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全反式维甲酸(RA)诱导的神经细胞分化中NeuroD1基因调控的分子机制研究

目录第1-5页
中文摘要第5-7页
英文摘要(abstract)第7-9页
前言第9-19页
材料与方法第19-43页
 第一部分 试剂和材料第19-21页
 第二部分 菌株、细胞株和质粒第21页
 第三部分 实验方法第21-43页
  一、限制性内切酶的酶切反应第21页
  二、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段第21-22页
  三、DNA片段的连接第22页
  四、感受态大肠杆菌的制备第22页
  五、质粒DNA的转化第22页
  六、质粒DNA的碱法小量制备第22页
  七、质粒DNA的大量制备第22-23页
  八、细胞培养第23页
  九、细胞处理第23页
  十、质粒转染细胞第23-24页
  十一、Western印迹分析第24-26页
  十二、流式细胞检测样品准备第26页
  十三、细胞总RNA的制备第26页
  十四、免疫荧光分析第26-27页
  十五、PCR扩增第27-28页
  十六、琼脂糖凝胶电泳第28页
  十七、Real-time Quantitative RT-PCR第28页
  十八、免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation)第28页
  十九、染色质免疫沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)第28-30页
  二十、ChIP on chip analysis第30-33页
  二十一、基因组DNA的提取第33页
  二十二、双荧光素酶测定第33页
  二十三、neuroD1启动子活性检测第33-43页
结果第43-72页
 第一部分 应用染色质免疫共沉淀技术和基因芯片技术研究神经细胞分化过程中组蛋白乙酰化水平修饰特征第43-59页
  一、RA诱导SH-SY5Y细胞分化第43页
  二、细胞超声波粉碎分析第43页
  三、免疫共沉淀产物扩增后的探针第43-44页
  四、杂交芯片扫描图谱第44-45页
  五、芯片扫描数据分析第45-59页
 第二部分 neuroD1转录调控的初步研究第59-72页
  一、体外培养细胞的神经分化第59-60页
  二、neuroD1的转录调控第60-62页
  三、neuroD1启动子删切分析第62-64页
  四、HDAC家族与NeuroD1转录活性第64-68页
  五、NeuroD1的相关修饰和定位分析第68-70页
  六、neuroD1的表观遗传调节第70-72页
讨论第72-74页
小结第74-75页
缩写词表第75-77页
参考文献第77-84页
附录第84-89页
文献综述第89-96页
致谢第96-98页
简历第98页

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