| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-16页 |
| ·微生物的有机溶剂耐受性 | 第8-11页 |
| ·有机溶剂对微生物细胞的毒害作用 | 第8-9页 |
| ·微生物的耐溶剂性机制 | 第9-10页 |
| ·微生物的有机溶剂耐受性研究进展 | 第10-11页 |
| ·蛋白质组学 | 第11-12页 |
| ·蛋白质组学及其研究方法 | 第11页 |
| ·表达蛋白质组学的研究技术 | 第11-12页 |
| ·利用Red 同源重组法基因敲除 | 第12-13页 |
| ·Red 同源重组法基因敲除的原理 | 第12-13页 |
| ·Red 同源重组机制与策略 | 第13页 |
| ·本论文的研究意义和主要研究内容 | 第13-16页 |
| ·本课题的来源及研究意义 | 第13-14页 |
| ·本论文的研究思路及主要研究内容 | 第14-16页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第16-28页 |
| ·实验材料 | 第16-19页 |
| ·实验菌种与载体 | 第16页 |
| ·主要设备和试剂 | 第16-17页 |
| ·实验所用引物 | 第17-18页 |
| ·主要培养基和溶液 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-28页 |
| ·有机溶剂耐受菌株的驯化 | 第19页 |
| ·二维电泳分析耐溶剂性菌株的蛋白组 | 第19-21页 |
| ·耐溶剂相关基因的克隆表达与耐溶剂性分析 | 第21-23页 |
| ·大肠杆菌中耐溶剂性相关基因的敲除与基因敲除后重组 | 第23-26页 |
| ·基因敲除后菌株与敲除后重组菌株的耐溶剂性分析 | 第26-28页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第28-47页 |
| ·有机溶剂耐受菌株的驯化及蛋白组学分析 | 第28-31页 |
| ·有机溶剂耐受性菌株的驯化 | 第28页 |
| ·P. putida JUCT1 总蛋白的提取和蛋白定量 | 第28-29页 |
| ·2D-PAGE | 第29-31页 |
| ·耐溶剂相关基因的克隆表达与耐溶剂性分析 | 第31-37页 |
| ·耐溶剂相关基因的克隆 | 第31-32页 |
| ·耐溶剂相关基因的表达 | 第32-33页 |
| ·重组菌株的耐溶剂性分析 | 第33-37页 |
| ·大肠杆菌中耐溶剂性相关基因的敲除与基因敲除后重组互补表达 | 第37-47页 |
| ·大肠杆菌ycaC、tsf、zwf 基因的敲除 | 第37-41页 |
| ·基因敲除后的重组互补表达 | 第41-44页 |
| ·基因敲除后菌株与敲除后重组互补表达菌株的耐溶剂性分析 | 第44-47页 |
| 主要结论与展望 | 第47-49页 |
| 1. 主要结论 | 第47-48页 |
| 2. 展望 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录：本研究所涉及的相关基因 | 第54-56页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第56页 |
