倍增时间的测定 | 第51页 |
| ·牦牛乳腺肌上皮细胞的核型分析 | 第51页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞的催产素反应实验 | 第51页 |
| ·微生物污染检测 | 第51-52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-55页 |
| ·牦牛乳腺肌上皮细胞的免疫细胞化学鉴定 | 第52页 |
| ·牦牛乳腺肌上皮细胞的生长曲线和倍增时间 | 第52-53页 |
| ·牦牛乳腺肌上皮细胞的核型分析 | 第53-54页 |
| ·牦牛乳腺肌上皮细胞的催产素反应 | 第54页 |
| ·微生物污染检测结果 | 第54-55页 |
| ·细菌和真菌检测 | 第54页 |
| ·病毒检测 | 第54页 |
| ·支原体检测 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 全文总结 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 个人简介 | 第63-64页 |
| 导师简介 | 第64-65页 |
