| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第14-37页 |
| 1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第14-15页 |
| 1.2 肿瘤转移过程 | 第15-26页 |
| 1.2.1 肿瘤细胞的局部侵袭 | 第16-19页 |
| 1.2.2 肿瘤细胞进入血管淋巴管 | 第19-20页 |
| 1.2.3 肿瘤细胞在循环系统中生存 | 第20-21页 |
| 1.2.4 肿瘤细胞进入新的组织器官 | 第21-23页 |
| 1.2.5 肿瘤细胞适应新环境并增殖形成转移灶 | 第23-26页 |
| 1.3 转录因子SP1对肿瘤转移调控作用 | 第26-30页 |
| 1.3.1 Sp1调控的蛋白编码基因 | 第27-29页 |
| 1.3.2 Sp1调控的非蛋白编码基因 | 第29-30页 |
| 1.4 miRNA在肿瘤转移中的作用 | 第30-35页 |
| 1.4.1 参与调控肿瘤转移的miRNA | 第31-33页 |
| 1.4.2 miR-3178简介 | 第33-35页 |
| 1.5 本文的主要研究内容 | 第35-37页 |
| 1.5.1 主要研究内容 | 第35-36页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第36-37页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第37-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第37-41页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第37页 |
| 2.1.2 质粒载体 | 第37页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第37-38页 |
| 2.1.4 引物以及miRNA序列 | 第38-39页 |
| 2.1.5 抗体 | 第39页 |
| 2.1.6 试剂与仪器 | 第39-40页 |
| 2.1.7 数据分析网站 | 第40-41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-49页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第41页 |
| 2.2.2 RNA提取 | 第41页 |
| 2.2.3 反转录合成cDNA | 第41-42页 |
| 2.2.4 实时定量PCR | 第42-43页 |
| 2.2.5 ChIP | 第43-44页 |
| 2.2.6 WesternBlot | 第44-45页 |
| 2.2.7 划痕实验 | 第45页 |
| 2.2.8 Transwell实验 | 第45页 |
| 2.2.9 双荧光素酶报告基因检测 | 第45-46页 |
| 2.2.10 裸鼠体内转移模型的建立 | 第46页 |
| 2.2.11 石蜡包埋切片 | 第46-47页 |
| 2.2.12 组织切片H&E染色 | 第47-48页 |
| 2.2.13 组织切片DAPI染色 | 第48页 |
| 2.2.14 统计学方法 | 第48-49页 |
| 第3章 Sp1对miR-3178的表达调控分析 | 第49-63页 |
| 3.1 引言 | 第49页 |
| 3.2 SP1与miR-3178表达相关性分析 | 第49-53页 |
| 3.2.1 miRNA表达谱分析 | 第49-51页 |
| 3.2.2 蛋白酶体抑制剂处理后SP1表达分析 | 第51-52页 |
| 3.2.3 肿瘤细胞系中SP1与miR-3178表达分析 | 第52-53页 |
| 3.3 Sp1对miR-3178的转录调控分析 | 第53-57页 |
| 3.3.1 miR-3178启动子区域的Sp1结合位点预测 | 第53-54页 |
| 3.3.2 Sp1对miR-3178的转录调控 | 第54-57页 |
| 3.3.3 外源Sp1对miR-3178表达调控分析 | 第57页 |
| 3.4 SP1在肿瘤组织中的表达分析 | 第57-61页 |
| 3.5 本章小结 | 第61-63页 |
| 第4章 miR-3178在肿瘤转移中的作用 | 第63-84页 |
| 4.1 引言 | 第63页 |
| 4.2 miR-3178在体外调控肿瘤细胞迁移与侵袭分析 | 第63-72页 |
| 4.2.1 miR-3178对高转移肿瘤细胞系转移调控作用 | 第64-68页 |
| 4.2.2 抑制miR-3178后低转移肿瘤细胞系转移能力分析 | 第68-72页 |
| 4.3 miR-3178在体内对肿瘤细胞转移的调控作用 | 第72-83页 |
| 4.3.1 细胞系构建 | 第73-75页 |
| 4.3.2 裸鼠体内转移模型构建 | 第75页 |
| 4.3.3 体内肿瘤转移监测 | 第75-77页 |
| 4.3.4 利用组织切片染色检测肿瘤转移 | 第77-83页 |
| 4.4 本章小结 | 第83-84页 |
| 第5章 miR-3178靶基因分析 | 第84-103页 |
| 5.1 引言 | 第84页 |
| 5.2 miR-3178下游靶基因预测 | 第84-85页 |
| 5.3 miR-3178下游靶基因验证 | 第85-91页 |
| 5.3.1 载体构建 | 第85-86页 |
| 5.3.2 miR-3178对TRIOBP的翻译调控 | 第86-87页 |
| 5.3.3 外源miR-3178对TRIOBP-5/1表达调控 | 第87-88页 |
| 5.3.4 抑制miR-3178后TRIOBP-5/1表达分析 | 第88-89页 |
| 5.3.5 miR-3178调控TRIOBP-5/1蛋白表达水平分析 | 第89-91页 |
| 5.4 TRIOBP参与调控肿瘤转移分析 | 第91-101页 |
| 5.4.1 TRIOBP-5/1表达与肿瘤细胞转移能力相关性分析 | 第91-92页 |
| 5.4.2 TRIOBP-1对细胞铺展能力影响分析 | 第92-95页 |
| 5.4.3 TRIOBP-1调控肿瘤转移分析 | 第95-101页 |
| 5.5 本章小结 | 第101-103页 |
| 结论 | 第103-105页 |
| 参考文献 | 第105-119页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文及其它成果 | 第119-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
| 个人简历 | 第122页 |
