中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第一章 综述 | 第11-32页 |
1 引言 | 第11页 |
2 植物自交不亲和分子机制及研究进展 | 第11-24页 |
·自交不亲和性及其普遍性 | 第11-12页 |
·自交不亲和性的类型及表现特征 | 第12-13页 |
·自交不亲和性的遗传基础 | 第13-14页 |
·自交不亲和性的细胞生物学和生理生化研究 | 第14-15页 |
·自交不亲和性的分子生物学研究 | 第15-23页 |
·孢子体自交不亲和性的分子基础 | 第15-18页 |
·配子体自交不亲和性的分子基础 | 第18-23页 |
·沙田柚自交不亲和机制研究概况 | 第23-24页 |
3 差异表达基因的研究方法 | 第24-31页 |
·克隆差异表达基因的常用方法 | 第25-27页 |
·mRNA 差异显示技术(DDRT-PCR) | 第25页 |
·cDNA 扩增片段长度多态性技术(cDNA - AFLP) | 第25-26页 |
·cDNA 代表性差示分析技术(cDNA-RAD) | 第26页 |
·基因表达系列分析技术(SAGE) | 第26-27页 |
·基因芯片技术 | 第27页 |
·抑制性消减杂交技术(SSH ) | 第27页 |
·本研究采用的抑制性消减杂交SSH 技术简介 | 第27-31页 |
·抑制性消减杂交技术原理和试验流程 | 第27-29页 |
·抑制性消减杂交技术的优缺点 | 第29页 |
·抑制性消减杂交技术应用 | 第29-31页 |
4 立题意义 | 第31页 |
5 技术路线 | 第31-32页 |
第二章 材料和方法 | 第32-48页 |
·实验材料 | 第32-33页 |
·材料 | 第32页 |
·主要生化试剂 | 第32页 |
·试剂盒 | 第32页 |
·LB 培养基配方 | 第32-33页 |
·接头及引物 | 第33页 |
·主要仪器设备 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-47页 |
·沙田柚总RNA 的提取 | 第33-34页 |
·沙田柚MRNA 的分离 | 第34-37页 |
·正反向SSH 文库的构建 | 第37-47页 |
·克隆产物测序 | 第47页 |
·获得的EST 序列与GENBANK 进行同源性比较 | 第47-48页 |
第三章 结果与分析 | 第48-62页 |
·正向SSH 文库 | 第48-54页 |
·总RNA 的提取和MRNA 的分离 | 第48页 |
·双链CDNA 的合成 | 第48页 |
·双链CDNA RSAI 酶切检测 | 第48-49页 |
·接头连接检测 | 第49-50页 |
·消减杂交后两次PCR 的结果分析 | 第50页 |
·SSH 文库的质量分析 | 第50-51页 |
·EST 序列分析 | 第51-54页 |
·反向SSH 文库 | 第54-62页 |
·总RNA 的提取和质量分析 | 第54-55页 |
·MRNA 的质量检测 | 第55-56页 |
·双链CDNA RSAI 酶切检测 | 第56页 |
·接头连接检测 | 第56-57页 |
·消减杂交后两次PCR 的结果分析 | 第57页 |
·SSH 文库的质量分析 | 第57-58页 |
·EST 序列分析 | 第58-62页 |
第四章 讨论 | 第62-66页 |
·关于抑制性消减杂交技术 | 第62-63页 |
·总RNA 的完整性 | 第62页 |
·CDNA 酶切的效率 | 第62页 |
·接头连接的高效性 | 第62-63页 |
·正反向文库中自交不亲和相关基因 | 第63-64页 |
·进一步的研究计划 | 第64-66页 |
第五章 结论与创新点 | 第66-67页 |
·结论 | 第66页 |
·创新点 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-77页 |
读硕期间发表的论文 | 第77-78页 |
致谢 | 第78-79页 |