| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略词 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-31页 |
| 1.1 烟草及其致香物质 | 第14-15页 |
| 1.1.1 烟草属植物及其经济价值 | 第14页 |
| 1.1.2 烟草致香物质研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2 类黄酮物质合成及调控研究进展 | 第15-20页 |
| 1.2.1 类黄酮的种类与分布 | 第15-16页 |
| 1.2.2 类黄酮的合成途径及结构基因 | 第16-19页 |
| 1.2.3 类黄酮合成途径的调控 | 第19-20页 |
| 1.3 芦丁研究进展 | 第20-25页 |
| 1.3.1 芦丁理化特征 | 第20-21页 |
| 1.3.2 芦丁生物学特性研究 | 第21-22页 |
| 1.3.3 芦丁生物合成途径 | 第22-25页 |
| 1.4 UDP-糖基转移酶(UGT)研究进展 | 第25-29页 |
| 1.4.1 植物糖基转移酶与抗病能力 | 第26-27页 |
| 1.4.2 植物糖基转移酶与次生代谢产物合成 | 第27-28页 |
| 1.4.3 植物糖基转移酶与内源激素 | 第28-29页 |
| 1.4.4 植物糖基转移酶与信号转导 | 第29页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第29-31页 |
| 第二章 烟草NTUGT1基因表达载体构建及烟草遗传转化 | 第31-47页 |
| 2.1 研究材料 | 第31-32页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第31页 |
| 2.1.2 菌株及载体 | 第31页 |
| 2.1.3 酶与生化试剂 | 第31-32页 |
| 2.2 研究方法 | 第32-39页 |
| 2.2.1 烟草总RNA提取 | 第32页 |
| 2.2.2 烟草总RNA的质量检测 | 第32-33页 |
| 2.2.3 cDNA第一链合成 | 第33页 |
| 2.2.4 NtUGT1基因扩增 | 第33-35页 |
| 2.2.5 目的条带的回收 | 第35页 |
| 2.2.6 PCR产物的TOPO克隆 | 第35-36页 |
| 2.2.7 超纯质粒中量提取 | 第36页 |
| 2.2.8 DNA片段的酶切和连接 | 第36-37页 |
| 2.2.9 Gateway LR反应 | 第37页 |
| 2.2.10 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第37-38页 |
| 2.2.11 常用抗生素贮液及使用浓度 | 第38-39页 |
| 2.3 结果与分析 | 第39-46页 |
| 2.3.1 表达载体构建策略图 | 第39页 |
| 2.3.2 中间载体pTOPO-NtUGT1的构建 | 第39-42页 |
| 2.3.3 入门克隆pENTR~(TM)2B-NtUGT1的构建 | 第42-43页 |
| 2.3.4 通过LR反应得到植物表达载体 | 第43页 |
| 2.3.5 烟草遗传转化 | 第43-44页 |
| 2.3.6 转NtUGT1基因烟草的获得 | 第44-46页 |
| 2.4 小节与讨论 | 第46-47页 |
| 第三章 烟草NTUGT1的实时荧光定量PCR分析 | 第47-55页 |
| 3.1 材料与方法 | 第47-48页 |
| 3.2 结果与分析 | 第48-53页 |
| 3.2.1 NtUGT1在转基因烟草叶中的表达情况 | 第48-49页 |
| 3.2.2 NtCHS在转基因烟草中的表达情况 | 第49-50页 |
| 3.2.3 NtCHI在转基因烟草中的表达情况 | 第50页 |
| 3.2.4 NtF3H在转基因烟草中的表达情况 | 第50-51页 |
| 3.2.5 NtFLS在转基因烟草中的表达情况 | 第51-52页 |
| 3.2.6 NtDFR1在转基因烟草中的表达情况 | 第52页 |
| 2.2.7 NtANS1在转基因烟草中的表达情况 | 第52-53页 |
| 3.3 小结与讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 转基因烟草类黄酮物质含量分析 | 第55-69页 |
| 4.1 材料和方法 | 第55-56页 |
| 4.1.1 试剂 | 第55页 |
| 4.1.2 植物材料 | 第55页 |
| 4.1.3 分离纯化 | 第55页 |
| 4.1.4 色谱和质谱法 | 第55-56页 |
| 4.2 结果与分析 | 第56-68页 |
| 4.2.1 转基因烟草叶片中类黄酮物质含量 | 第56-60页 |
| 4.2.2 转基因烟草花中类黄酮物质的测定 | 第60-68页 |
| 4.3 小节与讨论 | 第68-69页 |
| 第五章 总结和展望 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-81页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文 | 第81-82页 |
| 附录B 烟草糖基转移酶NTUGT1的基因序列与氨基酸序列 | 第82-83页 |
