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抗CDK4抗体的IACT筛选

提要第1-8页
第一章 前言第8-17页
   ·胞内抗体及其捕获技术第8-13页
     ·胞内抗体的生物学特点第8页
     ·单链抗体的来源第8-9页
     ·胞内抗体捕获技术(IACT)第9-11页
     ·胞内抗体与肿瘤治疗第11-13页
   ·细胞周期与肿瘤第13-16页
     ·细胞周期及调控第13-15页
     ·CDK4 的生物学特点第15-16页
   ·本论文的立题思路及意义第16-17页
第二章 实验材料与方法第17-30页
   ·实验材料第17-21页
     ·菌株第17页
     ·载体与质粒第17页
     ·次级单链抗体噬菌体文库第17-18页
     ·主要试剂,缓冲液及培养基第18-21页
   ·实验仪器第21页
   ·实验方法第21-23页
     ·诱饵蛋白基因人 CDK4 重组表达质粒的构建第21-22页
     ·诱饵蛋白基因重组质粒pGBKT7-CDK4 转化 Y187 酵母第22-23页
   ·酵母人源单链抗体文库的制备第23-30页
     ·噬菌体抗体文库的滴度测定第23-24页
     ·酵母人源单链抗体文库的噬粒的提取第24-25页
     ·体内同源重组构建酵母人源单链抗体文库及阳性克隆筛选第25-28页
     ·体外定向克隆重组构建酵母单链抗体次级文库及阳性克隆筛选第28-30页
第三章 实验结果第30-41页
   ·表达 CDK4 诱饵蛋白的酵母转化子的制备第30-33页
     ·诱饵蛋白基因重组质粒pGBKT7-CDK4 的构建第30页
     ·pGBKT7-CDK4 的酵母转化第30页
     ·诱饵蛋白基因自我转录激活检测结果第30-33页
   ·酵母单链抗体文库的构建第33-41页
     ·噬菌体单链抗体次级文库的滴度第33页
     ·次级文库中噬粒的提取与鉴定第33-34页
     ·同源重组构建酵母单链抗体文库及 IACT 筛选第34-36页
     ·定向克隆法构建酵母单链抗体文库及 IACT 筛选第36-41页
第四章 讨论第41-43页
第五章 结论第43-44页
参考文献第44-49页
中文摘要第49-51页
ABSTRACT第51-53页
致谢第53页

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