提要 | 第1-8页 |
第一章 前言 | 第8-17页 |
·胞内抗体及其捕获技术 | 第8-13页 |
·胞内抗体的生物学特点 | 第8页 |
·单链抗体的来源 | 第8-9页 |
·胞内抗体捕获技术(IACT) | 第9-11页 |
·胞内抗体与肿瘤治疗 | 第11-13页 |
·细胞周期与肿瘤 | 第13-16页 |
·细胞周期及调控 | 第13-15页 |
·CDK4 的生物学特点 | 第15-16页 |
·本论文的立题思路及意义 | 第16-17页 |
第二章 实验材料与方法 | 第17-30页 |
·实验材料 | 第17-21页 |
·菌株 | 第17页 |
·载体与质粒 | 第17页 |
·次级单链抗体噬菌体文库 | 第17-18页 |
·主要试剂,缓冲液及培养基 | 第18-21页 |
·实验仪器 | 第21页 |
·实验方法 | 第21-23页 |
·诱饵蛋白基因人 CDK4 重组表达质粒的构建 | 第21-22页 |
·诱饵蛋白基因重组质粒pGBKT7-CDK4 转化 Y187 酵母 | 第22-23页 |
·酵母人源单链抗体文库的制备 | 第23-30页 |
·噬菌体抗体文库的滴度测定 | 第23-24页 |
·酵母人源单链抗体文库的噬粒的提取 | 第24-25页 |
·体内同源重组构建酵母人源单链抗体文库及阳性克隆筛选 | 第25-28页 |
·体外定向克隆重组构建酵母单链抗体次级文库及阳性克隆筛选 | 第28-30页 |
第三章 实验结果 | 第30-41页 |
·表达 CDK4 诱饵蛋白的酵母转化子的制备 | 第30-33页 |
·诱饵蛋白基因重组质粒pGBKT7-CDK4 的构建 | 第30页 |
·pGBKT7-CDK4 的酵母转化 | 第30页 |
·诱饵蛋白基因自我转录激活检测结果 | 第30-33页 |
·酵母单链抗体文库的构建 | 第33-41页 |
·噬菌体单链抗体次级文库的滴度 | 第33页 |
·次级文库中噬粒的提取与鉴定 | 第33-34页 |
·同源重组构建酵母单链抗体文库及 IACT 筛选 | 第34-36页 |
·定向克隆法构建酵母单链抗体文库及 IACT 筛选 | 第36-41页 |
第四章 讨论 | 第41-43页 |
第五章 结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
中文摘要 | 第49-51页 |
ABSTRACT | 第51-53页 |
致谢 | 第53页 |