| 目录 | 第1-6页 |
| 图表索引 | 第6-8页 |
| 英文缩略词 | 第8-10页 |
| 中文摘要 | 第10-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 导论(含文献综述) | 第12-30页 |
| 1.巨噬细胞-肿瘤免疫的"双刃剑" | 第12-19页 |
| 2.巨噬细胞激活剂Tuftsin蛋白的研究进展 | 第19-26页 |
| 3.前言 | 第26-28页 |
| 4.课题研究目的和研究策略 | 第28-30页 |
| 材料与方法 | 第30-46页 |
| 一、实验材料 | 第30-38页 |
| 1.研究材料 | 第30页 |
| 2.主要试剂 | 第30-31页 |
| 3.主要仪器 | 第31-32页 |
| 4.动物和细胞株 | 第32页 |
| 5.培养基及相关溶液配制 | 第32-38页 |
| 二、实验方法 | 第38-46页 |
| 1.含Polytuftsin基因的表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·构建编码Polytuftsin蛋白的重组载体质粒 | 第38页 |
| ·pPIC9K-6His-PT重组质粒的酶切及线性化片段的回收 | 第38-39页 |
| ·感受态酵母的制备(PEG1000酵母转化法) | 第39页 |
| ·重组pPIC9K-6His-PT转化感受态酵母 | 第39页 |
| 2.筛选和鉴定高表达Polytuftsin蛋白的重组酵母菌株 | 第39-40页 |
| ·筛选含多拷贝Polytuftsin基因片段的酵母菌株 | 第39页 |
| ·酵母染色体中整合Polytuftsin基因的PCR鉴定 | 第39-40页 |
| 3.重组酵母株表达Polytuftsin蛋白 | 第40-42页 |
| ·重组酵母株诱导表达Polytuftsin | 第40-41页 |
| ·纯化Polytuftsin重组蛋白 | 第41页 |
| ·Polytuftsin纯化蛋白的Western blot鉴定 | 第41-42页 |
| 4.Polytuftsin重组蛋白的生物活性鉴定 | 第42-45页 |
| ·Polytuftsin蛋白对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响 | 第42-44页 |
| ·Polytuftsin蛋白对小鼠腹腔巨噬细胞分泌NO、TNF-α因子的影响 | 第42页 |
| ·Polytuftsin蛋白对小鼠腹腔巨噬细胞杀瘤能力的影响 | 第42-43页 |
| ·Polytuftsin蛋白刺激后的小鼠腹腔巨噬细胞表型改变 | 第43-44页 |
| ·小鼠L1210腹水模型治疗实验 | 第44页 |
| ·Polytuftsin蛋白对人源巨噬细胞功能的影响 | 第44-45页 |
| ·诱导U937细胞分化为成熟巨噬细胞 | 第44页 |
| ·Polytuftsin蛋白对诱导后的人源U937巨噬细胞分泌NO因子的影响 | 第44-45页 |
| ·MTT比色法筛选出对Polytuftsin治疗敏感性高的人癌细胞系 | 第45页 |
| 5.统计学方法分析 | 第45-46页 |
| 结果 | 第46-61页 |
| 1.筛选和鉴定高表达Polytuftsin蛋白的重组酵母菌株 | 第46-47页 |
| ·酵母染色体中整合Polytuftsin基因的PCR鉴定 | 第46页 |
| ·基因组中Polytuftsin基因扩增产物测序图 | 第46-47页 |
| 2.Polytuftsin的诱导表达及纯化 | 第47-49页 |
| ·诱导表达Polytuftsin蛋白电泳结果 | 第47页 |
| ·纯化Polytuftsin重组蛋白 | 第47-48页 |
| ·Polytuftsin纯化蛋白的Western blot鉴定 | 第48-49页 |
| 3.Polytuftsin蛋白的活性检测 | 第49-61页 |
| ·Polytuftsin蛋白对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响 | 第49-58页 |
| ·Polytuftsin蛋白对小鼠腹腔巨噬细胞分泌NO因子的影响 | 第49-50页 |
| ·Polytuftsin蛋白对小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α因子的影响 | 第50-52页 |
| ·MTT比色法检测经Polytuftsin蛋白刺激后的小鼠腹腔巨噬细胞培养上清对L1210细胞杀伤能力的影响 | 第52-53页 |
| ·MTT比色法检测经Polytuftsin蛋白刺激后的小鼠腹腔巨噬细胞对L1210细胞杀伤能力的影响 | 第53-54页 |
| ·流式检测Polytuftsin蛋白刺激后的小鼠腹腔巨噬细胞表型改变 | 第54-57页 |
| ·小鼠腹水模型治疗实验 | 第57-58页 |
| ·Polytuftsin蛋白对人源U937巨噬细胞功能的影响 | 第58-61页 |
| ·流式鉴定诱导后的U937细胞表型 | 第58-59页 |
| ·Polytuftsin蛋白对人源U937巨噬细胞分泌NO因子的影响 | 第59-60页 |
| ·MTT比色法筛选出对Polytuftsin治疗敏感性高的人癌细胞系 | 第60-61页 |
| 讨论 | 第61-66页 |
| 小结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 课题资助资金 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 已发表与学位论文相关的英文文章 | 第74-75页 |
| 个人简介 | 第75页 |
