| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| 1.1 角蛋白酶概述 | 第8-11页 |
| 1.1.1 角蛋白酶 | 第8页 |
| 1.1.2 角蛋白酶的生物化学性质 | 第8-10页 |
| 1.1.3 角蛋白酶的热稳定性研究 | 第10-11页 |
| 1.2 角蛋白酶的高效表达 | 第11-13页 |
| 1.2.1 角蛋白酶的表达与生产 | 第11-12页 |
| 1.2.2 基因工程改造策略 | 第12-13页 |
| 1.3 角蛋白酶的应用 | 第13-16页 |
| 1.3.1 降解朊病毒蛋白 | 第14页 |
| 1.3.2 治疗指甲疾病 | 第14页 |
| 1.3.3 治疗皮肤疾病 | 第14-15页 |
| 1.3.4 作为线虫杀虫剂 | 第15页 |
| 1.3.5 制备银纳米粒子 | 第15页 |
| 1.3.6 其他应用 | 第15-16页 |
| 1.4 本课题立题意义与研究内容 | 第16-17页 |
| 1.4.1 立题意义 | 第16页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 实验菌株和质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 培养基和培养条件 | 第17页 |
| 2.1.3 溶液配制方法与试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.4 实验主要仪器与设备 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-32页 |
| 2.2.1 角蛋白酶基因的挖掘与分析方法 | 第19-21页 |
| 2.2.2 大肠杆菌表达体系的建立 | 第21-22页 |
| 2.2.3 枯草芽孢杆菌表达体系的建立 | 第22-23页 |
| 2.2.4 酶活检测与蛋白分析方法 | 第23-24页 |
| 2.2.5 角蛋白酶粗酶液的酶学特性研究 | 第24-25页 |
| 2.2.6 启动子适配性改造 | 第25-28页 |
| 2.2.7 培养基组分优化与发酵罐放大 | 第28页 |
| 2.2.8 角蛋白酶的热稳定性改造 | 第28-30页 |
| 2.2.9 角蛋白酶生物法合成纳米银的应用 | 第30-32页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第32-54页 |
| 3.1 角蛋白酶挖掘、异源表达及酶学特性研究 | 第32-42页 |
| 3.1.1 角蛋白酶基因的挖掘与分析 | 第32-34页 |
| 3.1.2 角蛋白酶在大肠杆菌中的表达 | 第34-36页 |
| 3.1.3 角蛋白酶在枯草芽孢杆菌中的表达 | 第36-38页 |
| 3.1.4 角蛋白酶粗酶液的酶学特性研究 | 第38-42页 |
| 3.2 角蛋白酶的高效表达 | 第42-47页 |
| 3.2.1 启动子适配性改造对角蛋白酶表达的影响与分析 | 第42-45页 |
| 3.2.2 发酵产酶培养基组分优化 | 第45-46页 |
| 3.2.3 发酵罐放大产酶研究 | 第46-47页 |
| 3.3 角蛋白酶的热稳定性改造与应用研究 | 第47-54页 |
| 3.3.1 角蛋白酶的热稳定性改造 | 第47-50页 |
| 3.3.2 角蛋白酶生物法合成纳米银的应用 | 第50-54页 |
| 主要结论与展望 | 第54-56页 |
| 主要结论 | 第54页 |
| 展望 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第62页 |