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ABCA1胞外第一环缺失突变体构建及其抗砷性研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
英文缩略语表第10-11页
前言第11-14页
第一部分 材料与方法第14-30页
 1 材料第14-18页
   ·细胞株第14页
   ·主要试剂第14-15页
   ·主要仪器设备第15-16页
   ·常用试剂配置第16-17页
   ·PCR引物第17-18页
 2 方法第18-30页
   ·重组质粒、空质粒扩增及质粒抽提第18-19页
   ·pcDNA3.1/V5-His/ABCA1重组质粒酶切第19-20页
   ·PCR扩增目的片段第20-23页
   ·TA克隆第23页
   ·目的基因亚克隆第23-25页
   ·Hela细胞株的培养保存第25-26页
   ·脂质体转染第26页
   ·激光共聚焦检测突变体表达第26-27页
   ·MTT法检测细胞株的抗砷性第27-28页
   ·AFS法检测细胞内砷蓄积量第28页
   ·Annexin V-FITC Apoptosis Detection kit检测细胞凋亡第28-30页
第二部分 实验结果第30-38页
 1. 突变体构建结果第30-33页
   ·抽提pcDNA3.1/ABCA1重组质粒结果第30页
   ·AfeI+SnaBI双酶切结果第30-31页
   ·PCR扩增编码突变基因结果第31页
   ·TA克隆质粒的构建和鉴定第31-32页
   ·突变克隆质粒的构建和鉴定第32页
   ·测序与序列分析第32-33页
 2. 突变体细胞定位检测结果第33-34页
 3. 突变体抗砷功能检测结果第34-38页
   ·MTT法检测细胞抗砷性变化第34-35页
   ·转染后细胞内砷蓄积量测定第35-36页
   ·转染后细胞凋亡率测定第36-38页
第三部分 实验讨论第38-43页
小结与展望第43-44页
参考文献第44-49页
文献综述第49-54页
 参考文献第52-54页
致谢第54-55页
作者简介第55-56页
导师评语第56页

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