摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
英文缩略语表 | 第10-11页 |
前言 | 第11-14页 |
第一部分 材料与方法 | 第14-30页 |
1 材料 | 第14-18页 |
·细胞株 | 第14页 |
·主要试剂 | 第14-15页 |
·主要仪器设备 | 第15-16页 |
·常用试剂配置 | 第16-17页 |
·PCR引物 | 第17-18页 |
2 方法 | 第18-30页 |
·重组质粒、空质粒扩增及质粒抽提 | 第18-19页 |
·pcDNA3.1/V5-His/ABCA1重组质粒酶切 | 第19-20页 |
·PCR扩增目的片段 | 第20-23页 |
·TA克隆 | 第23页 |
·目的基因亚克隆 | 第23-25页 |
·Hela细胞株的培养保存 | 第25-26页 |
·脂质体转染 | 第26页 |
·激光共聚焦检测突变体表达 | 第26-27页 |
·MTT法检测细胞株的抗砷性 | 第27-28页 |
·AFS法检测细胞内砷蓄积量 | 第28页 |
·Annexin V-FITC Apoptosis Detection kit检测细胞凋亡 | 第28-30页 |
第二部分 实验结果 | 第30-38页 |
1. 突变体构建结果 | 第30-33页 |
·抽提pcDNA3.1/ABCA1重组质粒结果 | 第30页 |
·AfeI+SnaBI双酶切结果 | 第30-31页 |
·PCR扩增编码突变基因结果 | 第31页 |
·TA克隆质粒的构建和鉴定 | 第31-32页 |
·突变克隆质粒的构建和鉴定 | 第32页 |
·测序与序列分析 | 第32-33页 |
2. 突变体细胞定位检测结果 | 第33-34页 |
3. 突变体抗砷功能检测结果 | 第34-38页 |
·MTT法检测细胞抗砷性变化 | 第34-35页 |
·转染后细胞内砷蓄积量测定 | 第35-36页 |
·转染后细胞凋亡率测定 | 第36-38页 |
第三部分 实验讨论 | 第38-43页 |
小结与展望 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
文献综述 | 第49-54页 |
参考文献 | 第52-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
作者简介 | 第55-56页 |
导师评语 | 第56页 |