| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-25页 |
| ·肿瘤分子的靶向治疗 | 第8-11页 |
| ·表皮生长因子受体(EGFR) | 第8-9页 |
| ·EGFR作为肿瘤治疗的靶点 | 第9-11页 |
| ·EGF受体干扰序列(EGFRi) | 第11页 |
| ·白细胞介素-24(IL-24) | 第11-20页 |
| ·IL-24的发现和结构 | 第11-13页 |
| ·IL-24的基因表达 | 第13页 |
| ·IL-24的生物学功能 | 第13-15页 |
| ·IL-24的抗癌机理 | 第15-19页 |
| ·IL-24的临床作用 | 第19页 |
| ·IL-24的分子生物学研究进展 | 第19-20页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第20-22页 |
| ·大肠杆菌表达系统的种类 | 第20-21页 |
| ·外源基因在大肠杆菌的表达形式 | 第21-22页 |
| ·本论文研究的意义及内容 | 第22-25页 |
| ·研究的意义 | 第22-23页 |
| ·研究内容 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-40页 |
| ·实验材料 | 第25-28页 |
| ·质粒与菌株 | 第25页 |
| ·菌种保存 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·主要溶液 | 第27-28页 |
| ·培养基和抗生素 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-40页 |
| ·质粒的小量提取 | 第28-29页 |
| ·DNA浓度和纯度的测定 | 第29页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第29-30页 |
| ·转化实验 | 第30-32页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第32-33页 |
| ·目的基因的扩增与纯化 | 第33-34页 |
| ·连接反应 | 第34页 |
| ·转化子鉴定实验 | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌表达载体的构建 | 第35页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第35-36页 |
| ·融合蛋白的浓度测定 | 第36-37页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第37-38页 |
| ·融合蛋白生物学活性的检测 | 第38-40页 |
| 3 结果与讨论 | 第40-64页 |
| ·pET-22b-IL-24表达载体的构建及表达 | 第40-48页 |
| ·PCR扩增IL-24基因 | 第40-41页 |
| ·序列分析 | 第41页 |
| ·pET-22b-IL-24表达载体的构建与鉴定 | 第41-43页 |
| ·重组菌生长规律及质粒稳定性的研究 | 第43-44页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第44页 |
| ·SDS-PAGE检测表达产物 | 第44-45页 |
| ·IL-24蛋白的纯化 | 第45-46页 |
| ·IL-24蛋白的活性检测 | 第46-48页 |
| ·pET-22b-EGFRi-IL-24表达载体的构建及表达 | 第48-64页 |
| ·PCR扩增融合基因EGFRi-IL-24 | 第48-49页 |
| ·克隆质粒的构建及序列分析 | 第49-52页 |
| ·融合蛋白的结构预测 | 第52页 |
| ·pET-22b-EGFRi-IL-24表达载体的构建与鉴定 | 第52-54页 |
| ·融合基因的诱导表达及优化 | 第54-58页 |
| ·融合蛋白EGFRi-IL-24的纯化 | 第58-59页 |
| ·融合蛋白EGFRi-IL-24的活性检测 | 第59-64页 |
| 4 结论 | 第64-65页 |
| 5 展望 | 第65-66页 |
| 6 参考文献 | 第66-72页 |
| 7 攻读硕士学位期间论文发表情况 | 第72-73页 |
| 8 致谢 | 第73页 |