| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 上篇 文献综述 | 第13-26页 |
| 第一章 产酶溶杆菌的研究进展 | 第14-20页 |
| 1 产酶溶杆菌的分类及鉴定 | 第14-15页 |
| 2 产酶溶杆菌的生物学特征 | 第15-16页 |
| 3 产酶溶杆菌的生物防治功能及调控机理研究 | 第16-20页 |
| 3.1 胞外水解酶 | 第16-17页 |
| 3.2 次级代谢产物 | 第17-18页 |
| 3.3 产酶溶杆菌调控机理研究 | 第18-20页 |
| 第二章 细菌Ⅳ型菌毛组装和功能的研究进展 | 第20-26页 |
| 1 Ⅳ型菌毛的结构 | 第20-21页 |
| 2 Ⅳ型菌毛的组装 | 第21-22页 |
| 3 Ⅳ型菌毛的主要功能 | 第22-26页 |
| 3.1 表面粘附 | 第22-23页 |
| 3.2 生物膜的形成 | 第23页 |
| 3.3 蹭行运动 | 第23-24页 |
| 3.4 蛋白分泌和遗传物质的摄取 | 第24-26页 |
| 下篇 研究内容 | 第26-82页 |
| 第一章 产酶溶杆菌OH11中Ⅳ型菌毛组装和调控基因的鉴定及功能研究 | 第28-68页 |
| 1 试验材料 | 第28-38页 |
| 1.1 菌株、质粒 | 第28-32页 |
| 1.2 培养基、培养条件及菌种保存方式 | 第32-33页 |
| 1.3 酶和抗生素 | 第33页 |
| 1.4 试剂盒及化学试剂 | 第33页 |
| 1.5 引物设计及合成 | 第33-38页 |
| 2 试验方法 | 第38-49页 |
| 2.1 DNA操作方法及体系 | 第38-41页 |
| 2.2 连接产物热转化大肠杆菌Top10 | 第41-42页 |
| 2.3 重组载体的构建 | 第42-43页 |
| 2.4 质粒提取与双酶切验证 | 第43-44页 |
| 2.5 制备产酶溶杆菌OH11电转感受态细胞以及电转化筛选突变体 | 第44-45页 |
| 2.6 互补菌株及相应突变体空载的构建 | 第45-46页 |
| 2.7 菌落形态的观察 | 第46页 |
| 2.8 菌体表面活动能力观察 | 第46页 |
| 2.9 电镜下菌毛形态的观察 | 第46-47页 |
| 2.10 HSAF的提取和HSAF产量的检测 | 第47-48页 |
| 2.11 T4P中相关基因的共转录验证 | 第48-49页 |
| 2.12 数据分析 | 第49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-66页 |
| 3.1 产酶溶杆菌OH11含有29个与T4P相关的基因 | 第49-50页 |
| 3.2 T4P中缺失突变体重组载体的构建 | 第50-52页 |
| 3.3 构建获得T4P基因缺失突变体 | 第52-54页 |
| 3.4 部分T4P基因参与调控菌落形态的形成 | 第54-55页 |
| 3.5 29个T4P基因中18个参与调控TM的形成 | 第55-62页 |
| 3.6 丧失TM能力的T4P突变体的菌毛观察 | 第62-63页 |
| 3.7 调控TM的T4P基因主要形成了4个操纵子 | 第63-65页 |
| 3.8 T4P缺失突变体中△pilG、△pilS影响HSAF产量 | 第65-66页 |
| 4 讨论 | 第66-68页 |
| 第二章 PIL蛋白的相互作用研究 | 第68-82页 |
| 1 试验材料 | 第68-71页 |
| 1.1 菌株、质粒 | 第68-70页 |
| 1.2 培养基、培养条件及菌种保存方式 | 第70页 |
| 1.3 引物设计及合成 | 第70-71页 |
| 2 试验方法 | 第71-73页 |
| 2.1 DNA操作方法及体系 | 第71-72页 |
| 2.2 连接产物热转化大肠杆菌Top10 | 第72页 |
| 2.3 细菌双杂交 | 第72-73页 |
| 3 结果分析 | 第73-79页 |
| 3.1 成功构建18个pil-pKT25以及18个pil-pUT18C重组载体 | 第73-76页 |
| 3.2 Pil蛋白互作 | 第76-79页 |
| 4 讨论 | 第79-82页 |
| 参考文献 | 第82-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
