| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一部分 文献综述及选题目的和意义 | 第12-24页 |
| 第一章 疱疹病毒UL35基因及其编码蛋白的研究进展 | 第12-24页 |
| 1.鸭瘟概况 | 第12-14页 |
| ·引言 | 第12-13页 |
| ·鸭瘟病毒的分子特征概况 | 第13-14页 |
| 2.疱疹病毒UL35基因及其编码蛋白的研究进展 | 第14-23页 |
| ·疱疹病毒概述 | 第14-17页 |
| ·疱疹病毒UL35基因及其编码蛋白的特点 | 第17-19页 |
| ·疱疹病毒UL35基因编码蛋白的定位 | 第19页 |
| ·疱疹病毒UL35蛋白的功能 | 第19-22页 |
| ·展望 | 第22-23页 |
| 3.选题目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二部分 试验研究 | 第24-84页 |
| 第二章 鸭瘟病毒UL35基因的分子特性的分析 | 第24-38页 |
| 1.材料与方法 | 第24-25页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-25页 |
| 2.结果 | 第25-35页 |
| ·核酸序列的分子特性分析 | 第25-26页 |
| ·蛋白质序列的分子特性分析 | 第26-32页 |
| ·VP26的密码子偏爱性分析 | 第32-33页 |
| ·DPV VP26的密码子与大肠杆菌、酵母及人的密码子偏爱性比较 | 第33-35页 |
| 3.讨论 | 第35-38页 |
| ·关于生物信息学 | 第35页 |
| ·序列的分子特性分析 | 第35-37页 |
| ·VP26密码子偏爱性对表达的影响 | 第37-38页 |
| 第三章 鸭瘟病毒UL35基因的克隆、表达及多克隆抗体的制备 | 第38-61页 |
| 1.材料 | 第38-42页 |
| ·菌株/载体 | 第38-39页 |
| ·实验动物 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要溶液的配制 | 第39-42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·其它 | 第42页 |
| 2.实验方法 | 第42-52页 |
| ·DPV UL35基因的扩增 | 第42-43页 |
| ·UL35基因的T-载体克隆与鉴定 | 第43-46页 |
| ·UL35基因重组质粒表达菌株的构建 | 第46-48页 |
| ·重组蛋白的诱导表达及条件优化 | 第48-49页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第49-50页 |
| ·兔抗DPV VP26多克隆抗体的制备 | 第50-51页 |
| ·琼脂扩散试验检测兔抗VP26抗体效价 | 第51页 |
| ·兔抗VP26 IgG的纯化及鉴定 | 第51-52页 |
| 3.结果 | 第52-57页 |
| ·DPV UL35基因的扩增和T克隆鉴定 | 第52页 |
| ·重组表达质粒pET-32a(+)-UL35的鉴定 | 第52-53页 |
| ·重组蛋白的诱导表达及条件优化 | 第53-55页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第55-56页 |
| ·免疫兔血清的Western-blot检测 | 第56页 |
| ·兔抗VP26血清琼脂扩散试验效价的检测 | 第56页 |
| ·兔抗VP26 IgG的纯化及SDS-PAGE鉴定 | 第56-57页 |
| 4.讨论 | 第57-61页 |
| ·UL35基因引物的设计和T克隆 | 第57-58页 |
| ·外源基因的融合表达的意义 | 第58-59页 |
| ·诱导表达及诱导条件的优化 | 第59页 |
| ·包涵体的形成 | 第59-60页 |
| ·抗血清的制备及纯化 | 第60-61页 |
| 第四章 鸭瘟强毒体外感染宿主细胞UL35基因转录及表达时相分析 | 第61-75页 |
| 1.材料 | 第61-62页 |
| ·菌株/毒株/细胞 | 第61页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第61页 |
| ·主要仪器设备 | 第61页 |
| ·其它 | 第61-62页 |
| 2.实验方法 | 第62-65页 |
| ·荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测鸭瘟病毒体外感染宿主细胞UL35基因的转录时相分析 | 第62-64页 |
| ·鸭瘟病毒体外感染宿主细胞UL35基因的表达时相分析 | 第64-65页 |
| 3.结果 | 第65-71页 |
| ·DPV UL35基因在宿主细胞的转录时相分析 | 第65-71页 |
| ·DPV UL35基因产物在宿主细胞的表达时相分析 | 第71页 |
| 4.讨论 | 第71-75页 |
| ·转录时相的研究方法 | 第72页 |
| ·DPV UL35基因转录谱特征 | 第72-73页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第73页 |
| ·DPV UL35基因表达谱特征 | 第73-75页 |
| 第五章 鸭瘟病毒UL35基因产物在宿主细胞中的表达和亚细胞定位 | 第75-84页 |
| 1.材料 | 第75页 |
| ·毒株/细胞 | 第75页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第75页 |
| ·主要仪器设备 | 第75页 |
| 2.实验方法 | 第75-77页 |
| ·间接免疫荧光检测(IFA)DPV VP26亚细胞定位方法的建立及优化 | 第75-76页 |
| ·DPV UL35基因产物亚细胞定位的动态监测 | 第76-77页 |
| 3.结果 | 第77-81页 |
| ·间接免疫荧光检测DPV VP26亚细胞定位方法的建立及优化 | 第77-78页 |
| ·DPV UL35基因产物亚细胞定位的动态监测 | 第78-81页 |
| 4.讨论 | 第81-84页 |
| ·关于蛋白定位研究的方法 | 第81-82页 |
| ·DPV VP26在宿主亚细胞中的定位分析 | 第82-84页 |
| 第三部分 结论 | 第84-85页 |
| 第四部分 参考文献 | 第85-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 作者简介以及攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第97页 |
