中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
引言 | 第12-16页 |
第一章 基因组研究的关键平台——大片段基因组文库 | 第16-31页 |
第一节 大片段基因组文库的发展 | 第16-24页 |
·概述 | 第16-17页 |
·细菌人工染色体(BAC)及其衍生载体系统 | 第17-24页 |
第二节 大片段基因组文库的构建与鉴定 | 第24-27页 |
·文库的构建 | 第24-26页 |
·文库的鉴定 | 第26-27页 |
第三节 大片段基因组文库在物理图谱构建以及海洋生物研究中的应用 | 第27-31页 |
·物理图谱构建策略 | 第27-28页 |
·大片段基因组文库展望以及在海洋生物研究中的应用 | 第28-31页 |
第二章 DH10B菌株高效电转化条件探究 | 第31-41页 |
第一节 材料与方法 | 第32-33页 |
·材料 | 第32页 |
·方法 | 第32-33页 |
第二节 实验结果 | 第33-37页 |
·脉冲场强对pUC19 DNA转化效率的影响 | 第33-34页 |
·质粒DNA的大小对转化效率的影响 | 第34-37页 |
·混合质粒DNA的转化效率 | 第37页 |
第三节 讨论 | 第37-40页 |
本章小结 | 第40-41页 |
第三章 栉孔扇贝(Chlamys farreri Jones et Preston)基因组BAC文库的构建以及免疫相关功能基因的筛选和分析 | 第41-81页 |
第一节 栉孔扇贝基因组BAC文库的构建 | 第44-57页 |
·实验材料 | 第44页 |
·BAC载体pECBAC1 的制备 | 第44-47页 |
·高分子量(High-molecular-weight, HMW)DNA提取 | 第47-49页 |
·C. farreri基因组BAC文库的构建 | 第49-57页 |
第二节 栉孔扇贝基因组BAC文库的质量鉴定和分析 | 第57-60页 |
·栉孔扇贝基因组BAC文库插入片段大小分析与文库保存 | 第57-58页 |
·栉孔扇贝基因组BAC文库稳定性检测 | 第58-60页 |
第三节 栉孔扇贝免疫相关功能基因的筛选及阳性BAC克隆的鉴定和分析 | 第60-70页 |
·栉孔扇贝的免疫系统 | 第60-61页 |
·栉孔扇贝BAC文库高密度DNA薄膜的制备 | 第61-65页 |
·Overgo(Overlapping oligonucleotides)探针杂交原理 | 第65-66页 |
·栉孔扇贝免疫相关重要功能基因Overgo探针的设计 | 第66页 |
·放射性同位素杂交 | 第66-70页 |
第四节 实验结果与分析 | 第70-77页 |
·BAC载体pECBAC1 的制备和纯化 | 第70页 |
·栉孔扇贝基因组BAC文库的构建 | 第70-77页 |
第五节 讨论 | 第77-80页 |
本章小结 | 第80-81页 |
第四章 凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)基因组BAC文库的构建以及重要功能基因的筛选 | 第81-105页 |
第一节 凡纳滨对虾(Litopenaeus. vannamei)基因组BAC文库的构建 | 第83-91页 |
·实验材料 | 第83页 |
·BAC载体pECBAC1 和pCLD04541 的制备 | 第83-84页 |
·凡纳滨对虾(L. vannamei)高分子量(High-molecular-weight, HMW)DNA提取 | 第84-85页 |
·凡纳滨对虾基因组BAC文库的构建 | 第85-91页 |
第二节 凡纳滨对虾基因组BAC文库的质量鉴定 | 第91-94页 |
·L. vannamei基因组BAC克隆插入片段大小分析与文库保存 | 第91-92页 |
·凡纳滨对虾基因组BAC文库稳定性检测 | 第92-93页 |
·凡纳滨对虾BAC文库高密度DNA薄膜的制备 | 第93-94页 |
·重要功能基因Overgo探针的设计 | 第94页 |
·放射性同位素杂交 | 第94页 |
第三节实验结果与分析 | 第94-103页 |
·载体pECBAC1 与pCLD04541 DNA的制备和纯化 | 第94-95页 |
·凡纳滨对虾基因组BAC文库的构建 | 第95-103页 |
第四节 讨论 | 第103-104页 |
本章小结 | 第104-105页 |
参考文献 | 第105-123页 |
博士在读期间发表的文章 | 第123-124页 |
致谢 | 第124-126页 |