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海洋微生物高通量分离培养技术的建立及青岛近海微生物多样性研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 文献综述第14-25页
 1 大多数海洋微生物不能获得纯培养的原因第14-17页
   ·实验室的纯培养破坏了微生物细胞之间的交流第14-15页
   ·培养条件与原生态环境差别太大第15-16页
   ·氧化胁迫引起细胞损伤第16页
   ·生长缓慢的微生物被忽视第16页
   ·活的非可培养(viable but nonculturable state,VBNC)状态细菌的存在第16-17页
 2 目前对未培养微生物的主要研究手段第17-18页
 3 近年发展的海洋微生物培养新方法第18-22页
   ·向培养基中添加微生物生长所必需的成分第18页
   ·降低培养过程中的毒害作用第18-19页
   ·稀释培养法第19页
   ·高通量培养法第19-20页
   ·扩散盒培养法第20页
   ·微囊包埋法第20-21页
   ·针对放线菌的培养法第21页
   ·根据微生物自身特性的培养方法第21-22页
 4 海洋微生物多样性的研究第22-23页
   ·海洋微生物多样性的研究手段第22-23页
   ·青岛浒苔暴发期间微生物多样性的研究第23页
 5 本论文研究的目的和意义第23-25页
第二章 海洋微生物高通量分离培养技术的建立第25-54页
 1 材料与方法第26-34页
   ·样品采集第26页
   ·培养基和菌株第26页
   ·试剂和仪器第26-27页
   ·样品处理第27-28页
     ·AODC计数第27页
     ·DVC 计数第27页
     ·平板计数第27-28页
   ·微生物包埋第28页
   ·微囊粒径的统计第28-29页
   ·培养第29页
   ·筛选第29-31页
     ·荧光染料对细菌活力的影响第29页
     ·微囊染色第29-30页
     ·流式细胞仪分选第30-31页
   ·纯化、保种第31页
   ·细菌的表型特征描述第31-32页
   ·PCR扩增及16SrDNA测序第32-33页
     ·引物设计及合成第32页
     ·细菌染色体DNA的提取第32页
     ·PCR扩增16SrDNA第32-33页
     ·扩增产物的检测及纯化第33页
   ·序列比对及系统树的构建第33-34页
 2 结果与分析第34-49页
   ·海水样品计数第34页
   ·微生物包埋第34-35页
   ·微囊粒径的统计第35-36页
   ·培养第36-37页
   ·筛选第37-39页
     ·荧光染料对细菌活力的影响第37-38页
     ·微囊染色第38-39页
   ·流式细胞仪分选第39-45页
   ·细菌的表型特征第45页
   ·32株菌的16SrDNA序列分析及系统发育分析第45-49页
 3 讨论第49-54页
   ·海洋微生物单细胞微囊包埋法的建立第49-50页
   ·实验过程中解决的技术问题第50-52页
   ·对培养结果的分析第52-53页
   ·与常规培养的细菌种类的比较第53-54页
第三章 浒苔暴发期间青岛近海岸环境中可培养 细菌多样性的研究第54-70页
 1 材料与方法第55-59页
   ·样品采集第55页
   ·培养基第55-56页
   ·试剂和仪器第56页
   ·样品处理第56页
     ·AODC计数第56页
     ·DVC 计数第56页
     ·平板计数第56页
   ·细菌的培养、纯化及保种第56-57页
   ·细菌的表型特征描述第57页
   ·PCR 扩增及 16SrDNA 测序第57-58页
     ·引物设计及合成第57页
     ·细菌染色体DNA的提取第57-58页
     ·PCR扩增16SrDNA第58页
     ·扩增产物的检测及纯化第58页
   ·序列比对及系统树的构建第58页
   ·向GenBank 提交序列第58-59页
 2 结果与分析第59-67页
   ·海水样品计数第59页
   ·细菌的表型特征第59-62页
   ·63 株菌的 16SrDNA 序列分析及系统发育分析第62-67页
 3 讨论第67-70页
参考文献第70-74页
论文发表第74页
个人简历第74-75页
致谢第75页

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