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雷公藤甲素通过miR-188-5p/PTEN通路改善糖尿病肾小管上皮—间质转化的研究

中文摘要第4-7页
Abstract第7-10页
缩略语/符号说明第14-16页
前言第16-20页
    研究现状、成果第16-18页
    研究目的、方法第18-20页
一、雷公藤甲素对肾小管上皮间质转化的作用第20-47页
    1.1 对象和方法第20-37页
        1.1.1 研究对象第20页
        1.1.2 主要试剂第20-22页
        1.1.3 主要仪器设备第22-23页
        1.1.4 实验方法第23-36页
        1.1.5 统计方法第36-37页
    1.2 结果第37-44页
        1.2.1 各组实验动物的物理和生化参数第37页
        1.2.2 大鼠肾组织HE、PAS和Masson染色第37-39页
        1.2.3 免疫组化法检测大鼠肾脏E-cadherin、Vimentin和α-SMA的表达第39-40页
        1.2.4 Western Blotting法检测大鼠肾脏E-cadherin、Vimentin和α-SMA的表达第40页
        1.2.5 CCK 8法检测细胞生存率第40-41页
        1.2.6 光镜下观察细胞形态第41页
        1.2.7 免疫荧光法测HK-2细胞E-cadherin、Vimentin和α-SMA的表达第41-42页
        1.2.8 RT-PCR法检测HK-2细胞E-cadherin、Vimentin和α-SMA的表达第42-43页
        1.2.9 Western Blotting法检测HK-2细胞E-cadherin、Vimentin和α-SMA的表达第43-44页
    1.3 讨论第44-46页
        1.3.1 雷公藤甲素对糖尿病肾脏病理改变的影响第44页
        1.3.2 雷公藤甲素对高糖状态下大鼠肾脏和HK-2细胞EMT的影响第44-46页
    1.4 小结第46-47页
二、雷公藤甲素对肾小管上皮间质转化的作用机制探讨第47-52页
    2.1 对象和方法第47-48页
        2.1.1 研究对象第47页
        2.1.2 主要试剂第47页
        2.1.3 主要仪器设备第47页
        2.1.4 实验方法第47-48页
        2.1.5 统计方法第48页
    2.2 结果第48-50页
        2.2.1 Western Blotting法检测大鼠肾脏PTEN、PI3K、p-AKT和t-AKT的表达第48-49页
        2.2.2 Western Blotting法检测 HK-2细胞PTEN、PI3K、p-AKT和t-AKT的表达第49页
        2.2.3 抑制PI3K后检测细胞p-AKT/t-AKT水平和EMT的蛋白表达第49-50页
    2.3 讨论第50-51页
    2.4 小结第51-52页
三、雷公藤甲素通过miRNA影响肾小管上皮间质转化第52-70页
    3.1 对象和方法第52-58页
        3.1.1 研究对象第52页
        3.1.2 主要试剂第52页
        3.1.3 主要仪器设备第52-53页
        3.1.4 实验方法第53-57页
        3.1.5 统计方法第57-58页
    3.2 结果第58-66页
        3.2.1 基因芯片筛miRNAs结果及RT-PCR法检测大鼠肾组织和HK-2细胞miR-188-5p的表达第58-60页
        3.2.2 TargetScan搜索miRNAs的潜在靶基因第60-61页
        3.2.3 双荧光素酶报告基因实验第61页
        3.2.4 RT-PCR法检测 PTEN mRNA的表达第61-62页
        3.2.5 转染后RT-PCR检测miR-188-5p表达第62-63页
        3.2.6 转染后Western Blotting法检测HK-2细胞E-cadherin、Vimentin、α-SMA、PTEN、PI3K和p-AKT、t-AKT的表达第63-66页
    3.3 讨论第66-69页
        3.3.1 雷公藤甲素对miRNAs表达的影响第66-67页
        3.3.2 miR-188-5p参与EMT调节的作用靶基因第67-68页
        3.3.3 miR-188-5p低表达和过表达对HK-2细胞EMT的影响第68-69页
    3.4 小结第69-70页
结论第70-71页
参考文献第71-78页
发表论文和参加科研情况说明第78-79页
综述第79-95页
    综述参考文献第85-95页
致谢第95-96页
个人简历第96页

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