中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
缩略语/符号说明 | 第14-16页 |
前言 | 第16-20页 |
研究现状、成果 | 第16-18页 |
研究目的、方法 | 第18-20页 |
一、雷公藤甲素对肾小管上皮间质转化的作用 | 第20-47页 |
1.1 对象和方法 | 第20-37页 |
1.1.1 研究对象 | 第20页 |
1.1.2 主要试剂 | 第20-22页 |
1.1.3 主要仪器设备 | 第22-23页 |
1.1.4 实验方法 | 第23-36页 |
1.1.5 统计方法 | 第36-37页 |
1.2 结果 | 第37-44页 |
1.2.1 各组实验动物的物理和生化参数 | 第37页 |
1.2.2 大鼠肾组织HE、PAS和Masson染色 | 第37-39页 |
1.2.3 免疫组化法检测大鼠肾脏E-cadherin、Vimentin和α-SMA的表达 | 第39-40页 |
1.2.4 Western Blotting法检测大鼠肾脏E-cadherin、Vimentin和α-SMA的表达 | 第40页 |
1.2.5 CCK 8法检测细胞生存率 | 第40-41页 |
1.2.6 光镜下观察细胞形态 | 第41页 |
1.2.7 免疫荧光法测HK-2细胞E-cadherin、Vimentin和α-SMA的表达 | 第41-42页 |
1.2.8 RT-PCR法检测HK-2细胞E-cadherin、Vimentin和α-SMA的表达 | 第42-43页 |
1.2.9 Western Blotting法检测HK-2细胞E-cadherin、Vimentin和α-SMA的表达 | 第43-44页 |
1.3 讨论 | 第44-46页 |
1.3.1 雷公藤甲素对糖尿病肾脏病理改变的影响 | 第44页 |
1.3.2 雷公藤甲素对高糖状态下大鼠肾脏和HK-2细胞EMT的影响 | 第44-46页 |
1.4 小结 | 第46-47页 |
二、雷公藤甲素对肾小管上皮间质转化的作用机制探讨 | 第47-52页 |
2.1 对象和方法 | 第47-48页 |
2.1.1 研究对象 | 第47页 |
2.1.2 主要试剂 | 第47页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第47页 |
2.1.4 实验方法 | 第47-48页 |
2.1.5 统计方法 | 第48页 |
2.2 结果 | 第48-50页 |
2.2.1 Western Blotting法检测大鼠肾脏PTEN、PI3K、p-AKT和t-AKT的表达 | 第48-49页 |
2.2.2 Western Blotting法检测 HK-2细胞PTEN、PI3K、p-AKT和t-AKT的表达 | 第49页 |
2.2.3 抑制PI3K后检测细胞p-AKT/t-AKT水平和EMT的蛋白表达 | 第49-50页 |
2.3 讨论 | 第50-51页 |
2.4 小结 | 第51-52页 |
三、雷公藤甲素通过miRNA影响肾小管上皮间质转化 | 第52-70页 |
3.1 对象和方法 | 第52-58页 |
3.1.1 研究对象 | 第52页 |
3.1.2 主要试剂 | 第52页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第52-53页 |
3.1.4 实验方法 | 第53-57页 |
3.1.5 统计方法 | 第57-58页 |
3.2 结果 | 第58-66页 |
3.2.1 基因芯片筛miRNAs结果及RT-PCR法检测大鼠肾组织和HK-2细胞miR-188-5p的表达 | 第58-60页 |
3.2.2 TargetScan搜索miRNAs的潜在靶基因 | 第60-61页 |
3.2.3 双荧光素酶报告基因实验 | 第61页 |
3.2.4 RT-PCR法检测 PTEN mRNA的表达 | 第61-62页 |
3.2.5 转染后RT-PCR检测miR-188-5p表达 | 第62-63页 |
3.2.6 转染后Western Blotting法检测HK-2细胞E-cadherin、Vimentin、α-SMA、PTEN、PI3K和p-AKT、t-AKT的表达 | 第63-66页 |
3.3 讨论 | 第66-69页 |
3.3.1 雷公藤甲素对miRNAs表达的影响 | 第66-67页 |
3.3.2 miR-188-5p参与EMT调节的作用靶基因 | 第67-68页 |
3.3.3 miR-188-5p低表达和过表达对HK-2细胞EMT的影响 | 第68-69页 |
3.4 小结 | 第69-70页 |
结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-78页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第78-79页 |
综述 | 第79-95页 |
综述参考文献 | 第85-95页 |
致谢 | 第95-96页 |
个人简历 | 第96页 |