| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第9-21页 |
| 1.1 共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid, CLA) | 第9-13页 |
| 1.1.1 共轭亚油酸的结构与性质 | 第9-10页 |
| 1.1.2 共轭亚油酸的来源 | 第10-12页 |
| 1.1.3 共轭亚油酸的生理作用 | 第12-13页 |
| 1.2 亚油酸异构酶 | 第13-17页 |
| 1.2.1 亚油酸异构酶的种类 | 第13-14页 |
| 1.2.2 亚油酸异构酶的性质 | 第14-17页 |
| 1.3 根癌农杆菌介导的丝状真菌遗传转化体系 | 第17-19页 |
| 1.3.1 根癌农杆菌介导真菌遗传转化的特点 | 第17-18页 |
| 1.3.2 根癌农杆菌介导真菌遗传转化的影响因素 | 第18页 |
| 1.3.3 根癌农杆菌介导真菌遗传转化的应用 | 第18-19页 |
| 1.4 本论文的研究意义和内容 | 第19-21页 |
| 1.4.1 研究背景 | 第19-20页 |
| 1.4.2 研究目的和意义 | 第20页 |
| 1.4.3 研究内容 | 第20-21页 |
| 2 实验材料与方法 | 第21-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-29页 |
| 2.1.1 菌株、质粒和引物 | 第21-22页 |
| 2.1.2 工具酶和主要试剂 | 第22-24页 |
| 2.1.3 主要仪器和设备 | 第24-25页 |
| 2.1.4 培养基和主要溶液 | 第25-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-43页 |
| 2.2.1 霉菌基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.2.2 痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes 1.243)基因组DNA的提取 | 第30页 |
| 2.2.3 琼脂糖DNA凝胶电泳 | 第30页 |
| 2.2.4 大肠杆菌的化学转化 | 第30-31页 |
| 2.2.5 三种油脂真菌对不同抗生素的敏感性实验 | 第31页 |
| 2.2.6 重组质粒pFGL59-PgpdA-Ttrpc(pLH51)的构建 | 第31-36页 |
| 2.2.7 表达质粒pFGL59-PgpdA-pai-Ttrpc(pLH55)的构建 | 第36页 |
| 2.2.8 表达质粒pFGL59-PgpdA-pai-Ttrpc-sulfu (pLH107)的构建 | 第36页 |
| 2.2.9 农杆菌的电转化 | 第36-37页 |
| 2.2.10 农杆菌介导的拉曼被孢霉和高山被孢霉的转化 | 第37-38页 |
| 2.2.11 农杆菌介导的拉曼被孢霉转化条件的优化 | 第38-39页 |
| 2.2.12 拉曼被孢霉RNA的提取与RT-PCR | 第39-41页 |
| 2.2.13 拉曼被孢霉转化子和野生型菌株的摇瓶发酵 | 第41页 |
| 2.2.14 油脂的提取与检测 | 第41-43页 |
| 3 结果与讨论 | 第43-63页 |
| 3.1 三株油脂真菌的形态观察及敏感性实验 | 第43-46页 |
| 3.1.1 三株油脂真菌形态的观察 | 第43-44页 |
| 3.1.2 三株油脂真菌菌丝体内油脂产量的分析 | 第44页 |
| 3.1.3 三株真菌的敏感性实验 | 第44-46页 |
| 3.1.4 小结 | 第46页 |
| 3.2 高山被孢霉遗传转化系统的构建及pai的异源表达 | 第46-50页 |
| 3.2.1 表达质粒pFGL59-PgpdA-pai-Ttrpc-sulfu (pLH107)的构建 | 第46-47页 |
| 3.2.2 农杆菌介导的高山被孢霉的转化 | 第47-49页 |
| 3.2.3 高山被孢霉转化子菌株摇瓶发酵产物分析 | 第49-50页 |
| 3.2.4 小结 | 第50页 |
| 3.3 拉曼被孢霉遗传转化系统的构建及pai的异源表达 | 第50-63页 |
| 3.3.1 丝状真菌基因组和痤疮丙酸杆菌基因组的提取 | 第50-51页 |
| 3.3.2 表达质粒pFGL59-PgpdA-Ttrpc (pLH51)的构建 | 第51-52页 |
| 3.3.3 表达质粒pFGL59-PgpdA-pai-Ttrpc (pLH55)质粒的构建 | 第52-55页 |
| 3.3.4 农杆菌介导的拉曼被孢霉的转化 | 第55-57页 |
| 3.3.5 农杆菌介导的拉曼被孢霉的转化条件优化 | 第57-60页 |
| 3.3.6 转化子中亚油酸异构酶基因pai转录情况分析 | 第60-61页 |
| 3.3.7 拉曼被孢霉转化子和野生型菌株摇瓶发酵产物分析 | 第61-62页 |
| 3.3.8 小结 | 第62-63页 |
| 4 结论 | 第63-64页 |
| 5 展望 | 第64-65页 |
| 6 参考文献 | 第65-70页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第70-71页 |
| 8 致谢 | 第71页 |
