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沙田柚配子体自交不亲和花柱消减文库的构建及差异表达基因的分析

中文摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第一章 综述第11-32页
 1 引言第11页
 2 植物自交不亲和分子机制及研究进展第11-24页
   ·自交不亲和性及其普遍性第11-12页
   ·自交不亲和性的类型及表现特征第12-13页
   ·自交不亲和性的遗传基础第13-14页
   ·自交不亲和性的细胞生物学和生理生化研究第14-15页
   ·自交不亲和性的分子生物学研究第15-23页
     ·孢子体自交不亲和性的分子基础第15-18页
     ·配子体自交不亲和性的分子基础第18-23页
   ·沙田柚自交不亲和机制研究概况第23-24页
 3 差异表达基因的研究方法第24-31页
   ·克隆差异表达基因的常用方法第25-27页
     ·mRNA 差异显示技术(DDRT-PCR)第25页
     ·cDNA 扩增片段长度多态性技术(cDNA - AFLP)第25-26页
     ·cDNA 代表性差示分析技术(cDNA-RAD)第26页
     ·基因表达系列分析技术(SAGE)第26-27页
     ·基因芯片技术第27页
     ·抑制性消减杂交技术(SSH )第27页
   ·本研究采用的抑制性消减杂交SSH 技术简介第27-31页
     ·抑制性消减杂交技术原理和试验流程第27-29页
     ·抑制性消减杂交技术的优缺点第29页
     ·抑制性消减杂交技术应用第29-31页
 4 立题意义第31页
 5 技术路线第31-32页
第二章 材料和方法第32-48页
   ·实验材料第32-33页
     ·材料第32页
     ·主要生化试剂第32页
     ·试剂盒第32页
     ·LB 培养基配方第32-33页
     ·接头及引物第33页
     ·主要仪器设备第33页
   ·实验方法第33-47页
     ·沙田柚总RNA 的提取第33-34页
     ·沙田柚MRNA 的分离第34-37页
     ·正反向SSH 文库的构建第37-47页
   ·克隆产物测序第47页
   ·获得的EST 序列与GENBANK 进行同源性比较第47-48页
第三章 结果与分析第48-62页
   ·正向SSH 文库第48-54页
     ·总RNA 的提取和MRNA 的分离第48页
     ·双链CDNA 的合成第48页
     ·双链CDNA RSAI 酶切检测第48-49页
     ·接头连接检测第49-50页
     ·消减杂交后两次PCR 的结果分析第50页
     ·SSH 文库的质量分析第50-51页
     ·EST 序列分析第51-54页
   ·反向SSH 文库第54-62页
     ·总RNA 的提取和质量分析第54-55页
     ·MRNA 的质量检测第55-56页
     ·双链CDNA RSAI 酶切检测第56页
     ·接头连接检测第56-57页
     ·消减杂交后两次PCR 的结果分析第57页
     ·SSH 文库的质量分析第57-58页
     ·EST 序列分析第58-62页
第四章 讨论第62-66页
   ·关于抑制性消减杂交技术第62-63页
     ·总RNA 的完整性第62页
     ·CDNA 酶切的效率第62页
     ·接头连接的高效性第62-63页
   ·正反向文库中自交不亲和相关基因第63-64页
   ·进一步的研究计划第64-66页
第五章 结论与创新点第66-67页
   ·结论第66页
   ·创新点第66-67页
参考文献第67-77页
读硕期间发表的论文第77-78页
致谢第78-79页

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