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RNA干扰沉默cbfa1基因对鹿茸干细胞成骨抑制作用的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 绪论第14-35页
   ·鹿茸第14-27页
     ·鹿茸的发生第15页
     ·鹿茸的再生第15-18页
     ·鹿茸干细胞第18-23页
     ·鹿茸骨化及其调控第23-27页
   ·cbfal基因第27-32页
     ·cbfal基因的结构特征第27-28页
     ·cbfal基因的功能第28-29页
     ·cbfal基因的表达调控第29-30页
     ·影响Cbfal功能的因子第30-31页
     ·cbfal应用展望第31-32页
   ·RNAi技术及其应用第32-33页
     ·基因功能的研究第32页
     ·RNAi转基因动物研究第32页
     ·基因治疗第32-33页
     ·研究信号传导的新途径第33页
     ·RNAi技术的应用前景第33页
   ·本试验研究的目的意义第33-35页
第二章 鹿茸干细胞的体外分离、培养及其生物学特性分析第35-42页
   ·材料与方法第35-38页
     ·材料第35-36页
     ·方法第36-38页
   ·结果分析第38-40页
     ·骨膜取材第38页
     ·细胞培养第38-39页
     ·角柄骨膜细胞生长曲线第39页
     ·cbfal基因的表达第39-40页
   ·讨论第40-41页
   ·小结第41-42页
第三章 鹿茸干细胞cbfal基因的克隆及分析第42-59页
   ·材料与方法第42-49页
     ·材料第42-44页
     ·方法第44-49页
   ·结果分析第49-56页
     ·细胞总RNA的提取第49页
     ·反转录PCR结果第49-50页
     ·重组克隆载体pMD-19T-cbfal的PCR鉴定第50页
     ·重组克隆载体pMD-19T-cbfal的序列测定第50-51页
     ·3'末端扩增结果第51-52页
     ·核酸开放阅读框(ORF)分析第52页
     ·氨基酸序列的翻译第52-53页
     ·基因编码蛋白序列分析第53-55页
     ·基因的同源性分析、进化分析第55-56页
   ·讨论第56-58页
     ·cbfal基因结构与生理功能第57页
     ·Cbfal基因的克隆与分析第57-58页
   ·小结第58-59页
第四章 梅花鹿cbfal基因RNAi慢病毒载体的构建及病毒包装第59-75页
   ·材料与方法第60-68页
     ·材料第60-62页
     ·方法第62-68页
   ·结果分析第68-72页
     ·siRNA退火结果第68-69页
     ·载体质粒的酶切及回收结果第69页
     ·载体质粒阳性克隆的PCR鉴定结果第69-70页
     ·pCMV-dR8.91及pMD2.G酶切鉴定结果第70-71页
     ·病毒包装结果第71-72页
   ·讨论第72-73页
   ·小结第73-75页
第五章 RNAi沉默cbfal基因对鹿茸干细胞成骨分化的影响第75-89页
   ·材料与方法第75-81页
     ·材料第75-77页
     ·方法第77-81页
   ·结果分析第81-87页
     ·病毒感染及微粒体培养第81-82页
     ·微粒体组织成骨的染色鉴定第82-83页
     ·cbfal基因mRNA沉默及其下游成骨基因表达量的变化第83-85页
     ·cbfal基因沉默的Western-Blot检测第85-87页
   ·讨论第87-88页
   ·小结第88-89页
第六章 全文结论第89-90页
参考文献第90-98页
致谢第98-99页
作者简历第99页

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