内容提要 | 第4-8页 |
第一章 前言 | 第8-21页 |
1.1 COX-2概述 | 第8-10页 |
1.1.1 COX-2的基本特性 | 第8页 |
1.1.2 COX-2的催化机理 | 第8-9页 |
1.1.3 COX-2的作用 | 第9-10页 |
1.2 COX-2与肝癌 | 第10-15页 |
1.2.1 COX-2与肿瘤 | 第10-11页 |
1.2.2 COX-2与肝癌发生 | 第11-13页 |
1.2.3 COX-2与肝癌的血管生成 | 第13-14页 |
1.2.4 COX-2与肝癌的转移 | 第14页 |
1.2.5 COX-2与化疗药物耐药性 | 第14-15页 |
1.3 COX-2抑制剂的现状 | 第15-17页 |
1.3.1 COX-2抑制剂的作用特点及发展 | 第15-16页 |
1.3.2 COX-2抑制剂与肿瘤治疗 | 第16-17页 |
1.3.3 COX-2抑制剂的局限性 | 第17页 |
1.4 胞内抗体 | 第17-20页 |
1.4.1 胞内抗体简介 | 第17-18页 |
1.4.2 胞内抗体的应用 | 第18-20页 |
1.5 本研究的立题目的和意义 | 第20-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-33页 |
2.1 实验材料 | 第21-24页 |
2.1.1 菌株、质粒和细胞株 | 第21页 |
2.1.2 引物设计(见表2.1、2.2) | 第21-22页 |
2.1.3 主要试剂与溶液 | 第22-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-33页 |
2.2.1 去内毒素质粒的提取 | 第24-25页 |
2.2.2 细胞培养 | 第25页 |
2.2.3 脂质体介导的细胞转染 | 第25-26页 |
2.2.4 RT-PCR实验 | 第26-28页 |
2.2.5 间接免疫荧光实验 | 第28-29页 |
2.2.6 Western blot分析 | 第29页 |
2.2.7 软琼脂集落形成实验 | 第29-30页 |
2.2.8 AnnexinV/PI双染流式细胞术检测分析 | 第30页 |
2.2.9 划痕实验 | 第30-31页 |
2.2.10 Transwell体外侵袭实验 | 第31页 |
2.2.11 实时定量PCR | 第31-33页 |
第三章 实验结果 | 第33-47页 |
3.1 Intra-OX-1在HepG2细胞中的瞬时表达 | 第33-34页 |
3.1.1 RT-PCR检测Intra-OX-1的表达 | 第33页 |
3.1.2 Western-blot检测Intra-OX-1的表达 | 第33-34页 |
3.1.3 间接免疫荧光实验检测Intra-OX-1的表达 | 第34页 |
3.2 Intra-OX-1稳定转染细胞系的鉴定 | 第34-35页 |
3.2.1 RT-PCR检测稳定转染细胞系中Intra-OX-1的表达 | 第34页 |
3.2.2 Western-blot检测稳定转染细胞系Intra-OX-1的表达 | 第34-35页 |
3.2.3 间接免疫荧光实验验证Intra-OX-1的稳定表达 | 第35页 |
3.3 胞内抗体Intra-OX-1能与细胞内COX-2结合 | 第35页 |
3.4 Intra-OX-1抑制HepG2细胞生长和增殖 | 第35-36页 |
3.5 Intra-OX-1诱导HepG2细胞凋亡 | 第36页 |
3.6 Intra-OX-1抑制HepG2细胞迁移能力 | 第36-37页 |
3.7 Intra-OX-1抑制HepG2细胞体外侵袭能力 | 第37页 |
3.8 Intra-OX-1对HepG2细胞内相关因子mRNA水平的影响 | 第37-47页 |
第四章 讨论 | 第47-49页 |
4.1 以COX-2为靶点的肝癌治疗策略 | 第47-48页 |
4.2 抗COX-2胞内抗体发挥抑瘤效应的作用机制 | 第48-49页 |
第五章 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-59页 |
中文摘要 | 第59-61页 |
Abstract | 第61-62页 |
作者简介 | 第63-64页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |