| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词简表 (ABBREVIATIONS) | 第11-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-23页 |
| 1.1 葡萄糖转运蛋白 4（GLUT4) | 第15-16页 |
| 1.1.1 GLUT4的结构、分布和功能 | 第15页 |
| 1.1.2 胰岛素刺激GLUT4转运 | 第15-16页 |
| 1.2 磷脂酰肌醇（PI） | 第16-21页 |
| 1.2.1 PI(4,5)P2信号调控GLUT4囊泡的转运 | 第19-20页 |
| 1.2.2 其他PIs信号调控GLUT4囊泡的转运 | 第20-21页 |
| 1.3 光遗传学技术 | 第21-22页 |
| 1.4 课题设计及研究意义 | 第22页 |
| 1.5 本章小结 | 第22-23页 |
| 第二章 3T3-L1脂肪细胞的培养及电穿孔转染模型的建立 | 第23-35页 |
| 2.1 引言 | 第23页 |
| 2.2 实验器材 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-29页 |
| 2.3.1 试剂配制 | 第24-26页 |
| 2.3.2 3T3-L1细胞的培养 | 第26-27页 |
| 2.3.3 细胞染色 | 第27页 |
| 2.3.4 感受态细菌的转化，质粒DNA的扩增及抽提 | 第27-28页 |
| 2.3.4.1 感受态细菌的转化 | 第27页 |
| 2.3.4.2 挑选单克隆细菌与质粒DNA的扩增 | 第27页 |
| 2.3.4.3 高纯度转染级别质粒的抽提 | 第27-28页 |
| 2.3.5 3T3-L1脂肪细胞的电穿孔转染 | 第28-29页 |
| 2.3.6 活细胞TIRFM成像及图像分析 | 第29页 |
| 2.4 实验结果 | 第29-31页 |
| 2.4.1 3T3-L1细胞的培养 | 第29-30页 |
| 2.4.2 细胞核Hoechst 33342 染色及脂滴油红O染色 | 第30页 |
| 2.4.3 3T3-L1脂肪细胞的电穿孔转染 | 第30-31页 |
| 2.5 实验讨论 | 第31-33页 |
| 2.5.1 细胞的培养、分化与染色 | 第31-32页 |
| 2.5.2 细胞的染色 | 第32页 |
| 2.5.3 细胞的电穿孔转染 | 第32-33页 |
| 2.6 本章小结 | 第33-35页 |
| 第三章 PI(4,5)P2瞬时光控模型的建立 | 第35-43页 |
| 3.1 引言 | 第35页 |
| 3.2 实验器材 | 第35-37页 |
| 3.3 实验方法 | 第37-38页 |
| 3.3.1 试剂配制 | 第37页 |
| 3.3.2 3T3-L1脂肪细胞的电穿孔转染 | 第37页 |
| 3.3.3 A549细胞的转染 | 第37页 |
| 3.3.4 活细胞TIRFM成像及图像分析 | 第37-38页 |
| 3.3.5 统计处理 | 第38页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第38-42页 |
| 3.3.1 应用可调式CRY2/CIBN光遗传学元件瞬时光控 3T3-L1脂肪细胞质膜上的PI(4,5)P2 | 第38-41页 |
| 3.3.2 可调式CRY2/CIBN光遗传学元件在A549细胞内光刺激动态响应 | 第41-42页 |
| 3.5 本章小结 | 第42-43页 |
| 第四章 磷脂酰肌醇PI(4,5)P2对 3T3-L1脂肪细胞内GLUT4调控的探究 | 第43-65页 |
| 4.1 引言 | 第43页 |
| 4.2 实验器材 | 第43-45页 |
| 4.3 实验方法 | 第45-49页 |
| 4.3.1 试剂配制 | 第45-46页 |
| 4.3.2 3T3-L1脂肪细胞的电穿孔转染 | 第46页 |
| 4.3.3 3T3-L1脂肪细胞活细胞TIRFM成像及图像分析 | 第46页 |
| 4.3.4 3T3-L1脂肪细胞的间接免疫荧光技术（Immunofluorescence，IF） | 第46-47页 |
| 4.3.5 蛋白质印迹法检测P-Akt（Ser473）或P-Akt（Thr308） | 第47-49页 |
| 4.3.5.1 蛋白提取 | 第47-48页 |
| 4.3.5.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第48页 |
| 4.3.5.3 蛋白质印迹法（Western Blot） | 第48-49页 |
| 4.3.6 统计处理 | 第49页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第49-64页 |
| 4.4.1 胰岛素刺激下，PI(4,5)P2促进 3T3-L1脂肪细胞内GLUT4转运 | 第49-52页 |
| 4.4.2 胰岛素刺激下，PI(4,5)P2参与 3T3-L1脂肪细胞内GLUT4囊泡的融合 | 第52-54页 |
| 4.4.3 胰岛素刺激下，PI(4,5)P2参与 3T3-L1脂肪细胞内GLUT4囊泡的锚定 | 第54-56页 |
| 4.4.4 基础状态下，PI(4,5)P2参与 3T3-L1脂肪细胞内GLUT4囊泡的锚定 | 第56-60页 |
| 4.4.5 PI(4,5)P2对 3T3-L1脂肪细胞内Akt的Thr308和Ser473磷酸化的影响 | 第60-64页 |
| 4.5 本章小结 | 第64-65页 |
| 总结与展望 | 第65-67页 |
| 5.1 总结 | 第65-66页 |
| 5.2 创新点 | 第66页 |
| 5.3 展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 硕士期间发表的论文和专利 | 第75页 |
