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TAT-Cry1Ac融合蛋白在烟草、拟南芥中阳性植株的筛选及对小菜蛾治理研究

中文摘要第1-3页
Abstract第3-8页
第1章 绪论第8-21页
   ·Bt基因在蔬菜遗传转化应用概述第8-12页
     ·茄科蔬菜转Bt基因的研究第9-10页
     ·十字花科蔬菜转Bt基因的研究第10-11页
     ·其他蔬菜转Bt基因的研究第11-12页
   ·昆虫对Bt转基因植物产生抗性问题及预防对策第12-14页
     ·抗性问题第12-13页
     ·预防对策第13-14页
   ·小菜蛾抗性机制及研究现状第14-15页
     ·小菜蛾Bt抗性机制及防治第14-15页
     ·小菜蛾的防治第15页
   ·TAT基因研究进展第15-20页
     ·TAT基因结构与功能第16-17页
     ·TAT基因转导机制第17-18页
     ·TAT基因应用概述第18-20页
   ·研究目的意义第20-21页
     ·研究目的第20页
     ·研究意义第20-21页
第2章 材料和方法第21-44页
   ·实验材料第21-25页
     ·植物材料第21页
     ·载体和菌株第21页
     ·供试昆虫第21页
     ·酶及主要缓冲液第21-22页
     ·蛋白电泳、ELISA试剂第22-23页
     ·组织培养试剂第23-25页
     ·实验仪器第25页
   ·融合基因植物表达载体构建及检测第25-34页
     ·引物设计第25-27页
     ·融合基因的检测第27-33页
     ·根瘤农杆菌感受态细胞的制备与冻溶法转化第33-34页
   ·叶盘法转化烟草、花序浸染法转化拟南芥第34-39页
     ·农杆菌介导转化烟草第34-35页
     ·花序浸染法转化拟南芥第35-37页
     ·转基因阳性植株基因组DNA提取第37页
     ·转基因阳性植株PCR检测第37-38页
     ·转基因阳性植株总RNA的提取第38-39页
     ·转基因阳性植株RT-PCR检测第39页
   ·融合蛋白表达、检测第39-43页
     ·转基因阳性植株总蛋白提取第39-40页
     ·阳性植株蛋白的SDS-PAGE检测第40-41页
     ·阳性植株蛋白的Western-blot检测第41-42页
     ·ELISA测定阳性植株蛋白的表达量第42-43页
   ·融合蛋白对小菜蛾室内毒力测定第43-44页
第3章 结果与分析第44-61页
   ·重组质粒的鉴定第44-52页
     ·重组基因与YEplac195原核表达载体融合的检测第46-51页
     ·融合基因与植物表达载体pBIl21重组的检测第51-52页
   ·烟草、拟南芥转化植株的筛选与再生第52-53页
   ·阳性植株PCR检测第53-54页
   ·阳性植株RT-PCR检测第54-55页
   ·转基因阳性植株Western blot检测第55-57页
   ·转基因阳性蛋白ELISA第57-58页
   ·融合蛋白对小菜蛾毒力测定第58-61页
讨论第61-63页
结论第63-64页
参考文献第64-71页
致谢第71-72页

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