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MKP5在游离脂肪酸诱导巨噬细胞炎症反应中的作用及机制研究

中文摘要第4-7页
abstract第7-10页
第1章 综述第16-28页
    1.1 肥胖与慢性炎症第16-18页
        1.1.1 肥胖导致的脂肪组织慢性炎症的发生机制第16-17页
        1.1.2 脂肪组织慢性炎症中的巨噬细胞第17-18页
        1.1.3 脂肪组织中巨噬细胞与脂肪细胞的相互作用第18页
        1.1.4 脂肪组织慢性炎症的信号传导途径第18页
    1.2 炎症与MAPKS第18-25页
        1.2.1 ERK信号通路与炎症第19-20页
        1.2.2 JNK信号通路与炎症第20-23页
        1.2.3 P38信号通路与炎症第23-25页
    1.3 MKP家族蛋白与炎症第25-28页
        1.3.1 MAPK炎症通路与MKPs第25-26页
        1.3.2 MKP对炎症的调节作用第26-27页
        1.3.3 MKP5的研究进展第27-28页
第2章 材料和试剂第28-35页
    2.1 实验动物第28页
    2.2 实验材料第28-32页
        2.2.1 细胞系第28页
        2.2.2 实验材料第28页
        2.2.3 实验仪器第28-29页
        2.2.4 主要试剂第29-31页
        2.2.5 Real-timePCR引物(小鼠)第31-32页
    2.3 主要试剂配制第32-35页
        2.3.1 细胞培养试剂配制第32页
        2.3.2 WesternBlot试剂配制第32-35页
第3章 实验方法第35-42页
    3.1 细胞培养第35-36页
        3.1.1 RAW264.7细胞培养第35页
        3.1.2 3T3-L1细胞培养第35页
        3.1.3 巨噬细胞中M1/M2型的诱导分化第35-36页
        3.1.4 RAW264.7和3T3-L1细胞共培养第36页
    3.2 建立MKP5稳定表达巨噬细胞系第36-37页
        3.2.1 确定G418对RAW264.7细胞的最小致死浓度第36页
        3.2.2 稳定表达MKP5巨噬细胞系的建立第36-37页
    3.3 检测MKP5对PA诱导的炎症反应的作用第37-38页
        3.3.1 检测PA诱导巨噬细胞炎症中MKP5及相关炎症因子的表达变化第37页
        3.3.2 检测MKP5对PA诱导炎症中炎症因子表达的影响第37页
        3.3.3 检测MKP5对巨噬细胞M1/M2表型转换的影响第37-38页
        3.3.4 检测巨噬细胞与脂肪细胞相互作用中MKP5对PA诱导的炎症反应的作用第38页
    3.4 检测MKP5对PA诱导MAPK炎症通路的作用第38页
    3.5 WesternBlot第38-39页
    3.6 Real-timePCR第39-40页
    3.7 动物实验第40-41页
        3.7.1 肥胖小鼠模型的建立第40页
        3.7.2 小鼠脂肪组织血管基质细胞分离及培养第40-41页
    3.8 重组腺病毒在293A细胞中的鉴定与扩增第41页
        3.8.1 重组腺病毒Ad-MKP5的鉴定第41页
        3.8.2 重组腺病毒的扩增第41页
    3.9 检测MKP5对小鼠原代血管基质细胞中炎症因子表达的影响第41页
    3.10 统计学分析第41-42页
第4章 实验结果第42-53页
    4.1 构建MKP5稳定表达巨噬细胞系第42页
    4.2 PA对RAW264.7巨噬细胞MKP5及相关炎症因子的表达影响第42-43页
    4.3 检测MKP5对PA诱导巨噬细胞炎症中炎症因子表达的影响第43-44页
    4.4 MKP5对巨噬细胞M1、M2表型转换的影响第44-45页
    4.5 MKP5在巨噬细胞与脂肪细胞相互作用中对PA诱导的炎症反应的影响第45-47页
    4.6 MKP5对PA诱导RAW264.7细胞中MAPK通路活化的作用第47-49页
    4.7 重组腺病毒AD-MKP5的鉴定第49-50页
    4.8 肥胖小鼠模型的建立第50-51页
    4.9 检测MKP5基因对小鼠原代血管基质细胞中炎症因子表达的影响第51-53页
第5章 讨论第53-55页
第6章 结论第55-56页
参考文献第56-68页
致谢第68页

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