中文摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-10页 |
第1章 综述 | 第16-28页 |
1.1 肥胖与慢性炎症 | 第16-18页 |
1.1.1 肥胖导致的脂肪组织慢性炎症的发生机制 | 第16-17页 |
1.1.2 脂肪组织慢性炎症中的巨噬细胞 | 第17-18页 |
1.1.3 脂肪组织中巨噬细胞与脂肪细胞的相互作用 | 第18页 |
1.1.4 脂肪组织慢性炎症的信号传导途径 | 第18页 |
1.2 炎症与MAPKS | 第18-25页 |
1.2.1 ERK信号通路与炎症 | 第19-20页 |
1.2.2 JNK信号通路与炎症 | 第20-23页 |
1.2.3 P38信号通路与炎症 | 第23-25页 |
1.3 MKP家族蛋白与炎症 | 第25-28页 |
1.3.1 MAPK炎症通路与MKPs | 第25-26页 |
1.3.2 MKP对炎症的调节作用 | 第26-27页 |
1.3.3 MKP5的研究进展 | 第27-28页 |
第2章 材料和试剂 | 第28-35页 |
2.1 实验动物 | 第28页 |
2.2 实验材料 | 第28-32页 |
2.2.1 细胞系 | 第28页 |
2.2.2 实验材料 | 第28页 |
2.2.3 实验仪器 | 第28-29页 |
2.2.4 主要试剂 | 第29-31页 |
2.2.5 Real-timePCR引物(小鼠) | 第31-32页 |
2.3 主要试剂配制 | 第32-35页 |
2.3.1 细胞培养试剂配制 | 第32页 |
2.3.2 WesternBlot试剂配制 | 第32-35页 |
第3章 实验方法 | 第35-42页 |
3.1 细胞培养 | 第35-36页 |
3.1.1 RAW264.7细胞培养 | 第35页 |
3.1.2 3T3-L1细胞培养 | 第35页 |
3.1.3 巨噬细胞中M1/M2型的诱导分化 | 第35-36页 |
3.1.4 RAW264.7和3T3-L1细胞共培养 | 第36页 |
3.2 建立MKP5稳定表达巨噬细胞系 | 第36-37页 |
3.2.1 确定G418对RAW264.7细胞的最小致死浓度 | 第36页 |
3.2.2 稳定表达MKP5巨噬细胞系的建立 | 第36-37页 |
3.3 检测MKP5对PA诱导的炎症反应的作用 | 第37-38页 |
3.3.1 检测PA诱导巨噬细胞炎症中MKP5及相关炎症因子的表达变化 | 第37页 |
3.3.2 检测MKP5对PA诱导炎症中炎症因子表达的影响 | 第37页 |
3.3.3 检测MKP5对巨噬细胞M1/M2表型转换的影响 | 第37-38页 |
3.3.4 检测巨噬细胞与脂肪细胞相互作用中MKP5对PA诱导的炎症反应的作用 | 第38页 |
3.4 检测MKP5对PA诱导MAPK炎症通路的作用 | 第38页 |
3.5 WesternBlot | 第38-39页 |
3.6 Real-timePCR | 第39-40页 |
3.7 动物实验 | 第40-41页 |
3.7.1 肥胖小鼠模型的建立 | 第40页 |
3.7.2 小鼠脂肪组织血管基质细胞分离及培养 | 第40-41页 |
3.8 重组腺病毒在293A细胞中的鉴定与扩增 | 第41页 |
3.8.1 重组腺病毒Ad-MKP5的鉴定 | 第41页 |
3.8.2 重组腺病毒的扩增 | 第41页 |
3.9 检测MKP5对小鼠原代血管基质细胞中炎症因子表达的影响 | 第41页 |
3.10 统计学分析 | 第41-42页 |
第4章 实验结果 | 第42-53页 |
4.1 构建MKP5稳定表达巨噬细胞系 | 第42页 |
4.2 PA对RAW264.7巨噬细胞MKP5及相关炎症因子的表达影响 | 第42-43页 |
4.3 检测MKP5对PA诱导巨噬细胞炎症中炎症因子表达的影响 | 第43-44页 |
4.4 MKP5对巨噬细胞M1、M2表型转换的影响 | 第44-45页 |
4.5 MKP5在巨噬细胞与脂肪细胞相互作用中对PA诱导的炎症反应的影响 | 第45-47页 |
4.6 MKP5对PA诱导RAW264.7细胞中MAPK通路活化的作用 | 第47-49页 |
4.7 重组腺病毒AD-MKP5的鉴定 | 第49-50页 |
4.8 肥胖小鼠模型的建立 | 第50-51页 |
4.9 检测MKP5基因对小鼠原代血管基质细胞中炎症因子表达的影响 | 第51-53页 |
第5章 讨论 | 第53-55页 |
第6章 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-68页 |
致谢 | 第68页 |