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星星草(Puccinellia tenuiflora)叶片与叶绿体Na2CO3应答磷酸化蛋白质组学研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
1 绪论第13-38页
    1.1 盐碱胁迫对植物生长的影响第13页
    1.2 植物盐碱应答的生理机制第13-17页
        1.2.1 渗透调节物质积累第13-15页
        1.2.2 Na~+外排和区室化第15页
        1.2.3 细胞内活性氧自由基的清除第15-17页
    1.3 植物盐碱应答的分子机制第17-27页
        1.3.1 叶绿体抗氧化防御系统第17-23页
        1.3.2 叶绿体类囊体膜重塑以及光系统Ⅱ活性调节第23-25页
        1.3.3 光合作用与光呼吸途径第25页
        1.3.4 叶绿体内的渗透与离子平衡第25-26页
        1.3.5 ABA和蛋白激酶信号第26-27页
        1.3.6 叶绿体基因表达和蛋白质周转第27页
    1.4 植物盐碱应答磷酸化蛋白质组学研究进展第27-33页
        1.4.1 稳定同位素标记的定量磷酸化蛋白质组学技术第27-31页
        1.4.2 二氧化钛磷酸化肽段富集技术第31页
        1.4.3 植物盐碱应答磷酸化蛋白质组学研究概述第31-33页
    1.5 星星草盐碱应答机制研究进展第33-36页
        1.5.1 星星草盐碱应答分子生理学研究进展第34-35页
        1.5.2 星星草盐碱应答转录组学与蛋白质组学研究进展第35-36页
    1.6 研究目的和意义第36-38页
2 实验材料与方法第38-46页
    2.1 星星草培养与Na_2CO_3处理第38页
    2.2 星星草叶片与叶绿体收集第38-39页
        2.2.1 星星草对照组与处理组叶片材料收集第38页
        2.2.2 星星草对照组与处理组叶绿体分离与收集第38-39页
    2.3 星星草叶片与叶绿体Na_2CO_3应答生理学分析第39-40页
        2.3.1 快速叶绿素荧光动力学OJIP曲线测定第39页
        2.3.2 渗透调节物质甘氨酸甜菜碱含量测定第39页
        2.3.3 叶片O_2~-生成速率与H_2O_2含量测定第39页
        2.3.4 叶片抗氧化剂含量测定第39-40页
        2.3.5 叶片抗氧化酶活性测定第40页
        2.3.6 叶绿体抗氧化剂含量测定第40页
        2.3.7 叶绿体抗氧化酶活性测定第40页
    2.4 星星草叶片Na_2CO_3应答2-DE蛋白质组学分析第40-41页
        2.4.1 叶片丰度变化蛋白质的胶内酶切与质谱鉴定第40-41页
        2.4.2 叶片丰度变化蛋白质的数据库搜索与蛋白质功能注释第41页
    2.5 星星草叶片Na_2CO_3应答磷酸化蛋白质组学分析第41-43页
        2.5.1 叶片蛋白质样品制备第41页
        2.5.2 叶片蛋白质iTRAQ标记第41-42页
        2.5.3 叶片磷酸化肽段TiO_2富集第42页
        2.5.4 叶片磷酸化蛋白质质谱鉴定、数据库搜索与定量分析第42-43页
    2.6 星星草叶绿体Na_2CO_3应答磷酸化蛋白质组学分析第43-44页
        2.6.1 叶绿体蛋白质样品制备、还原、烷基化与酶解第43页
        2.6.2 叶绿体蛋白质稳定同位素二甲基标记第43页
        2.6.3 叶绿体磷酸化肽段TiO_2富集与质谱分析第43页
        2.6.4 叶绿体磷酸化蛋白质数据库搜索与定量分析第43-44页
    2.7 星星草Na_2CO_3应答蛋白质与磷酸化蛋白质的生物信息学分析第44页
        2.7.1 叶片与叶绿体蛋白质和磷酸化蛋白质功能分类、亚细胞定位预测以及聚类分析第44页
        2.7.2 叶片与叶绿体磷酸化蛋白质三维结构预测第44页
    2.8 星星草叶绿体Na_2CO_3应答磷酸化蛋白质同源基因的qRT-PCR分析第44-45页
        2.8.1 星星草叶片RNA提取及反转录第44页
        2.8.2 同源基因cDNA序列查找、引物设计与合成第44-45页
        2.8.3 同源基因的qRT-PCR分析与结果计算第45页
    2.9 星星草Na_2CO_3应答蛋白质的免疫印迹分析第45页
    2.10 统计学分析第45-46页
3 结果第46-75页
    3.1 星星草Na_2CO_3应答生理学特征第46-52页
        3.1.1 星星草叶片Na_2CO_3应答光合特征分析第46-47页
        3.1.2 星星草叶片Na_2CO_3应答甘氨酸甜菜碱含量分析第47-48页
        3.1.3 星星草叶片Na_2CO_3应答O_2~-生成速率与H_2O_2含量分析第48页
        3.1.4 星星草叶片Na_2CO_3应答抗氧化剂含量分析第48-49页
        3.1.5 星星草叶片Na_2CO_3应答抗氧化酶活性分析第49-50页
        3.1.6 星星草叶绿体Na_2CO_3应答抗氧化剂含量分析第50-51页
        3.1.7 星星草叶绿体Na_2CO_3应答抗氧化酶活性分析第51-52页
    3.2 星星草叶片Na_2CO_应答定量蛋白质组学分析第52-61页
        3.2.1 星星草叶片Na_2CO_3应答蛋白质分析第52-54页
        3.2.2 星星草叶片Na_2CO_3应答蛋白质的功能类群特征第54-61页
    3.3 星星草叶片Na_2CO_3应答磷酸化蛋白质组学分析第61-66页
        3.3.1 星星草叶片磷酸化蛋白质的鉴定与定量分析第61-62页
        3.3.2 星星草叶片磷酸化蛋白质的功能类群特征第62-66页
    3.4 星星草叶绿体Na_2CO_3应答磷酸化蛋白质组学分析第66-70页
        3.4.1 星星草叶绿体磷酸化蛋白质的鉴定与定量分析第66-68页
        3.4.2 星星草叶绿体磷酸化蛋白质功能类群特征第68-70页
    3.5 星星草Na_2CO_3应答磷酸化蛋白质三维结构分析第70-73页
    3.6 星星草叶绿体Na_2CO_3应答磷酸化蛋白质同源基因表达分析第73-74页
    3.7 星星草叶绿体Na_2CO_3应答蛋白质的免疫印迹分析第74-75页
4 讨论第75-90页
    4.1 星星草Na_2CO_3应答的光保护机制第75-82页
        4.1.1 星星草Na_2CO_3应答光系统Ⅱ与光系统Ⅰ之间的光能平衡第76页
        4.1.2 星星草Na_2CO_3应答的热耗散机制第76-81页
        4.1.3 星星草Na_2CO_3应答光系统Ⅰ环式电子传递变化第81-82页
    4.2 星星草Na_2CO_3应答光系统Ⅱ的损伤修复过程第82-83页
    4.3 星星草Na_2CO_3应答磷酸化蛋白质对光系统Ⅰ与ATP合成酶活性的调节第83-84页
    4.4 星星草Na_2CO_应答二氧化碳同化与光呼吸作用的变化第84-85页
    4.5 星星草Na_2CO_3应答叶绿素生物合成的调节第85页
    4.6 星星草Na_2CO_3应答叶绿体运动与类囊体膜组织第85-86页
    4.7 星星草Na_2CO_3应答叶片与叶绿体ROS平衡第86-87页
    4.8 星星草Na_2CO_应答渗透平衡、离子稳态以及信号转导第87-88页
    4.9 星星草Na_2CO_3应答碳氮代谢、基因表达和蛋白质周转第88-90页
结论第90-92页
参考文献第92-109页
攻读学位期间发表的学术论文第109-110页
致谢第110-112页
东北林业大学博士学位论文修改情况确认表第112-113页

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