摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-9页 |
英文缩略表 | 第15-16页 |
第一章 引言 | 第16-24页 |
1.1 甜菜夜蛾的危害特点与防治概况 | 第16-17页 |
1.1.1 危害特点 | 第16页 |
1.1.2 防治概况 | 第16-17页 |
1.2 Cry毒素对甜菜夜蛾的毒效 | 第17-18页 |
1.2.1 Cry毒素的结构与功能 | 第17页 |
1.2.2 作用方式 | 第17-18页 |
1.2.3 Cry毒素对甜菜夜蛾的毒力 | 第18页 |
1.3 辛硫磷防治甜菜夜蛾的概况 | 第18页 |
1.3.1 辛硫磷简介 | 第18页 |
1.3.2 甜菜夜蛾对辛硫磷的抗性 | 第18页 |
1.4 农药亚致死效应 | 第18-19页 |
1.4.1 亚致死剂量 | 第18-19页 |
1.4.2 农药亚致死剂量对昆虫生长发育的影响 | 第19页 |
1.5 昆虫抗性产生机制 | 第19-21页 |
1.5.1 农药对昆虫酶活性的影响 | 第19-21页 |
1.5.2 P450与昆虫抗性的相关性 | 第21页 |
1.5.3 ABC转运蛋白与昆虫抗性的相关性 | 第21页 |
1.6 昆虫肠道微生物的研究 | 第21-22页 |
1.7 农药复配 | 第22页 |
1.7.1 复配的优缺点 | 第22页 |
1.7.2 复配的应用 | 第22页 |
1.8 研究的内容与目的 | 第22-24页 |
第二章 辛硫磷与Cry1Ca的混剂对甜菜夜蛾的协同增效作用 | 第24-30页 |
2.1 试验材料 | 第24-25页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第24页 |
2.1.2 供试药剂 | 第24页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第24-25页 |
2.2 试验方法 | 第25-26页 |
2.2.1 室内毒理生测 | 第25页 |
2.2.2 辛硫磷对甜菜夜蛾2龄幼虫的毒力测定 | 第25页 |
2.2.3 Cry1Ca对甜菜夜蛾2龄幼虫的毒力测定 | 第25-26页 |
2.2.4 混剂对甜菜夜蛾2龄幼虫的毒力测定 | 第26页 |
2.2.5 亚致死效应 | 第26页 |
2.2.6 毒力增效作用评估 | 第26页 |
2.3 数据统计及分析 | 第26-27页 |
2.4 结果与分析 | 第27-29页 |
2.4.1 辛硫磷、Cry1Ca对甜菜夜蛾2龄幼虫的毒力 | 第27-28页 |
2.4.2 混剂对甜菜夜蛾2龄幼虫的毒力 | 第28页 |
2.4.3 混剂对甜菜夜蛾的亚致死效应 | 第28-29页 |
2.5 讨论 | 第29-30页 |
第三章 辛硫磷与Cry1Ca的协同增效对甜菜夜蛾碱性磷酸酯酶表达水平的影响 | 第30-42页 |
3.1 试验材料 | 第30-31页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第30页 |
3.1.2 主要试剂 | 第30页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第30-31页 |
3.2 SesALP1、SesALP2基因全长的获得及序列分析 | 第31-32页 |
3.2.1 甜菜夜蛾总RNA提取 | 第31页 |
3.2.2 RACE模板的合成 | 第31页 |
3.2.3 SesALP1、SesALP2序列分析 | 第31-32页 |
3.3 SesALP1与SesALP2的时空表达分析 | 第32-34页 |
3.3.1 甜菜夜蛾各发育阶段和组织样本的收集 | 第32页 |
3.3.2 不同龄期和不同组织样本总RNA的提取 | 第32页 |
3.3.3 第一条链cDNA合成 | 第32页 |
3.3.4 荧光定量PCR | 第32-34页 |
3.4 协同增效对碱性磷酸酯酶基因mRNA表达量的影响 | 第34页 |
3.4.1 试虫收集 | 第34页 |
3.4.2 总RNA的提取 | 第34页 |
3.4.3 cDNA第一条链的合成 | 第34页 |
3.4.4 荧光定量PCR | 第34页 |
3.5 数据统计及分析 | 第34页 |
3.6 结果分析 | 第34-40页 |
3.6.1 SesALP1、SesALP2序列分析 | 第34-37页 |
3.6.2 SesALP1、SesALP2的时空表达分析 | 第37-38页 |
3.6.3 协同增效对甜菜夜蛾ALPmRNA表达水平的影响 | 第38-40页 |
3.7 讨论 | 第40-42页 |
第四章 辛硫磷与Cry1Ca的协同增效对甜菜夜蛾解毒酶及抗性相关基因的影响 | 第42-51页 |
4.1 试验材料 | 第42页 |
4.1.1 供试昆虫 | 第42页 |
4.1.2 主要试剂 | 第42页 |
4.1.3 主要仪器设备 | 第42页 |
4.2 酶活性测定 | 第42-43页 |
4.2.1 试虫处理 | 第42页 |
4.2.2 保护酶活性测定 | 第42-43页 |
4.2.3 解毒酶活性测定 | 第43页 |
4.2.4 可溶性蛋白含量测定 | 第43页 |
4.3 协同增效对抗性相关基因表达量的影响 | 第43-44页 |
4.3.1 试虫收集 | 第43页 |
4.3.2 总RNA的提取 | 第43页 |
4.3.3 cDNA第一条链的合成 | 第43页 |
4.3.4 荧光定量PCR | 第43-44页 |
4.4 数据统计及分析 | 第44页 |
4.5 结果与分析 | 第44-49页 |
4.5.1 协同增效对3种酶活影响 | 第44-45页 |
4.5.2 协同增效对P450mRNA表达水平的影响 | 第45-47页 |
4.5.3 协同增效对ABCC表达水平的影响 | 第47-49页 |
4.6 讨论 | 第49-51页 |
第五章 辛硫磷与Cry1Ca的协同增效对甜菜夜蛾体内共生微生物的影响 | 第51-63页 |
5.1 试验材料 | 第51页 |
5.1.1 供试昆虫 | 第51页 |
5.1.2 试虫处理 | 第51页 |
5.2 16SrDNA高通量测序 | 第51-52页 |
5.2.1 DNA的提取和PCR扩增 | 第51页 |
5.2.2 产物的混样和纯化 | 第51页 |
5.2.3 文库的构建和上机测序 | 第51-52页 |
5.3 信息分析 | 第52-53页 |
5.3.1 测序数据处理 | 第52页 |
5.3.2 OTU聚类和物种注释 | 第52-53页 |
5.3.3 样品复杂度分析(AlphaDiversity) | 第53页 |
5.3.4 多样品比较分析(BetaDiversity) | 第53页 |
5.4 结果分析 | 第53-62页 |
5.4.1 Illumina测序序列数据统计 | 第53-54页 |
5.4.2 物种多样性曲线 | 第54-55页 |
5.4.3 Beta多样性指数组间差异分析 | 第55-56页 |
5.4.4 不同处理对甜菜夜蛾体内菌群的种类及丰度的影响 | 第56页 |
5.4.5 不同处理对甜菜夜蛾体内优势菌群的影响 | 第56-59页 |
5.4.6 药剂处理组Ternaryplot分析 | 第59-60页 |
5.4.7 属水平物种进化树 | 第60页 |
5.4.8 LefSe | 第60-62页 |
5.5 讨论 | 第62-63页 |
第六章 全文总结 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
作者简历 | 第77页 |