摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-9页 |
第一章 绪论 | 第15-23页 |
1.1 间质干细胞及其在肾损伤修复中的作用 | 第15-17页 |
1.1.1 间质干细胞 | 第15页 |
1.1.2 间质干细胞与肾损伤修复 | 第15-17页 |
1.1.3 间质干细胞疗法的不足和改进策略 | 第17页 |
1.2 白藜芦醇与再生医学 | 第17-20页 |
1.2.1 白藜芦醇及其生物学功能 | 第17-18页 |
1.2.2 白藜芦醇与肾损伤 | 第18-19页 |
1.2.3 白藜芦醇与间质干细胞 | 第19-20页 |
1.3 血小板源性生长因子-DD | 第20-23页 |
1.3.1 血小板源性生长因子-DD的生物学特性 | 第20页 |
1.3.2 PDGF-DD与ERK信号通路 | 第20-21页 |
1.3.3 PDGF-DD与血管生成 | 第21-23页 |
第二章 研究目的、方案、意义 | 第23-29页 |
2.1 研究目的 | 第23页 |
2.2 实验方案 | 第23-27页 |
2.2.1 RES预处理hucMSC的浓度和时间 | 第23页 |
2.2.2 RES修饰的hucMSC修复AKI体内外模型的建立 | 第23-24页 |
2.2.3 RES对hucMSC的生物学作用 | 第24-25页 |
2.2.4 RES改造hucMSC的相关机制 | 第25-26页 |
2.2.5 RES预处理的hucMSC修复AKI的机制研究 | 第26-27页 |
2.3 研究意义 | 第27-29页 |
第三章 RES预处理增强hucMSC修复AKI的实验研究 | 第29-45页 |
3.1 材料与仪器 | 第29-30页 |
3.1.1 细胞株 | 第29页 |
3.1.2 实验动物 | 第29页 |
3.1.3 主要试剂和耗材 | 第29-30页 |
3.1.4 主要仪器 | 第30页 |
3.2 实验方法 | 第30-37页 |
3.2.1 细胞培养 | 第30-31页 |
3.2.2 RES预处理 | 第31页 |
3.2.3 细胞实时监测 | 第31页 |
3.2.4 MTT法 | 第31-32页 |
3.2.5 AKI大鼠模型建立 | 第32页 |
3.2.6 顺铂损伤细胞模型建立 | 第32-33页 |
3.2.7 HE染色 | 第33页 |
3.2.8 组织损伤评分 | 第33页 |
3.2.9 免疫组织化学染色 | 第33-34页 |
3.2.10 TUNEL | 第34-35页 |
3.2.11 蛋白质分离 | 第35-36页 |
3.2.12 Westernblot | 第36页 |
3.2.13 凋亡双染实验 | 第36-37页 |
3.2.14 统计学分析 | 第37页 |
3.3 实验结果 | 第37-42页 |
3.3.1 RES预处理hucMSC的药物浓度和作用时间 | 第37-38页 |
3.3.2 RES促进hucMSC改善AKI大鼠肾功能 | 第38-39页 |
3.3.3 RES预处理增强hucMSC抑制体内肾小管细胞凋亡 | 第39-40页 |
3.3.4 RES预处理增强hucMSC抑制体外NRK-52E细胞凋亡 | 第40-42页 |
3.4 讨论 | 第42-45页 |
第四章 RES促进hucMSC自分泌PDGF-DD调控hucMSC增殖与凋亡 | 第45-57页 |
4.1 材料与仪器 | 第45-46页 |
4.1.1 细胞株 | 第45页 |
4.1.2 主要试剂和耗材 | 第45-46页 |
4.1.3 主要仪器 | 第46页 |
4.2 实验方法 | 第46-51页 |
4.2.1 细胞培养与RES预处理 | 第46页 |
4.2.2 蛋白质分离和Westernblot | 第46页 |
4.2.3 平板克隆 | 第46-47页 |
4.2.4 RNA提取 | 第47页 |
4.2.5 RNA浓度测定及逆转录 | 第47页 |
4.2.6 实时荧光定量PCR | 第47-48页 |
4.2.7 细胞上清(CdM)的收集 | 第48-49页 |
4.2.8 ELISA | 第49-50页 |
4.2.9 siRNA转染 | 第50页 |
4.2.10 统计学分析 | 第50-51页 |
4.3 实验结果 | 第51-54页 |
4.3.1 RES抑制hucMSC凋亡,促进hucMSC增殖 | 第51页 |
4.3.2 RES促进hucMSC自分泌PDGF-DD活化ERK通路 | 第51-52页 |
4.3.3 敲减PDGF-DD削弱RES对hucMSC增殖和凋亡的调控作用 | 第52-54页 |
4.4 讨论 | 第54-57页 |
第五章 RES-hucMSC通过旁分泌PDGF-DD改善AKI | 第57-65页 |
5.1 材料与仪器 | 第57页 |
5.1.1 细胞株 | 第57页 |
5.1.2 主要试剂和耗材 | 第57页 |
5.1.3 主要仪器 | 第57页 |
5.2 实验方法 | 第57-58页 |
5.2.1 细胞培养与RES预处理 | 第57-58页 |
5.2.2 AKI大鼠模型建立 | 第58页 |
5.2.3 HE染色和组织损伤评分 | 第58页 |
5.2.4 免疫组织化学染色和TUNEL | 第58页 |
5.2.5 蛋白质分离和Westernblot | 第58页 |
5.2.6 统计学分析 | 第58页 |
5.3 实验结果 | 第58-62页 |
5.3.1 RES-hucMSC通过旁分泌PDGF-DD活化ERK通路 | 第58-60页 |
5.3.2 敲减PDGF-DD削弱RES-hucMSC在AKI中的修复作用 | 第60-62页 |
5.4 讨论 | 第62-65页 |
第六章 RES-hucMSC通过旁分泌PDGF-DD促进血管生成 | 第65-73页 |
6.1 材料与仪器 | 第65-66页 |
6.1.1 细胞株 | 第65页 |
6.1.2 主要试剂和耗材 | 第65页 |
6.1.3 主要仪器 | 第65-66页 |
6.2 实验方法 | 第66-67页 |
6.2.1 细胞培养 | 第66页 |
6.2.2 细胞上清(CdM)的收集 | 第66页 |
6.2.3 细胞迁移 | 第66页 |
6.2.4 细胞生长 | 第66-67页 |
6.2.5 细胞实时监测 | 第67页 |
6.2.6 免疫荧光 | 第67页 |
6.2.7 统计学分析 | 第67页 |
6.3 实验结果 | 第67-71页 |
6.3.1 RES预处理增强hucMSC促血管生成能力 | 第67-69页 |
6.3.2 敲减PDGF-DD削弱RES-hucMSC的促血管生成能力 | 第69-71页 |
6.4 讨论 | 第71-73页 |
第七章 结论与展望 | 第73-75页 |
7.1 结论 | 第73-74页 |
7.2 展望 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-85页 |
致谢 | 第85-87页 |
在校期间发表的学术论文 | 第87页 |