| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略语表 | 第11-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-29页 |
| 前言 | 第13页 |
| 1.1 高致病性禽流感的流行史 | 第13-14页 |
| 1.1.1 HPAIV H5N1在亚洲的发生与蔓延 | 第14页 |
| 1.2 禽流感病毒的病原学特征 | 第14-18页 |
| 1.2.1 病毒的分型 | 第14-15页 |
| 1.2.2 病毒的形态结构组成 | 第15-16页 |
| 1.2.3 病毒的基因组特征与编码蛋白 | 第16-18页 |
| 1.3 禽流感毒的致病性 | 第18-20页 |
| 1.3.1 禽流感病毒致病性的分子机理 | 第18-20页 |
| 1.3.2 禽流感病毒致病性的判定 | 第20页 |
| 1.4 禽流感毒的抗原变异 | 第20-24页 |
| 1.5 禽流感毒宿主限制性的分子基础 | 第24-25页 |
| 1.6 禽流感毒的传播 | 第25-26页 |
| 1.7 H5N1亚型AIV的遗传进化现状 | 第26-27页 |
| 1.8 研究目的与意义 | 第27-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-43页 |
| 2.1 主要材料 | 第29-31页 |
| 2.1.1 病料与毒株 | 第29页 |
| 2.1.2 分子克隆工具酶及试剂 | 第29页 |
| 2.1.3 菌株和质粒 | 第29页 |
| 2.1.4 血清与抗原 | 第29页 |
| 2.1.5 细菌用培养基 | 第29-30页 |
| 2.1.6 细胞用试剂 | 第30页 |
| 2.1.7 细胞和试验动物 | 第30页 |
| 2.1.8 主要实验器材 | 第30-31页 |
| 2.1.9 实验室条件 | 第31页 |
| 2.2 试验方法 | 第31-43页 |
| 2.2.1 禽流感病毒的分离鉴定与纯化 | 第31-36页 |
| 2.2.2 毒株的遗传进化与基因组特征分析 | 第36-38页 |
| 2.2.3 分离株的生物学特性 | 第38-40页 |
| 2.2.4 分离株对鸡和鸭的感染与致病性试验 | 第40页 |
| 2.2.5 H5N2亚型分离株致病机制的初步探索 | 第40-41页 |
| 2.2.6 分离株的抗原性分析 | 第41-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-68页 |
| 3.1 病毒的分离与初步鉴定 | 第43页 |
| 3.2 病毒HA与NA基因的克隆测序 | 第43-44页 |
| 3.3 混合感染病毒的空斑纯化及鉴定 | 第44-46页 |
| 3.3.1 混合感染的PCR鉴定 | 第44页 |
| 3.3.2 混合感染病毒的空斑纯化 | 第44-45页 |
| 3.3.3 PCR鉴定空斑纯化效果 | 第45-46页 |
| 3.4 纯化分离株的全基因组序列分析 | 第46-50页 |
| 3.4.1 8个片段的扩增结果 | 第46-47页 |
| 3.4.2 基因组关键氨位点的氨基酸序列分析: | 第47-48页 |
| 3.4.3 毒株各片段核苷酸序列最高同源性比对: | 第48-50页 |
| 3.5 分离株的各片段的遗传进化分析 | 第50-59页 |
| 3.5.1 HA基因的遗传进化分析 | 第50-51页 |
| 3.5.2 NA基因的遗传进化分析 | 第51-53页 |
| 3.5.3 PB2基因的遗传进化分析 | 第53-54页 |
| 3.5.4 PB1基因的遗传进化分析 | 第54-55页 |
| 3.5.5 PA及NP基因的同源进化分析 | 第55-56页 |
| 3.5.6 M基因遗传进化分析 | 第56-57页 |
| 3.5.7 NS基因的遗传进化分析 | 第57-58页 |
| 3.5.8 西藏分离株的基因型分析 | 第58-59页 |
| 3.6 H5N2亚型分离株的生物学特性 | 第59-65页 |
| 3.6.0 病毒的体外生物学特性 | 第59-60页 |
| 3.6.1 病毒对鸡的静脉接种指数 | 第60页 |
| 3.6.2 病毒对雏鸡的脑内接种指数 | 第60-61页 |
| 3.6.3 病毒对鸡的滴鼻感染试验 | 第61-62页 |
| 3.6.4 病毒在鸭体内增殖试验 | 第62页 |
| 3.6.5 病毒对小鼠的致病性试验 | 第62-63页 |
| 3.6.6 病毒的红细胞洗脱试验 | 第63-64页 |
| 3.6.7 病毒的神经氨酸酶活性测定 | 第64-65页 |
| 3.7 西藏分离株的抗原性分析 | 第65-68页 |
| 3.7.1 抗原差异性分析 | 第65-66页 |
| 3.7.2 Re-5疫苗对西藏分离株的免疫保护性评价 | 第66-67页 |
| 3.7.3 西藏分离株HA蛋白抗原位点分析 | 第67-68页 |
| 4 讨论 | 第68-71页 |
| 小结 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 致谢 | 第78页 |