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低温胁迫下活性氧对斑马鱼ZF4细胞基因组DNA甲基化水平的影响

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
第一章 引言第11-23页
    1.1 低温胁迫对鱼类的影响第11-12页
    1.2 DNA甲基化第12-14页
        1.2.1 DNA甲基化的形成以及去除机制第12-13页
        1.2.2 DNA甲基化的主要功能第13页
        1.2.3 温度对脊椎动物甲基化水平的影响第13-14页
    1.3 活性氧(ROS)第14-16页
        1.3.1 低温与氧化应激第15-16页
    1.4 DNA损伤第16-19页
        1.4.1 DNA损伤与活性氧第17页
        1.4.2 DNA损伤与DNA甲基化第17-19页
    1.5 运动失调毛细血管扩张突变蛋白(ATM)第19-22页
        1.5.1 ROS与ATM信号通路第20页
        1.5.2 DNA甲基化与ATM信号通路第20-22页
    1.6 本研究的意义第22-23页
第二章 材料与方法第23-36页
    2.1 引言第23页
    2.2 细胞第23页
    2.3 主要试剂与仪器第23-26页
        2.3.1 主要试剂第23-25页
        2.3.2 主要仪器第25-26页
    2.4 主要试剂配方第26-27页
        2.4.1 提基因组DNA细胞裂解液第26页
        2.4.2 Western blot现用现配试剂配方第26页
        2.4.3 其他试剂配制第26-27页
    2.5 实验方法与步骤第27-36页
        2.5.1 细胞复苏第27页
        2.5.2 细胞传代第27页
        2.5.3 细胞冻存第27-28页
        2.5.4 细胞低温处理及形态观察第28页
        2.5.5 N-乙酰半胱氨酸(NAC)处理细胞第28页
        2.5.6 KU-55933处理细胞第28页
        2.5.7 细胞密度与比生长速率测定第28-29页
        2.5.8 基因组DNA的提取第29-30页
        2.5.9 限制性内切酶检测DNA甲基化水平第30页
        2.5.10 Western Blot分析蛋白表达水平第30-33页
        2.5.11 5-mCDNAELISAKit检测基因组DNA甲基化水平第33-36页
第三章 结果与讨论第36-45页
    3.1 细胞低温处理后形态变以及比生长率化第36-37页
    3.2 短期低温下基因组DNA甲基化水平上升第37-39页
    3.3 短期低温下细胞甲基化水平上升与活性氧产生相关第39-41页
    3.4 短期低温下细胞甲基化水平上升与DNA损伤修复相关第41-42页
    3.5 讨论第42-45页
第四章 结论第45-46页
参考文献第46-54页
硕士期间发表的文章第54-55页
致谢第55页

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