目录 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-7页 |
英文摘要(abstract) | 第7-9页 |
前言 | 第9-19页 |
材料与方法 | 第19-43页 |
第一部分 试剂和材料 | 第19-21页 |
第二部分 菌株、细胞株和质粒 | 第21页 |
第三部分 实验方法 | 第21-43页 |
一、限制性内切酶的酶切反应 | 第21页 |
二、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段 | 第21-22页 |
三、DNA片段的连接 | 第22页 |
四、感受态大肠杆菌的制备 | 第22页 |
五、质粒DNA的转化 | 第22页 |
六、质粒DNA的碱法小量制备 | 第22页 |
七、质粒DNA的大量制备 | 第22-23页 |
八、细胞培养 | 第23页 |
九、细胞处理 | 第23页 |
十、质粒转染细胞 | 第23-24页 |
十一、Western印迹分析 | 第24-26页 |
十二、流式细胞检测样品准备 | 第26页 |
十三、细胞总RNA的制备 | 第26页 |
十四、免疫荧光分析 | 第26-27页 |
十五、PCR扩增 | 第27-28页 |
十六、琼脂糖凝胶电泳 | 第28页 |
十七、Real-time Quantitative RT-PCR | 第28页 |
十八、免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation) | 第28页 |
十九、染色质免疫沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP) | 第28-30页 |
二十、ChIP on chip analysis | 第30-33页 |
二十一、基因组DNA的提取 | 第33页 |
二十二、双荧光素酶测定 | 第33页 |
二十三、neuroD1启动子活性检测 | 第33-43页 |
结果 | 第43-72页 |
第一部分 应用染色质免疫共沉淀技术和基因芯片技术研究神经细胞分化过程中组蛋白乙酰化水平修饰特征 | 第43-59页 |
一、RA诱导SH-SY5Y细胞分化 | 第43页 |
二、细胞超声波粉碎分析 | 第43页 |
三、免疫共沉淀产物扩增后的探针 | 第43-44页 |
四、杂交芯片扫描图谱 | 第44-45页 |
五、芯片扫描数据分析 | 第45-59页 |
第二部分 neuroD1转录调控的初步研究 | 第59-72页 |
一、体外培养细胞的神经分化 | 第59-60页 |
二、neuroD1的转录调控 | 第60-62页 |
三、neuroD1启动子删切分析 | 第62-64页 |
四、HDAC家族与NeuroD1转录活性 | 第64-68页 |
五、NeuroD1的相关修饰和定位分析 | 第68-70页 |
六、neuroD1的表观遗传调节 | 第70-72页 |
讨论 | 第72-74页 |
小结 | 第74-75页 |
缩写词表 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-84页 |
附录 | 第84-89页 |
文献综述 | 第89-96页 |
致谢 | 第96-98页 |
简历 | 第98页 |