| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-24页 |
| ·病原概述 | 第14-16页 |
| ·猪流行性腹泻病毒 | 第14-15页 |
| ·猪传染性胃肠炎病毒 | 第15页 |
| ·猪轮状病毒 | 第15-16页 |
| ·PEDV、TGEV、PORV 的诊断方法 | 第16-20页 |
| ·临床诊断 | 第17页 |
| ·实验室诊断 | 第17-20页 |
| ·实时荧光定量PCR 技术 | 第20-22页 |
| ·原理 | 第20-21页 |
| ·分类 | 第21页 |
| ·应用 | 第21-22页 |
| ·研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 PEDV、TGEV、PORV SYBR GREEN-I 实时荧光 PCR 方法的建立 | 第24-44页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·病毒、细胞及病料来源 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-32页 |
| ·病毒培养 | 第24-25页 |
| ·病毒半数组织感染量（TCID50）的测定 | 第25-26页 |
| ·荧光定量PCR 引物的设计 | 第26-27页 |
| ·病毒RNA 的提取及反转录 | 第27页 |
| ·常规PCR 鉴定 | 第27页 |
| ·PCR 产物的胶回收 | 第27-28页 |
| ·连接与转化 | 第28-29页 |
| ·荧光定量PCR 标准品的制备及标准曲线的建立 | 第29-30页 |
| ·荧光定量PCR 的特异性 | 第30-31页 |
| ·荧光定量PCR 的重复性 | 第31页 |
| ·荧光定量PCR 的敏感性 | 第31页 |
| ·荧光定量PCR 临床样品检测 | 第31页 |
| ·荧光定量PCR 细胞培养物样品检测 | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-42页 |
| ·病毒TCID50 测定结果 | 第32页 |
| ·扩增目的片段PCR 电泳结果 | 第32页 |
| ·重组质粒测序结果 | 第32-33页 |
| ·荧光定量PCR 标准曲线 | 第33-36页 |
| ·荧光定量PCR 特异性试验结果 | 第36-37页 |
| ·荧光定量PCR 重复性试验结果 | 第37-39页 |
| ·荧光定量PCR 敏感性试验结果 | 第39-40页 |
| ·荧光定量PCR 临床样品检测结果 | 第40-41页 |
| ·荧光定量PCR 细胞毒样品检测结果 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 PEDV 与 TGEV 二重 SYBR GREEN-I 荧光 PCR 方法的建立.. | 第44-50页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·毒株 | 第44页 |
| ·生化试剂及试剂盒 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-45页 |
| ·病毒培养 | 第44页 |
| ·引物 | 第44页 |
| ·PEDV、TGEV 病毒RNA 的提取以及cDNA 的制备 | 第44页 |
| ·二重实时荧光PCR 反应体系及条件 | 第44-45页 |
| ·二重实时荧光PCR 特异性试验 | 第45页 |
| ·二重实时荧光PCR 重复性试验 | 第45页 |
| ·二重实时荧光PCR 敏感性试验 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-48页 |
| ·PEDV、TGEV 的Tm 值确定 | 第45-46页 |
| ·二重实时荧光PCR 特异性试验 | 第46页 |
| ·二重实时荧光PCR 重复性试验 | 第46-47页 |
| ·二重实时荧光PCR 敏感性实验结果 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 全文结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
