| 摘要 | 第1-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 1 引言 | 第16-29页 |
| ·流感病毒的分子生物学 | 第16-18页 |
| ·病毒的结构与编码蛋白的功能 | 第16-18页 |
| ·猪流感流行现状与公共卫生学意义 | 第18-21页 |
| ·猪流感在我国流行情况 | 第18-19页 |
| ·猪流感的世界流行情况 | 第19页 |
| ·猪流感的公共卫生意义 | 第19-20页 |
| ·猪流感的诊断技术 | 第20-21页 |
| ·猪流感疫苗研究进展 | 第21-23页 |
| ·全病毒灭活苗 | 第22页 |
| ·基因重组活载体疫苗 | 第22页 |
| ·核酸疫苗 | 第22页 |
| ·亚单位疫苗 | 第22-23页 |
| ·其他疫苗 | 第23页 |
| ·抗体技术的发展 | 第23-28页 |
| ·抗体分子的基因结构 | 第24页 |
| ·单链抗体特点及其类型 | 第24-25页 |
| ·单链抗体的表达 | 第25-26页 |
| ·单链抗体的应用前景 | 第26-27页 |
| ·单链抗体技术发展存在的问题 | 第27-28页 |
| ·研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 2 实验材料与实验方案 | 第29-42页 |
| ·实验材料 | 第29-31页 |
| ·动物、细胞及载体 | 第29页 |
| ·抗原抗体 | 第29页 |
| ·主要仪器与耗材 | 第29页 |
| ·主要试剂与溶液 | 第29-31页 |
| ·实验方法 | 第31-42页 |
| ·纯化抗原的制备 | 第31-32页 |
| ·mRNA 的提取和cDNA 的制备 | 第32-33页 |
| ·HA 基因的克隆和鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的构建 | 第34-35页 |
| ·动物的免疫 | 第35-36页 |
| ·检测方法的建立 | 第36-37页 |
| ·融合实验和杂交瘤细胞系的建立 | 第37-38页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备和纯化 | 第38-39页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第39-40页 |
| ·单克隆抗体生物学特性研究 | 第40-41页 |
| ·单克隆抗体RNA 的提取和cDNA 的合成 | 第41-42页 |
| 3 实验结果 | 第42-52页 |
| ·抗原的制备 | 第42-43页 |
| ·病毒A/Swine/Guangdong/LM/2004(H1N1)的获得 | 第42页 |
| ·真核表达质粒的构建 | 第42-43页 |
| ·免疫效果分析 | 第43页 |
| ·筛选方法的建立 | 第43-44页 |
| ·ELISA 检测方法的建立 | 第43-44页 |
| ·杂交瘤细胞株的筛选 | 第44-45页 |
| ·单克隆抗体细胞株的建立 | 第44-45页 |
| ·单克隆抗体的特性鉴定与分析 | 第45-46页 |
| ·HI 以及ELISA 效价测定 | 第45页 |
| ·抗体免疫球蛋白亚型鉴定 | 第45-46页 |
| ·Western bolt 分析 | 第46页 |
| ·单抗稳定性分析 | 第46页 |
| ·单克隆抗体的生物学特性分析 | 第46-47页 |
| ·单克隆抗体特异性反应 | 第46-47页 |
| ·中和实验 | 第47页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第47-48页 |
| ·SDS-PAGE 电泳鉴定纯化产物 | 第47-48页 |
| ·单抗及其纯化产物浓度的测定 | 第48页 |
| ·免疫球蛋白重、轻链基因获得 | 第48-52页 |
| ·重链基因的RT-PCR 扩增、酶切鉴定 | 第48-49页 |
| ·轻链基因的RT-PCR 扩增、酶切鉴定 | 第49-50页 |
| ·重链基因的序列分析 | 第50页 |
| ·轻链基因的序列分析 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| ·基因免疫 | 第52页 |
| ·细胞融合和筛选 | 第52-53页 |
| ·单抗腹水的纯化 | 第53页 |
| ·单抗的生物学特性 | 第53-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 附录 | 第61-66页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第66页 |