| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-23页 |
| 1.1 氧化应激与线粒体功能障碍 | 第10-12页 |
| 1.1.1 氧化应激诱导线粒体DNA发生突变 | 第10页 |
| 1.1.2 氧化应激影响线粒体呼吸链 | 第10-11页 |
| 1.1.3 氧化应激改变线粒体膜的通透性 | 第11页 |
| 1.1.4 氧化应激影响线粒体内钙离子的稳态 | 第11-12页 |
| 1.1.5 氧化应激影响线粒体动力学 | 第12页 |
| 1.2 线粒体功能障碍与神经退行性疾病 | 第12-16页 |
| 1.2.1 线粒体功能障碍与AD | 第13-14页 |
| 1.2.2 线粒体功能障碍与PD | 第14-15页 |
| 1.2.3 线粒体功能障碍与HD | 第15页 |
| 1.2.4 线粒体功能障碍与ALS | 第15-16页 |
| 1.3 雌激素与线粒体 | 第16-20页 |
| 1.3.1 雌激素受体 | 第16-17页 |
| 1.3.2 雌激素的作用机制 | 第17-19页 |
| 1.3.3 雌激素对线粒体功能的调节作用 | 第19-20页 |
| 1.4 葛根素的研究进展 | 第20-22页 |
| 1.5 本文的选题依据与研究内容 | 第22-23页 |
| 2 H_2O_2对PC12细胞的损伤作用 | 第23-33页 |
| 2.1 引言 | 第23页 |
| 2.2 实验材料和设备 | 第23-25页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第24页 |
| 2.2.3 主要试剂的配制 | 第24-25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-26页 |
| 2.3.1 PC12细胞的培养、复苏与冻存 | 第25页 |
| 2.3.2 MTT实验 | 第25页 |
| 2.3.3 PC12细胞形态学观察 | 第25-26页 |
| 2.3.4 Hochest33342染色 | 第26页 |
| 2.3.5 线粒体荧光探针(Mito-Red)检测线粒体的形态 | 第26页 |
| 2.3.6 线粒体膜电位的检测 | 第26页 |
| 2.4 统计学分析 | 第26-27页 |
| 2.5 实验结果 | 第27-32页 |
| 2.5.1 H_2O_2对细胞活力的影响 | 第27页 |
| 2.5.2 H_2O_2对PC12细胞形态学的影响 | 第27-29页 |
| 2.5.3 H_2O_2对细胞凋亡的影响 | 第29页 |
| 2.5.4 H_2O_2对线粒体形态的影响 | 第29-30页 |
| 2.5.5 H_2O_2对线粒体膜电位的影响 | 第30-32页 |
| 2.6 讨论 | 第32页 |
| 2.7 小结 | 第32-33页 |
| 3 葛根素对PC12细胞氧化应激损伤的保护作用 | 第33-46页 |
| 3.1 引言 | 第33页 |
| 3.2 实验材料与设备 | 第33-35页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第33-34页 |
| 3.2.2 实验设备 | 第34页 |
| 3.2.3 主要试剂的配制 | 第34-35页 |
| 3.3 实验方法 | 第35-37页 |
| 3.3.1 PC12细胞形态学观察 | 第35页 |
| 3.3.2 MTT实验 | 第35页 |
| 3.3.3 Hochest33342染色 | 第35页 |
| 3.3.4 线粒体荧光探针(Mito-Red)检测线粒体的形态 | 第35-36页 |
| 3.3.5 线粒体膜电位的检测 | 第36页 |
| 3.3.6 蛋白的提取与定量 | 第36页 |
| 3.3.7 MDA的检测 | 第36-37页 |
| 3.3.8 T-SOD的检测 | 第37页 |
| 3.4 统计学分析 | 第37-38页 |
| 3.5 实验结果 | 第38-44页 |
| 3.5.1 葛根素对PC12细胞活力的影响 | 第38页 |
| 3.5.2 葛根素对PC12细胞形态学的影响 | 第38-39页 |
| 3.5.3 葛根素对PC12细胞凋亡的影响 | 第39-40页 |
| 3.5.4 葛根素对PC12细胞线粒体的影响 | 第40-41页 |
| 3.5.5 葛根素对PC12细胞线粒体膜电位的影响 | 第41-43页 |
| 3.5.6 葛根素对PC12细胞MDA的影响 | 第43页 |
| 3.5.7 葛根素对PC12细胞T-SOD的影响 | 第43-44页 |
| 3.6 讨论 | 第44-45页 |
| 3.7 小结 | 第45-46页 |
| 4 葛根素对PC12细胞的保护作用机制 | 第46-66页 |
| 4.1 引言 | 第46页 |
| 4.2 实验材料与设备 | 第46-49页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 4.2.2 实验设备 | 第47-48页 |
| 4.2.3 主要试剂的配制 | 第48-49页 |
| 4.3 试验方法 | 第49-52页 |
| 4.3.1 PC12细胞形态学观察 | 第49页 |
| 4.3.2 MTT实验 | 第49页 |
| 4.3.3 Hochest33342染色 | 第49页 |
| 4.3.4 线粒体荧光探针(Mito-Red)检测线粒体的形态 | 第49页 |
| 4.3.5 ERβ在PC12细胞的定位 | 第49页 |
| 4.3.6 胞质和线粒体蛋白质的提取与定量 | 第49-50页 |
| 4.3.7 MDA的检测 | 第50页 |
| 4.3.8 T-SOD的检测 | 第50页 |
| 4.3.9 ERβ-siRNA转染 | 第50-51页 |
| 4.3.10 蛋白免疫印迹(Westernblot) | 第51-52页 |
| 4.4 统计学分析 | 第52页 |
| 4.5 实验结果 | 第52-64页 |
| 4.5.1 ICI182,780对PC12细胞活力的影响 | 第52-53页 |
| 4.5.2 ICI182,780对PC12细胞形态学的影响 | 第53-54页 |
| 4.5.3 ICI182,780对PC12细胞凋亡的影响 | 第54页 |
| 4.5.4 ICI182,780对PC12细胞线粒体形态的影响 | 第54-55页 |
| 4.5.5 ICI182,780对PC12细胞线粒体膜电位的影响 | 第55-56页 |
| 4.5.6 ICI182,780对PC12细胞MDA的影响 | 第56-57页 |
| 4.5.7 ICI182,780对PC12细胞T-SOD的影响 | 第57-58页 |
| 4.5.8 ERβ在PC12细胞中的分布 | 第58-59页 |
| 4.5.9 ERβ对PC12细胞活力的影响 | 第59-60页 |
| 4.5.10 ERβ对PC12细胞中线粒体相关蛋白Drp1表达的影响 | 第60-62页 |
| 4.5.11 ERβ对PC12细胞中线粒体相关蛋白Opa1表达的影响 | 第62-63页 |
| 4.5.12 ERβ对PC12细胞中Cyt-C的影响 | 第63-64页 |
| 4.6 讨论 | 第64-65页 |
| 4.7 小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-79页 |
