| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 符号表 | 第8-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1.1 鸡干扰素 α 研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1.1 鸡IFN-α 的结构及理化特性 | 第13页 |
| 1.1.2 鸡IFN-α 的生物学活性 | 第13-15页 |
| 1.2 鸡白介素18研究进展 | 第15-18页 |
| 1.2.1 IL-18的结构特点 | 第16页 |
| 1.2.2 IL-18产生及分布 | 第16页 |
| 1.2.3 IL-18受体 | 第16页 |
| 1.2.4 IL-18的生物学功能 | 第16-18页 |
| 1.3 抗病毒中药研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3.1 中药抗病毒的作用机理 | 第18页 |
| 1.3.2 中药单体 | 第18-19页 |
| 1.3.3 单味中药 | 第19页 |
| 1.3.4 中药复方 | 第19-20页 |
| 1.4 IBDV研究进展 | 第20-22页 |
| 1.4.1 IBDV的理化特性 | 第20页 |
| 1.4.2 IBD的流行特点 | 第20页 |
| 1.4.3 临床症状 | 第20-21页 |
| 1.4.4 病理变化 | 第21页 |
| 1.4.5 诊断 | 第21页 |
| 1.4.6 防治 | 第21-22页 |
| 1.5 展望 | 第22-24页 |
| 第2章 重组鸡IFN-α-IL-18酵母载体的构建及表达 | 第24-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 质粒、菌株及试剂 | 第24页 |
| 2.1.2 主要试剂和培养基的配制 | 第24-26页 |
| 2.1.3 主要实验器材 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-30页 |
| 2.2.1 PCR引物设计与合成 | 第26页 |
| 2.2.2 重组质粒的提取及纯化 | 第26页 |
| 2.2.3 IFN-α 基因的PCR扩增 | 第26-27页 |
| 2.2.4 重组酵母表达载体pPICZ-IFN-α 的构建 | 第27-28页 |
| 2.2.5 重组酵母表达载体pPICZ-IFN-α-IL-18的构建 | 第28页 |
| 2.2.6 酵母感受态的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.7 酵母菌株的电转化 | 第29页 |
| 2.2.8 阳性转化子的筛选 | 第29-30页 |
| 2.2.9 pPICZ-IFN-α-IL-18的诱导表达及检测 | 第30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-32页 |
| 2.3.1 重组质粒pPICZ-IFN-α、pPICZ-IFN-α-IL-18的构建及鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.2 重组菌X-33/pPICZ-IFN-α、pPICZ-IFN-α-IL-18的鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3.3 表达产物的SDS-PAGE及Western blot分析 | 第32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第3章 重组鸡IFN-α-IL-18融合蛋白的生物学活性研究 | 第34-40页 |
| 3.1 材料 | 第34-35页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第34页 |
| 3.1.2 试剂 | 第34-35页 |
| 3.1.3 试验动物 | 第35页 |
| 3.1.4 主要培养基和配制的试剂 | 第35页 |
| 3.1.5 主要试验器材 | 第35页 |
| 3.2 方法 | 第35-37页 |
| 3.2.1 重组蛋白的纯化及定量 | 第35页 |
| 3.2.2 重组蛋白促淋巴细胞转化试验 | 第35-36页 |
| 3.2.3 淋巴细胞增殖活性检测 | 第36页 |
| 3.2.4 淋巴细胞总蛋白及核蛋白的提取 | 第36页 |
| 3.2.5 鸡淋巴细胞总NF--κB和核NF-κB检测 | 第36-37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-39页 |
| 3.3.1 淋转试验结果 | 第37页 |
| 3.3.2 鸡淋巴细胞NF-κB检测分析 | 第37-39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-40页 |
| 第4章 重组鸡IFN-α-IL-18融合蛋白的抗IBDV效果研究及抗IBDV中药单体的筛选 | 第40-48页 |
| 4.1 材料 | 第40-41页 |
| 4.1.1 试剂及蛋白 | 第40页 |
| 4.1.2 鸡胚和病毒 | 第40页 |
| 4.1.3 主要培养基和配制的试剂 | 第40-41页 |
| 4.1.4 主要试验器材 | 第41页 |
| 4.2 方法 | 第41-42页 |
| 4.2.1 重组蛋白和IBDV鸡胚接种 | 第41页 |
| 4.2.2 重组IFN-α-IL18蛋白抗IBDV活性检测 | 第41-42页 |
| 4.2.3 试验分组及中药单体的接种 | 第42页 |
| 4.2.4 中药单体的抗IBDV效果检测 | 第42页 |
| 4.3 结果与分析 | 第42-45页 |
| 4.3.1 重组蛋白抗IBDV效果的检测结果 | 第42-44页 |
| 4.3.2 中药单体抗IBDV效果检测 | 第44-45页 |
| 4.4 讨论 | 第45-48页 |
| 4.4.1 重组鸡IFN-α-IL-18的抗IBDV效果 | 第45-46页 |
| 4.4.2 抗IBDV中药单体的筛选 | 第46-48页 |
| 第5章 重组鸡IFN-α-IL-18融合蛋白及中药单体的联合抗IBDV效果研究 | 第48-54页 |
| 5.1 试剂及蛋白 | 第48页 |
| 5.1.1 试验动物及病毒 | 第48页 |
| 5.1.2 主要培养基和配制的试剂 | 第48页 |
| 5.1.3 主要试验器材 | 第48页 |
| 5.2 方法 | 第48-50页 |
| 5.2.1 鸡胚试验分组 | 第48-49页 |
| 5.2.2 鸡胚接种培养 | 第49页 |
| 5.2.3 抗IBDV效果检测 | 第49页 |
| 5.2.4 攻毒保护率的测定 | 第49-50页 |
| 5.3 结果与分析 | 第50-52页 |
| 5.3.1 重组蛋白和中药单体联合抗IBDV效果的检测结果 | 第50-51页 |
| 5.3.2 重组蛋白及中药单体对IBDV联合预防试验结果 | 第51-52页 |
| 5.4 讨论 | 第52-53页 |
| 5.5 展望 | 第53-54页 |
| 第6章 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 致谢 | 第62-64页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第64页 |
