| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-22页 |
| ·蜱功能基因研究的目的和意义 | 第12-13页 |
| ·蜱功能基因的筛选与鉴定 | 第13-15页 |
| ·长角血蜱功能基因研究进展 | 第15-21页 |
| ·本研究的内容及方法 | 第21-22页 |
| 第二章 文库的免疫学筛选及基因的克隆 | 第22-32页 |
| ·材料和方法 | 第22-27页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·试剂 | 第22页 |
| ·仪器与设备 | 第22-23页 |
| ·阳性血清的制备 | 第23-24页 |
| ·长角血蜱饥饿雌蜱cDNA 表达文库的免疫学筛选 | 第24-25页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第25-27页 |
| ·结果 | 第27-29页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第27-28页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定结果 | 第28-29页 |
| ·阳性克隆的测序 | 第29页 |
| ·讨论 | 第29-32页 |
| 第三章 阳性克隆原核表达及反应原性的初步鉴定 | 第32-40页 |
| ·材料和方法 | 第32-35页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·目的基因的诱导表达 | 第32-33页 |
| ·表达产物的蛋白电泳检测 | 第33-34页 |
| ·重组蛋白反应原性的鉴定 | 第34-35页 |
| ·结果 | 第35-38页 |
| ·重组菌株表达蛋白的SDS-PAGE 检测 | 第35-37页 |
| ·重组菌株表达蛋白的western-blot 检测 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 HL05 全长基因的获得及生物信息学分析 | 第40-51页 |
| ·材料和方法 | 第40-43页 |
| ·蜱 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·5′RACE 引物 | 第40页 |
| ·提取长角血蜱饥饿雌蜱总RNA | 第40-41页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第41页 |
| ·HL05 5’端扩增 | 第41-42页 |
| ·HL05 全序列的获得 | 第42-43页 |
| ·HL05 全序列的生物信息学分析 | 第43页 |
| ·结果 | 第43-49页 |
| ·长角血蜱饥饿雌蜱总RNA 的提取 | 第43页 |
| ·HL05 5’端扩增及套式PCR 检测 | 第43-44页 |
| ·HL05 全长序列的获得 | 第44-45页 |
| ·HL05 全长序列的生物信息学分析 | 第45-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第五章 HL05 蛋白的纯化及其动物保护性实验 | 第51-60页 |
| ·材料与方法 | 第51-54页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| ·实验动物 | 第51页 |
| ·HL05 蛋白表达条件的优化 | 第51页 |
| ·HL05 蛋白可溶性分析 | 第51-52页 |
| ·HL05 蛋白的纯化 | 第52页 |
| ·免疫动物与攻蜱实验 | 第52-53页 |
| ·血清学检验(ELISA) | 第53-54页 |
| ·天然 HL05 蛋白的免疫检测 | 第54页 |
| ·结果 | 第54-58页 |
| ·HL05 蛋白表达条件的优化 | 第54-55页 |
| ·HL05 蛋白的可溶性分析 | 第55页 |
| ·HL05 蛋白的纯化 | 第55-56页 |
| ·抗原抗体最佳工作浓度的测定 | 第56-57页 |
| ·免疫后血清抗体水平检测 | 第57页 |
| ·天然 HL05 蛋白的免疫检测 | 第57页 |
| ·攻蜱实验结果 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 第六章 全文结论 | 第60-61页 |
| ·筛选长角血蜱饥饿雌蜱全蜱CDNA 文库，获得多个新基因 | 第60页 |
| ·多个新基因的原核表达及反应原性鉴定 | 第60页 |
| ·HL05 全长 CDNA 序列获得及生物信息学分析 | 第60页 |
| ·HL05 天然蛋白的存在形式分析 | 第60页 |
| ·HL05 重组蛋白进行动物保护性实验 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 作者简历 | 第71页 |
