摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 绪论 | 第14-35页 |
·鹿茸 | 第14-27页 |
·鹿茸的发生 | 第15页 |
·鹿茸的再生 | 第15-18页 |
·鹿茸干细胞 | 第18-23页 |
·鹿茸骨化及其调控 | 第23-27页 |
·cbfal基因 | 第27-32页 |
·cbfal基因的结构特征 | 第27-28页 |
·cbfal基因的功能 | 第28-29页 |
·cbfal基因的表达调控 | 第29-30页 |
·影响Cbfal功能的因子 | 第30-31页 |
·cbfal应用展望 | 第31-32页 |
·RNAi技术及其应用 | 第32-33页 |
·基因功能的研究 | 第32页 |
·RNAi转基因动物研究 | 第32页 |
·基因治疗 | 第32-33页 |
·研究信号传导的新途径 | 第33页 |
·RNAi技术的应用前景 | 第33页 |
·本试验研究的目的意义 | 第33-35页 |
第二章 鹿茸干细胞的体外分离、培养及其生物学特性分析 | 第35-42页 |
·材料与方法 | 第35-38页 |
·材料 | 第35-36页 |
·方法 | 第36-38页 |
·结果分析 | 第38-40页 |
·骨膜取材 | 第38页 |
·细胞培养 | 第38-39页 |
·角柄骨膜细胞生长曲线 | 第39页 |
·cbfal基因的表达 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
·小结 | 第41-42页 |
第三章 鹿茸干细胞cbfal基因的克隆及分析 | 第42-59页 |
·材料与方法 | 第42-49页 |
·材料 | 第42-44页 |
·方法 | 第44-49页 |
·结果分析 | 第49-56页 |
·细胞总RNA的提取 | 第49页 |
·反转录PCR结果 | 第49-50页 |
·重组克隆载体pMD-19T-cbfal的PCR鉴定 | 第50页 |
·重组克隆载体pMD-19T-cbfal的序列测定 | 第50-51页 |
·3'末端扩增结果 | 第51-52页 |
·核酸开放阅读框(ORF)分析 | 第52页 |
·氨基酸序列的翻译 | 第52-53页 |
·基因编码蛋白序列分析 | 第53-55页 |
·基因的同源性分析、进化分析 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-58页 |
·cbfal基因结构与生理功能 | 第57页 |
·Cbfal基因的克隆与分析 | 第57-58页 |
·小结 | 第58-59页 |
第四章 梅花鹿cbfal基因RNAi慢病毒载体的构建及病毒包装 | 第59-75页 |
·材料与方法 | 第60-68页 |
·材料 | 第60-62页 |
·方法 | 第62-68页 |
·结果分析 | 第68-72页 |
·siRNA退火结果 | 第68-69页 |
·载体质粒的酶切及回收结果 | 第69页 |
·载体质粒阳性克隆的PCR鉴定结果 | 第69-70页 |
·pCMV-dR8.91及pMD2.G酶切鉴定结果 | 第70-71页 |
·病毒包装结果 | 第71-72页 |
·讨论 | 第72-73页 |
·小结 | 第73-75页 |
第五章 RNAi沉默cbfal基因对鹿茸干细胞成骨分化的影响 | 第75-89页 |
·材料与方法 | 第75-81页 |
·材料 | 第75-77页 |
·方法 | 第77-81页 |
·结果分析 | 第81-87页 |
·病毒感染及微粒体培养 | 第81-82页 |
·微粒体组织成骨的染色鉴定 | 第82-83页 |
·cbfal基因mRNA沉默及其下游成骨基因表达量的变化 | 第83-85页 |
·cbfal基因沉默的Western-Blot检测 | 第85-87页 |
·讨论 | 第87-88页 |
·小结 | 第88-89页 |
第六章 全文结论 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
作者简历 | 第99页 |