| 致谢 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11页 |
| 缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-29页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 1.1 植物向重力性生长的过程及机制研究进展 | 第14-22页 |
| 1.1.1 植物向重力性生长的过程 | 第14-15页 |
| 1.1.2 植物向重力性反应的机制 | 第15-18页 |
| 1.1.3 植物根系向重力性相关突变体研究进展 | 第18-22页 |
| 1.1.3.1 解释淀粉体-平衡石假说的突变体研究 | 第18-19页 |
| 1.1.3.2 解释Cholodny-Went理论的突变体研究 | 第19-22页 |
| 1.2 泛素化降解途径与植物根系向重力性研究进展 | 第22-28页 |
| 1.2.1 泛素化降解过程 | 第22-24页 |
| 1.2.2 E3的组成及分类 | 第24-26页 |
| 1.2.3 RING finger E3在植物根系中的功能研究进展 | 第26-28页 |
| 1.3 本研究的目的及意义 | 第28-29页 |
| 第二章 OsGLS1功能预测分析 | 第29-38页 |
| 2.1 方法 | 第29-30页 |
| 2.1.1 GLS1理化性质预测 | 第29页 |
| 2.1.2 GLS1结构预测 | 第29页 |
| 2.1.3 GLS1功能域预测 | 第29页 |
| 2.1.4 GLS1泛素化位点预测 | 第29-30页 |
| 2.2 结果与分析 | 第30-37页 |
| 2.2.1 GLS1理化性质分析 | 第30-32页 |
| 2.2.2 GLS1结构分析 | 第32-34页 |
| 2.2.2.1 GLS1二级结构分析 | 第32-33页 |
| 2.2.2.2 GLS1跨膜结构分析 | 第33-34页 |
| 2.2.3 GLS1功能域分析 | 第34-35页 |
| 2.2.4 GLS1泛素化位点分析 | 第35-37页 |
| 2.3 小结与讨论 | 第37-38页 |
| 第三章 OsGLS1体外泛素E3连接酶活性验证 | 第38-51页 |
| 引言 | 第38页 |
| 3.1 材料 | 第38页 |
| 3.2 方法 | 第38-45页 |
| 3.2.1 pET-28a-GLS1-100aa载体构建 | 第38-40页 |
| 3.2.2 His-GLS100aa原核蛋白诱导 | 第40-41页 |
| 3.2.3 His-GLS100aa原核蛋白纯化 | 第41-42页 |
| 3.2.4 His-GLS100aa泛素E3连接酶活性的体外验证 | 第42-45页 |
| 3.3 结果与分析 | 第45-49页 |
| 3.3.1 不同温度及IPTG浓度对His-GLS100aa融合蛋白表达量的影响 | 第45-47页 |
| 3.3.2 His-GLS100aa融合蛋白的纯化 | 第47-48页 |
| 3.3.3 His-GLS100aa体外泛素E3连接酶活性验证 | 第48-49页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 OsGLS1在拟南芥wav3中的功能验证 | 第51-61页 |
| 引言 | 第51页 |
| 4.1 材料 | 第51页 |
| 4.2 方法 | 第51-55页 |
| 4.2.1 拟南芥突变体的获得及鉴定 | 第51页 |
| 4.2.2 pF3PZPY122-GLS1CDS、pGWB505-GLS1CDS转化农杆菌EHA | 第51-52页 |
| 4.2.3 OsGLS1转化拟南芥wav3突变体 | 第52-53页 |
| 4.2.4 转基因拟南芥筛选条件优化 | 第53-54页 |
| 4.2.4.1 筛选培养基的选择 | 第53页 |
| 4.2.4.2 抗生素筛选浓度的优化 | 第53-54页 |
| 4.2.5 转基因阳性株系的表型观察 | 第54-55页 |
| 4.3 结果分析 | 第55-59页 |
| 4.3.1 拟南芥wav3突变体的鉴定 | 第55-56页 |
| 4.3.2 转基因拟南芥抗生素筛选浓度优化结果 | 第56-58页 |
| 4.3.3 35s：GLS1CDS/wav3 T2代表型分析 | 第58-59页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第59-61页 |
| 第五章 结论与展望 | 第61-63页 |
| 5.1 结论 | 第61页 |
| 5.2 展望 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 附录 | 第70-71页 |
| 1. 6X His-tag融合蛋白纯化试剂配方 | 第70-71页 |
| 2. 拟南芥基因组DNA的小量提取(TPS法) | 第71页 |
| 3. 1/2MS(1L)配方 | 第71页 |
