致谢 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第15-29页 |
1.1 植物逆境胁迫的应答机制 | 第15-17页 |
1.1.1 植物逆境响应和适应性机制简述 | 第15页 |
1.1.2 茉莉酸在植物逆境相应信号传递中的作用 | 第15-17页 |
1.2 脂肪酸氧合酶的蛋白特性 | 第17-23页 |
1.2.1 脂肪酸氧合酶的基本特征 | 第17-18页 |
1.2.2 脂肪酸氧合酶途径 | 第18-19页 |
1.2.3 脂肪酸氧合酶的家族分类 | 第19页 |
1.2.4 植物脂肪酸氧合酶的作用 | 第19-23页 |
1.3 基于全基因组测序的基因家族发掘 | 第23-26页 |
1.3.1 植物基因家族的测序 | 第23-24页 |
1.3.2 植物基因家族分子进化机制 | 第24-26页 |
1.3.3 基因家族成员的鉴定 | 第26页 |
1.4 植物基因功能的研究策略 | 第26-29页 |
1.4.1 基于原核表达系统高效表达目的蛋白 | 第26页 |
1.4.2 基于CRISPR/Cas9系统的功能丧失方法 | 第26-29页 |
引言 | 第29-31页 |
一、立项依据及意义 | 第29-30页 |
二、技术路线 | 第30-31页 |
第二章 杨树LOX基因家族分子进化分析 | 第31-47页 |
2.1 材料与方法 | 第31-34页 |
2.1.1 植物材料 | 第31页 |
2.1.2 酶及试剂 | 第31页 |
2.1.3 仪器设备 | 第31页 |
2.1.4 研究方法 | 第31-34页 |
2.2 结果与分析 | 第34-45页 |
2.2.1 杨树全基因组LOX基因的鉴定和分类 | 第34-35页 |
2.2.2 杨树LOX基因进化分析 | 第35-37页 |
2.2.3 杨树LOX基因的基因结构及保守基序分析 | 第37-41页 |
2.2.4 杨树LOX基因的定位和基因复制事件的鉴定 | 第41-42页 |
2.2.5 杨树LOX基因家族表达分析 | 第42-44页 |
2.2.6 杨树LOX基因家族响应MeJA诱导表达分析 | 第44-45页 |
2.3 讨论 | 第45-47页 |
第三章 LOX基因在四种模式植物间的分子进化 | 第47-64页 |
3.1 材料与方法 | 第47-48页 |
3.1.1 研究方法 | 第47-48页 |
3.2 结果与分析 | 第48-63页 |
3.2.1 四物种基因组中LOX基因的鉴定 | 第48-51页 |
3.2.2 旁系同源基因和直系同源基因的鉴定 | 第51-53页 |
3.2.3 LOX基因家族的系统发育及结构分析 | 第53-57页 |
3.2.4 物种内微共线性分析 | 第57-59页 |
3.2.5 物种间微共线性分析 | 第59-63页 |
3.3 讨论 | 第63-64页 |
第四章 PtLOX11基因的克隆及原核表达 | 第64-78页 |
4.1 材料与方法 | 第64-71页 |
4.1.1 植物材料 | 第64页 |
4.1.2 菌株和载体 | 第64页 |
4.1.3 酶及试剂 | 第64页 |
4.1.4 引物合成和测序 | 第64-65页 |
4.1.5 仪器设备 | 第65页 |
4.1.6 研究方法 | 第65-71页 |
4.2 结果与分析 | 第71-76页 |
4.2.1 PtLOX11基因的克隆和序列分析 | 第71-73页 |
4.2.2 PtLOX11的原核表达载体的验证 | 第73-74页 |
4.2.3 PtLOX11重组蛋白的诱导表达 | 第74页 |
4.2.4 PtLOX11重组蛋白最适pH值测定 | 第74-75页 |
4.2.5 PtLOX11重组蛋白催化产物的鉴定 | 第75-76页 |
4.3 讨论 | 第76-78页 |
第五章 PtLOX11基因的功能分析 | 第78-94页 |
5.1 材料与方法 | 第78-89页 |
5.1.1 植物材料 | 第78页 |
5.1.2 菌株和载体 | 第78页 |
5.1.3 酶及试剂 | 第78-79页 |
5.1.4 引物合成和测序 | 第79页 |
5.1.5 仪器设备 | 第79页 |
5.1.6 研究方法 | 第79-89页 |
5.2 结果与分析 | 第89-93页 |
5.2.1 PtLOX11的亚细胞定位分析 | 第89-90页 |
5.2.2 PtLOX11过量表达转基因拟南芥的获得 | 第90-91页 |
5.2.3 CRISPR/Cas9敲除株系的构建 | 第91-93页 |
5.3 讨论 | 第93-94页 |
结论 | 第94-95页 |
参考文献 | 第95-110页 |
作者简介 | 第110-111页 |
博士期间发表的主要研究论文 | 第111-112页 |
附录A 载体图谱和DNA分子量标准 | 第112-114页 |
附录B 附表 | 第114-121页 |
附录C 程序脚本语言 | 第121-122页 |