| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| ·寄生疫霉菌和大豆疫霉菌 | 第9页 |
| ·寄生疫霉菌 | 第9页 |
| ·大豆疫霉菌 | 第9页 |
| ·小RNA 研究概述 | 第9-18页 |
| ·miRNA | 第11-16页 |
| ·siRNA | 第16-17页 |
| ·piRNA | 第17-18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 大豆疫霉菌，寄生疫霉菌小RNA 文库的构建及分析 | 第19-25页 |
| ·实验材料与试剂 | 第19页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·寄生疫霉菌和大豆疫霉菌各个时期材料的收集 | 第19-21页 |
| ·寄生疫霉菌各个时期材料的收集 | 第19-20页 |
| ·大豆疫霉菌各个时期材料的收集 | 第20页 |
| ·寄生疫霉菌侵染拟南芥叶片组织的制备 | 第20-21页 |
| ·各种组织RNA 的提取 | 第21页 |
| ·寄生疫霉菌和大豆疫霉菌小RNA 的测序 | 第21页 |
| ·结果与分析 | 第21-24页 |
| ·总RNA 的提取 | 第21页 |
| ·寄生疫霉菌和大豆疫霉菌小RNA 的分布分析 | 第21-23页 |
| ·高质量序列的分类 | 第23页 |
| ·疫霉菌中microRNA 的预测 | 第23-24页 |
| ·讨论 | 第24-25页 |
| 第三章 小RNA 的实验克隆 | 第25-38页 |
| ·实验材料与试剂 | 第25-26页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25页 |
| ·接头及引物 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-30页 |
| ·低分子量RNA 的分离 | 第26页 |
| ·Small RNA 的分离 | 第26-27页 |
| ·Small RNA 的去磷酸化 | 第27页 |
| ·3’接头的连接 | 第27-28页 |
| ·加接头的小RNA 的5’磷酸化及与5’接头的连接 | 第28页 |
| ·Small RNA 连接产物的反转录 | 第28-29页 |
| ·反转录产物PCR | 第29页 |
| ·PCR 产物加A | 第29-30页 |
| ·PCR 产物与pGXT 载体连接 | 第30页 |
| ·电击转化 | 第30页 |
| ·AppDNA adaptor 的合成 | 第30-31页 |
| ·ImpA(adenosine-5’-phosphoimidazolide)的合成 | 第30-31页 |
| ·3’adaptor 的腺苷酰化修饰 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-36页 |
| ·总RNA 提取及低分子量RNA 的分离 | 第31-32页 |
| ·Small RNA 的分离 | 第32-33页 |
| ·Small RNA 加3’接头后的分离 | 第33-34页 |
| ·Small RNA 加5’接头后的分离 | 第34页 |
| ·反转录产物PCR 后检测 | 第34-35页 |
| ·测序结果 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 大豆疫霉菌和寄生疫霉菌中候选小 RNA 的验证 | 第38-45页 |
| ·实验材料及试剂 | 第38页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·试剂 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-39页 |
| ·总RNA 的电泳及转膜 | 第38-39页 |
| ·Northern blot | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-43页 |
| ·tRNA 来源的小RNA | 第39-42页 |
| ·rRNA 来源及其他来源的小RNA | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第五章 结论与创新点 | 第45-46页 |
| ·结论 | 第45页 |
| ·创新点 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
