摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-6页 |
英文缩写表 | 第6-10页 |
第一章 前言 | 第10-24页 |
1 模式动物斑马鱼 | 第10-16页 |
·斑马鱼做为模式动物的特点和优势 | 第11-12页 |
·目前利用斑马鱼开展的主要研究 | 第12-13页 |
·斑马鱼胚胎的早期发育过程 | 第13-16页 |
2 GAS41基因的研究现状 | 第16-21页 |
·YEATS结构域蛋白家族 | 第16-17页 |
·GAS41基因 | 第17-18页 |
·GAS41的生物学功能研究情况 | 第18-21页 |
3 反义吗啉环寡聚核苷酸抑制技术 | 第21-23页 |
4 本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-49页 |
1 实验材料 | 第24-32页 |
·实验动物 | 第24页 |
·菌种和细胞株 | 第24页 |
·载体和工具酶 | 第24-26页 |
·试剂盒 | 第26-27页 |
·其它试剂 | 第27页 |
·所需溶液 | 第27-30页 |
·生物信息学分析主要软件与数据库 | 第30-31页 |
·主要仪器设备 | 第31-32页 |
2 实验方法 | 第32-49页 |
·细胞培养 | 第33-34页 |
·总RNA的提取及cDNA合成 | 第34-35页 |
·表达载体的构建 | 第35-39页 |
·原位杂交 | 第39-46页 |
·显微注射 | 第46-49页 |
第三章 结果与分析 | 第49-64页 |
1 GAS41基因生物信息学分析 | 第49-54页 |
·GAS41基因序列分析 | 第49页 |
·GAS41基因编码蛋白的结构分析及功能预测基因 | 第49-54页 |
2 表达载体的构建 | 第54-55页 |
·PCR扩增出GAS41目的片段 | 第54-55页 |
·GAS41表达载体的构建 | 第55页 |
3 RT-PCR分析GAS41 MRNA在胚胎的时间表达和成体的空间表达 | 第55-56页 |
4 整体原位杂交分析GAS41 MRNA在胚胎发育中的表达 | 第56-58页 |
·DIG-标记RNA探针的制备 | 第56-57页 |
·胚胎整体原位杂交(GAS41 mRNA在胚胎发育中的时空表达) | 第57-58页 |
5 显微注射 | 第58-63页 |
·过量表达GAS41基因表达对斑马鱼胚胎发育的影响 | 第58-59页 |
·GAS41-MO的有效性验证 | 第59-60页 |
·抑制GAS41基因表达对斑马鱼胚胎发育的影响 | 第60-63页 |
6 细胞定位分析 | 第63-64页 |
第四章 讨论 | 第64-67页 |
参考文献 | 第67-74页 |
附录 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |