| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-14页 |
| 符号说明 | 第14-16页 |
| 第一部分 文献综述 | 第16-60页 |
| 第一章 钙、磷与骨代谢 | 第16-30页 |
| 1 骨代谢 | 第16-24页 |
| ·破骨细胞与骨吸收 | 第16-19页 |
| ·成骨细胞与骨形成 | 第19-24页 |
| 2 钙代谢 | 第24-26页 |
| 3 磷代谢 | 第26-27页 |
| 4 钙、磷与骨代谢 | 第27-30页 |
| 第二章 成骨细胞的体外培养及应用 | 第30-38页 |
| 1 成骨细胞的生物学特性 | 第30-31页 |
| 2 成骨细胞的原代培养 | 第31-34页 |
| ·酶消化法 | 第31-32页 |
| ·组织块移行生长法 | 第32页 |
| ·骨内成骨细胞培养法 | 第32-33页 |
| ·骨膜内成骨细胞培养 | 第33-34页 |
| ·不同种属成骨细胞的培养 | 第34页 |
| 3 成骨细胞的鉴定 | 第34-35页 |
| ·形态观察 | 第34-35页 |
| ·生物学鉴定 | 第35页 |
| 4 成骨细胞的应用 | 第35-37页 |
| 5 成骨细胞的应用前景 | 第37-38页 |
| 第三章 体外成骨细胞的表型分化及其蛋白表达 | 第38-60页 |
| 1 成骨细胞的起源及体内生长发育 | 第38-40页 |
| 2 体外成骨细胞的分化及蛋白表达 | 第40-60页 |
| 第二部分 实验研究 | 第60-118页 |
| 第一章 成骨细胞原代培养方法的建立及鉴定 | 第61-70页 |
| 1 材料 | 第61-62页 |
| ·实验动物 | 第61页 |
| ·主要试剂 | 第61页 |
| ·主要仪器 | 第61-62页 |
| 2 方法 | 第62-65页 |
| ·溶液的配制 | 第62-63页 |
| ·成骨细胞的分离 | 第63-64页 |
| ·成骨细胞的取材 | 第63页 |
| ·消化传代 | 第63页 |
| ·成骨细胞的纯化 | 第63-64页 |
| ·活细胞的观察检测 | 第64页 |
| ·台盼蓝染色 | 第64页 |
| ·形态学观察 | 第64页 |
| ·成骨细胞的鉴定 | 第64-65页 |
| ·碱性磷酸酶（ALP）染色 | 第64页 |
| ·矿化结节染色 | 第64-65页 |
| 3 结果 | 第65-66页 |
| ·细胞成活率 | 第65-66页 |
| ·成骨细胞原代及传代培养的生物学特征 | 第66页 |
| ·碱性磷酸酶染色光镜观察 | 第66页 |
| ·矿化结节光镜观察 | 第66页 |
| 4 讨论 | 第66-70页 |
| 第二章 钙、磷对成骨细胞形态及细胞增殖的影响 | 第70-84页 |
| 1 材料 | 第70-71页 |
| ·实验动物 | 第70页 |
| ·主要试剂 | 第70页 |
| ·主要仪器 | 第70-71页 |
| 2 方法 | 第71-74页 |
| ·溶液的配制 | 第71页 |
| ·成骨细胞的培养 | 第71页 |
| ·实验设计 | 第71页 |
| ·成骨细胞表面结构的观察 | 第71-72页 |
| ·成骨细胞超微结构的观察 | 第72-73页 |
| ·成骨细胞增殖的检测（MTT 法） | 第73-74页 |
| ·成骨细胞细胞周期的检测 | 第74页 |
| ·数据处理 | 第74页 |
| 3 结果 | 第74-80页 |
| ·成骨细胞表面结构变化 | 第74页 |
| ·成骨细胞超微结构的变化 | 第74-77页 |
| ·成骨细胞的增殖 | 第77-79页 |
| ·成骨细胞细胞周期的变化 | 第79-80页 |
| 4 讨论 | 第80-84页 |
| 第三章 钙、磷对成骨细胞体外表型分化功能的影响 | 第84-95页 |
| 1 材料 | 第84-85页 |
| ·实验动物 | 第84页 |
| ·主要试剂 | 第84页 |
| ·主要仪器 | 第84-85页 |
| 2 方法 | 第85-86页 |
| ·成骨细胞的培养 | 第85页 |
| ·实验设计 | 第85页 |
| ·细胞内碱性磷酸酶活性的检测（PNPP） | 第85页 |
| ·细胞内总蛋白质的检测（BCA 法） | 第85页 |
| ·Ⅰ型胶原的检测（酶联免疫吸附法） | 第85页 |
| ·骨桥蛋白的检测（免疫组化法） | 第85-86页 |
| ·数据处理 | 第86页 |
| 3 结果 | 第86-92页 |
| ·碱性磷酸酶活性变化 | 第86页 |
| ·蛋白质含量的变化 | 第86-88页 |
| ·Ⅰ型胶原含量的变化 | 第88-89页 |
| ·骨桥蛋白含量的变化 | 第89-92页 |
| 4 讨论 | 第92-95页 |
| 第四章 钙、磷对成骨细胞Ca~(2+)、GJIC 和矿化功能的影响 | 第95-103页 |
| 1 材料 | 第95-96页 |
| ·试验动物 | 第95页 |
| ·主要试剂 | 第95-96页 |
| ·主要仪器 | 第96页 |
| 2 方法 | 第96-97页 |
| ·成骨细胞的培养 | 第96页 |
| ·实验设计 | 第96页 |
| ·细胞内Ca~(2+)测定 | 第96页 |
| ·成骨细胞间隙连接通讯（GJIC）测定 | 第96页 |
| ·钙化功能检测 | 第96-97页 |
| ·数据处理 | 第97页 |
| 3 结果 | 第97-98页 |
| ·细胞内Ca~(2+)沉积的变化 | 第97-98页 |
| ·细胞间隙连接通讯的变化 | 第98页 |
| ·体外钙化功能的变化 | 第98页 |
| 4 讨论 | 第98-103页 |
| 第五章 钙、磷对成骨细胞标志性蛋白mRNA 表达的影响 | 第103-118页 |
| 1 材料 | 第103-104页 |
| ·试验动物 | 第103页 |
| ·主要试剂 | 第103页 |
| ·主要仪器 | 第103-104页 |
| 2 方法 | 第104-109页 |
| ·成骨细胞的培养 | 第104页 |
| ·实验设计 | 第104页 |
| ·采样前准备 | 第104页 |
| ·RNA 的提取 | 第104-105页 |
| ·引物设计 | 第105-106页 |
| ·cDNA 的制备 | 第106-107页 |
| ·荧光定量PCR 反应 | 第107页 |
| ·Ct 值与△△ct 计算方法及结果分析 | 第107-109页 |
| ·数据处理 | 第109页 |
| 3 结果 | 第109-114页 |
| ·总RNA 的检测 | 第109-110页 |
| ·钙、磷对ALP、Col-Ⅰ、OPN 和BGP mRNA 的表达的影响 | 第110-114页 |
| ·熔解曲线分析 | 第110-112页 |
| ·ALP、Col-Ⅰ、OPN 和BGP mRNA 表达实时荧光定量结果 | 第112-114页 |
| 4 讨论 | 第114-118页 |
| 结论 | 第118-119页 |
| 参考文献 | 第119-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 攻读博士学位期间发表的文章 | 第129页 |
